中药注射剂无菌保障测试检测

因业务调整，部分个人测试暂不接受委托，望见谅。

检测项目

微生物限度检查：检查中药注射剂中细菌、真菌及酵母菌的污染数量，采用平皿法或薄膜过滤法，细菌限度≤100cfu/ml（小容量注射剂）、≤50cfu/ml（大容量注射剂），真菌及酵母菌限度≤10cfu/ml，抽样量≥10ml/批。

无菌检查：确认中药注射剂是否含有活的微生物，采用直接接种法或薄膜过滤法，培养条件为30-35℃（细菌）、20-25℃（真菌），培养时间14天，每批样品检验数量≥20支（瓶），样品处理过程在无菌环境中进行。

灭菌效果验证：评估灭菌工艺对中药注射剂的灭菌能力，采用生物指示剂法（如嗜热脂肪芽孢杆菌ATCC 7953、枯草芽孢杆菌黑色变种ATCC 9372），存活概率≤10⁻⁶，生物指示剂含菌量1×10⁶-1×10⁷cfu/支，灭菌参数（温度、压力、时间）符合工艺要求。

内毒素检查：检测中药注射剂中的内毒素含量，采用鲎试剂凝胶法或光度法，限值≤0.5EU/ml（小容量注射剂）、≤0.25EU/ml（大容量注射剂），检测范围0.01-100EU/ml，重复性≤5%，回收率≥80%。

热原检查：采用家兔法检测注射剂中的热原物质，每只家兔注射剂量按体重计算（0.5-5ml/kg），体温升高值≤0.6℃，3只家兔总升高值≤1.4℃，若有1只家兔体温升高超过0.6℃，需另取5只家兔复试，复试中体温升高超过0.6℃的家兔不超过1只。

无菌灌装模拟试验：模拟生产过程中的无菌灌装操作，采用培养基灌装法，每批灌装量不少于500ml，灌装速度≥20瓶/min，灌装精度±1%，污染率≤0.1%，每季度至少进行1次试验。

容器密封性检查：检查包装容器（玻璃安瓿、塑料输液瓶、胶塞）的密封性能，采用压力衰减法或真空衰减法，测试压力范围0-300kPa，压力保持时间≥30秒，泄漏率≤1×10⁻⁶Pa·m³/s，每批检验数量≥10个容器。

防腐剂有效性试验：评估防腐剂（如苯甲醇、山梨酸）对微生物的抑制作用，采用挑战试验，接种金黄色葡萄球菌（ATCC 6538）、大肠杆菌（ATCC 25922）、白色念珠菌（ATCC 10231）等菌株，接种量1×10⁵-1×10⁶cfu/ml，28天内微生物数量不增加，且第7天、14天、21天、28天的微生物数量均≤初始接种量的10%。

异常毒性检查：检测注射剂的急性毒性反应，采用小鼠腹腔注射法，每只小鼠注射0.5ml，观察7天内的死亡情况、行为变化（如抽搐、昏迷），死亡率≤0%，每组小鼠数量≥10只（体重18-22g）。

溶血与凝聚试验：检测对红细胞的破坏及凝聚作用，采用家兔红细胞悬液法（红细胞浓度2%），孵育温度37℃，孵育时间1小时，溶血率≤5%，无明显凝聚现象（凝聚物直径≥1mm视为阳性）。

生产环境微生物监测：检测洁净区（A级、B级、C级）空气中的浮游菌、沉降菌及表面微生物，浮游菌采样器流量100L/min，采样时间≥10min，沉降菌培养皿直径90mm，培养时间48小时，浮游菌限度≤1cfu/m³（A级）、≤5cfu/m³（B级）、≤10cfu/m³（C级），表面微生物（接触碟法）限度≤1cfu/碟（A级）、≤5cfu/碟（B级）。

