兽药支原体检测

因业务调整，部分个人测试暂不接受委托，望见谅。

检测项目

支原体污染鉴定、细胞培养物支原体检出、疫苗制品无菌试验、抗生素残留量测定、细胞基质验证试验、微生物限度检查、DNA荧光染色检测、PCR特异性扩增试验、代谢活性测定、核酸杂交验证、电镜形态学观察、培养基适用性验证、指示细胞培养法、生化代谢谱分析、药敏试验（MIC值测定）、16SrRNA基因测序、细胞病变效应观察、支原体分型鉴定、病毒外源因子筛查、内毒素含量测定、蛋白质印迹验证、细胞膜完整性检测、代谢产物毒性试验、细胞增殖抑制试验、药物吸附率测定、培养基促生长能力验证、交叉污染溯源分析、低温保存活性测试、冻干制品复溶试验、运输稳定性验证

检测范围

兽用疫苗原液、细胞培养上清液、冻干保护剂溶液、血清制品原料、抗生素原料药粉针剂、预混剂中间体、发酵罐培养物、生物反应器收获液、病毒种子批样本、细胞库工作库样本、实验动物脏器组织匀浆液、乳制品原料奶样、肉制品加工副产品样本、饲料添加剂预混料样本、孵化场环境拭子样本、养殖场水源样本、屠宰场器械表面拭子样本、冷链运输包装材料样本、实验室细胞培养耗材样本、基因工程菌发酵液样本、诊断试剂盒阳性对照品样本、实验动物垫料样本、生物安全柜沉降菌样本洁净区环境监测平板样本层流台高效过滤器表面拭子样本培养基模拟灌装试验样本冻干机冷凝水样本纯化水系统取样点水样洁净服表面菌落采样样本

检测方法

1.微生物培养法：采用改良Friis液体培养基和固体琼脂培养基双相培养系统进行支原体分离培养，通过观察典型"煎蛋样"菌落形态进行初步鉴定2.PCR扩增法：针对支原体16SrRNA保守序列设计特异性引物，采用巢式PCR技术提高检测灵敏度至10CFU/mL3.荧光染色法：使用Hoechst33258荧光染料结合DNA特异性染色技术，在倒置荧光显微镜下观察细胞培养物中支原体污染4.代谢活性测定：基于支原体分解精氨酸产氨的特性设计生化反应体系通过pH指示剂颜色变化判断代谢活性5.扫描电镜观察：采用临界点干燥法制备样品通过场发射扫描电镜直接观察支原体特征性丝状结构6.液相色谱-质谱联用：建立多残留分析方法同时测定泰乐菌素替米考星等大环内酯类抗生素及其代谢产物7.酶联免疫吸附法：开发高灵敏度单克隆抗体试剂盒用于疫苗制品中牛血清白蛋白残留量的快速筛查8.流式细胞术：利用荧光标记抗体对支原体膜表面抗原进行特异性识别实现快速定量分析

检测标准

GB/T14926.8-2001实验动物支原体检验方法NY/T561-2015动物疫苗中支原体检验规程ChP2020三部生物制品无菌试验法USP<63>MycoplasmaTestsEP2.6.7MycoplasmaISO17089:2010Animalcellcultures-GeneralrequirementsforthecontrolofmicrobialcontaminationFDAGuidanceforIndustry:CharacterizationandQualificationofCellSubstratesVICHGL43:BovineserumqualitycontrolforveterinaryvaccinesOIETerrestrialManualChapter1.1.7TestsforsterilityandfreedomfromcontaminationofbiologicalmaterialsJPXVIIGeneralTestsMycoplasmaDetectionMethod

检测仪器

1.实时荧光定量PCR仪：用于支原体DNA的绝对定量分析配备TaqMan探针系统提高特异性2.全自动微生物鉴定系统：整合VITEK2Compact平台实现支原体的快速生化鉴定3.激光共聚焦显微镜：配合三维重构软件进行支原体与宿主细胞的相互作用研究4.超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪：建立多组分抗生素残留的痕量分析方法5.程序降温仪：用于疫苗制品的梯度冻存过程控制保证生物活性物质稳定性6.流式细胞分选仪：实现污染细胞的快速分离与富集提高后续分析灵敏度7.全自动酶标仪：配备震荡孵育模块完成ELISA实验的高通量自动化检测8.生物大分子相互作用分析系统：基于表面等离子共振技术研究药物-靶点结合动力学

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件