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成分分析,配方还原,食品检测,药品检测,化妆品检测,环境检测,性能检测,耐热性检测,安全性能检测,水质检测,气体检测,工业问题诊断,未知成分分析,塑料检测,橡胶检测,金属元素检测,矿石检测,有毒有害检测,土壤检测,msds报告编写等。

pcr荧光定量检测

发布时间:2025-07-01

关键词:pcr荧光定量测试方法,pcr荧光定量项目报价,pcr荧光定量测试范围

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来源:北京中科光析科学技术研究所

文章简介:

PCR荧光定量检测利用荧光信号实时监测核酸扩增过程,实现目标基因的定量与定性分析。该方法通过荧光染料或探针标记扩增产物,结合标准曲线计算初始模板量,具备灵敏度高、特异性强、重复性好的技术特性。检测要点包括扩增效率验证、熔解曲线分析、标准品设置及污染防控。
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因业务调整,部分个人测试暂不接受委托,望见谅。

检测项目

病原微生物定量:检测细菌/病毒载量,定量范围100-1010 copies/μL,检测限≤50 copies/reaction

基因表达分析:测定mRNA转录水平,相对定量ΔΔCt法精度±0.5 Ct值

转基因成分检测:筛查35S启动子/NOS终止子,特异性引物扩增片段80-150bp

SNP基因分型:TaqMan探针法分辨率≥99.7%,等位基因区分度RFU差值>5000

拷贝数变异:相对定量检测基因组CNV,RSD%≤5.0%(n=6)

药物代谢基因:CYP2D6/CYP2C19多态性检测,熔解曲线Tm值精度±0.3℃

肿瘤标志物:EGFR/KRAS突变检测,突变丰度检出限0.1%

食品安全溯源:肉源成分鉴定,种属特异性引物扩增效率90%-110%

水体微生物:总大肠菌群计数,定量线性R2≥0.995

植物病害诊断:真菌毒素合成基因检测,内参基因18S rRNA Ct值偏差<1.0

动物疫病监测:非洲猪瘟病毒ORF72基因检测,Ct值≤38判阳性

环境DNA分析:生物多样性评估,扩增COI基因片段长度650bp

检测范围

临床诊断样本:血清/血浆/组织活检样本,需满足核酸纯度A260/A280=1.8±0.2

食品药品基质:肉类加工品/乳制品/中药材,适用CTAB法提取

环境监测样本:污水/土壤/空气悬浮颗粒,建议扩增前进行离心富集

法医物证检材:毛发/唾液斑/骨骼化石,适用硅胶膜纯化试剂盒

转基因作物:大豆/玉米/水稻种子,检测阈值为0.9%含量

兽医诊断材料:动物全血/肛拭子/病变组织,需添加核酸稳定剂

细胞培养样本:贴壁/悬浮细胞系,推荐使用柱式DNA提取

海洋生物组织:鱼类肌肉/贝类消化腺,提取缓冲液含5M GuHCl

工业发酵产品:重组蛋白工程菌,检测质粒拷贝数变异

植物检疫对象:种子携带病原真菌,检测灵敏度达5孢子/克

昆虫媒介生物:蚊虫/蜱虫病原体筛查,样本保存温度≤-70℃

古DNA研究样本:化石/考古遗迹材料,需专用防污染扩增体系

检测标准

ISO 20395:2019 生物技术-核酸定量方法要求

GB/T 37875-2019 DNA实时荧光定量检测方法通则

ASTM E2893-19 实时PCR系统性能验证标准指南

YY/T 1596-2017 人感染病原体实时PCR检测试剂盒

ISO 22174:2005 食源微生物PCR检测通用要求

GB/T 38164-2019 常见畜禽病原微生物PCR检测方法

EP17-A2 临床实验室检测限建立与验证指南

SN/T 5334.3-2020 转基因检测实时荧光PCR方法

ISO 20813:2019 食品过敏原检测实时PCR法

GB 4789.41-2016 食品无菌检验分子生物学方法

CLSI MM06-A2 分子诊断定量方法验证标准

YY/T 1824-2021 EB病毒核酸检测试剂盒

检测仪器

定量PCR扩增仪:96孔模块温控精度±0.2℃,支持多重荧光通道检测

核酸提取工作站:磁珠法通量192样本/小时,提取效率≥95%

超微量分光光度计:检测范围2-15000 ng/μL,分辨率0.5 ng/μL

荧光显微成像系统:CCD分辨率2048×2048,支持FISH探针定位

自动移液平台:移液精度CV≤1.5%,可编程处理96孔板

梯度PCR仪:温度梯度范围30-100℃,单模块温差±0.5℃

超低温离心机:最大RCF 30000×g,转子温控-20℃±2℃

生物安全柜:HEPA过滤效率99.99%,气流流速0.45m/s±20%

电泳分析系统:紫外透射波长302nm,凝胶成像分辨率20μm

恒温金属浴:控温范围4-100℃,温度均匀性±0.3℃

真空浓缩离心机:浓缩温度≤45℃,真空度≤5mbar

超纯水制备仪:产水电阻率18.2 MΩ·cm,TOC≤3ppb

检测流程

1、咨询:提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品,安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据,编写报告草件,确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件

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