灭菌设备性能验证：验证灭菌柜（如湿热灭菌柜、干热灭菌柜）的温度分布均匀性，采用温度传感器（精度±0.5℃），每台灭菌柜至少放置10个传感器，温度偏差≤±2℃（湿热灭菌）、≤±5℃（干热灭菌），冷点温度达到灭菌温度要求。

检测范围

中药注射剂原料：包括中药材提取物（如黄芪提取物、丹参提取物）、中药饮片提取液、中药有效成分中间体（如人参皂苷、银杏内酯），检测微生物限度、内毒素含量。

中药注射剂成品：涵盖小容量注射剂（1-20ml，如柴胡注射液、清开灵注射液）、大容量注射剂（100-500ml，如参麦注射液、血塞通注射液）、冻干粉针剂（如注射用双黄连、注射用益气复脉），验证最终产品的无菌状态。

中药注射剂包装材料：如玻璃安瓿（1ml、2ml、5ml）、塑料输液瓶（PVC、PP材质）、橡胶塞（丁基胶塞、卤化丁基胶塞）、铝盖，检测包装材料的无菌性、密封性、相容性（如不溶性微粒、浸出物）。

中药注射剂生产用水：包括纯化水（用于提取、配制）、注射用水（用于最终配制、洗瓶）、灭菌注射用水（用于稀释），检测微生物限度（≤100cfu/ml）、内毒素含量（≤0.25EU/ml）、电导率（≤1.3μS/cm，25℃）。

中药注射剂生产环境：如洁净区（A级：灌装机内部、无菌采样点；B级：灌装机周围；C级：配制间、过滤间）的空气、墙面、地面、设备表面，检测浮游菌、沉降菌、表面微生物、尘埃粒子（A级：≥0.5μm粒子≤3520个/m³，≥5μm粒子≤29个/m³）。

中药注射剂生产设备：如灌装机（活塞式灌装机、蠕动泵灌装机）、灭菌柜（湿热灭菌柜、干热灭菌柜）、微孔过滤器（0.22μm、0.45μm，聚醚砜膜、硝酸纤维素膜）、配液罐，验证设备的灭菌效果、无菌操作能力、药液稳定性（如不溶性微粒增加量≤10%）。

中药注射剂辅料：如溶剂（注射用甘油、注射用丙二醇）、防腐剂（苯甲醇、尼泊金乙酯）、增溶剂（聚山梨酯80、聚氧乙烯蓖麻油）、抗氧剂（维生素C、亚硫酸钠），检测微生物限度、内毒素含量、纯度（如聚山梨酯80的脂肪酸含量≤1%）。

中药注射剂临床试验用样品：用于Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期临床试验的样品，确保无菌状态符合《药物临床试验质量管理规范》（GCP）要求，每批样品均需进行无菌检查。

中药注射剂稳定性考察样品：加速稳定性试验（40℃±2℃，75%RH±5%RH）、长期稳定性试验（25℃±2℃，60%RH±5%RH）中的样品，检测无菌状态变化（如6个月内微生物限度无增加）、内毒素含量变化（≤限值）。

中药注射剂召回样品：因质量问题（如无菌检查不合格、包装破损）召回的产品，重新检测无菌保障指标（如无菌检查、容器密封性），确定召回原因（如生产过程污染、包装缺陷）。

中药注射剂仿制药：仿制药（如仿制丹参注射液、仿制参附注射液）的无菌保障测试，与原研药进行一致性评价（如灭菌工艺、无菌检查方法、内毒素限值）。

检测标准

GB/T 21303-2008 中药注射剂安全性检查指导原则（国家药品监督管理局）

USP <71> Sterility Tests（美国药典无菌检查）

EP 2.6.1 Sterility（欧洲药典无菌检查）

ISO 11737-1:2018 医疗器械灭菌 微生物学方法 第1部分：产品无菌试验

GB 8368-2018 中药注射剂包装用玻璃容器

USP <85> Bacterial Endotoxins Test（美国药典内毒素检查）

EP 2.6.28 Bacterial Endotoxins（欧洲药典内毒素检查）

ISO 13408-1:2017 医疗器械 包装 第1部分：材料、无菌屏障系统和包装系统的要求（包装密封性）

USP <1227> Aseptic Processing Simulation Tests（美国药典无菌工艺模拟试验）

GB 15980-2012 医院消毒卫生标准（生产环境微生物监测）

GB/T 19633-2005 最终灭菌医疗器械的包装（包装材料要求）

GB 50268-2008 给水排水管道工程施工及验收规范（生产用水管道要求）

EP 2.6.12 Test for Pyrogens（欧洲药典热原检查）

ISO 14644-1:2015 洁净室及相关受控环境 第1部分：空气洁净度等级（生产环境洁净度）

检测仪器

微生物限度检查仪：采用薄膜过滤法，用于中药注射剂中微生物的截留与培养，过滤面积≥90mm，过滤速度≤60s/100ml，支持多通道（4-8通道）同时过滤，配备真空系统（真空度≥0.08MPa）。

无菌检查隔离器：提供无菌操作环境，用于无菌检查的样品处理（如开启安瓿、接种培养基），洁净度达到ISO 5级，隔离器内压差≥10Pa，配备高效空气过滤器（HEPA，过滤效率≥99.99%）、过氧化氢熏蒸消毒系统（消毒时间≤60分钟）。

内毒素检测仪：采用鲎试剂凝胶法或光度法，检测中药注射剂中的内毒素含量，凝胶法检测时间≤180分钟（37℃ incubation），光度法检测时间≤60分钟，检测范围0.01-100EU/ml，重复性≤5%，支持自动加样、自动判读。

灭菌效果验证仪：用于灭菌工艺的生物指示剂挑战试验，监测灭菌过程中的温度（精度±0.5℃）、压力（精度±0.1bar）、时间（精度±1秒），支持数据存储（≥1000组）、曲线生成（温度-时间曲线、压力-时间曲线），符合ISO 11135（环氧乙烷灭菌）、ISO 11137（辐射灭菌）要求。

包装密封性测试仪：采用压力衰减法，检测中药注射剂包装容器的泄漏情况，测试压力范围0-300kPa，压力保持时间30-120秒，泄漏率分辨率1×10⁻⁷Pa·m³/s，支持自动数据计算（泄漏率）、报告生成（包含测试参数、结果）。

浮游菌采样器：用于生产环境空气中浮游菌的采集，采样流量100L/min（误差±5%），采样时间可设置（1-60分钟），采集介质为营养琼脂平板（直径90mm），支持多地点连续采样（如A级区、B级区同时采样），符合ISO 14698-1（微生物监测）要求。

热原检查仪：采用家兔法检测热原物质，自动记录家兔体温变化（每30分钟记录1次，共记录6次），体温测量精度±0.1℃，支持多只家兔（≥3只）同时测试，数据存储容量≥1000组，符合GB/T 16886.7-2015（生物学评价）要求。

无菌灌装模拟试验系统：模拟生产中的无菌灌装操作，配备灌装机（活塞式，精度±1%）、培养基储罐（316L不锈钢，容量≥500L）、输送系统（无菌软管），灌装速度≥20瓶/min，支持自动计数（灌装数量）、污染率统计（污染瓶数/总瓶数），符合USP <1227>（无菌工艺模拟）要求。

微生物培养箱：用于微生物限度及无菌检查的培养，温度范围10-60℃（精度±0.5℃），湿度范围40%-90%RH（精度±5%RH），支持恒温培养（如30-35℃细菌培养、20-25℃真菌培养）、恒湿培养（如霉菌培养），配备观察窗（防凝露）、报警系统（温度超标报警）。

内毒素工作标准品：用于内毒素检测仪的校准，含量100EU/支（误差±10%），溯源至美国药典委员会（USP）内毒素标准品，符合USP <85>、EP 2.6.28要求。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件