相对荧光定量检测

因业务调整，部分个人测试暂不接受委托，望见谅。

检测项目

荧光强度检测：测量样本在特定波长下的荧光发射量，参数包括动态范围100-100000 RFU和线性响应误差≤5%。

阈值周期(Ct值)测定：识别荧光信号超过设定阈值时的PCR循环数，参数精度±0.2循环，分辨率0.01循环。

扩增效率分析：评估PCR反应的动力学效率，参数理想范围90-110%，变异系数CV<5%。

熔解曲线分析：验证产物特异性通过熔解温度变化，参数温度范围65-95°C，峰值宽度≤1°C。

标准曲线斜率计算：用于定量校准目标浓度，参数要求相关系数R²>0.98，斜率-3.0至-3.6。

内参基因稳定性测试：校正样本间变异，参数稳定性指数M值<0.5，表达变异CV<10%。

背景噪音监测：量化非特异性荧光信号，参数基线噪音<100 RFU，信噪比≥10:1。

检测限(LOD)确定：最小可检测目标量，参数例如10 copies/μL，置信度95%。

定量限(LOQ)评估：可靠定量浓度范围，参数如100-1000000 copies/μL，线性偏差≤15%。

特异性验证：确认无非目标产物干扰，参数熔解曲线单峰性，多峰率<5%。

重复性测试：考察同一样本多次测量的变异，参数批内CV<5%，标准差≤0.3。

再现性分析：评估不同实验条件一致性，参数批间CV<10%，偏移量≤2%。

荧光淬灭效应检测：监测荧光染料稳定性，参数淬灭率<5%/循环，恢复时间≤2分钟。

动态范围验证：测试信号与浓度的线性关系，参数覆盖6个数量级，非线性偏差<10%。

检测范围

基因表达分析：应用于生物学研究，定量mRNA水平在细胞分化或疾病模型中的变化。

病原体核酸检测：用于临床诊断，定量病毒或细菌DNA/RNA在血液或组织样本中的载量。

转基因生物检测：鉴定食品或农业产品中转基因成分的存在和丰度。

癌症标志物监测：在肿瘤研究中定量癌基因或抑癌基因的表达水平。

环境微生物定量：监测水体、土壤或空气样本中特定微生物种群的浓度。

药物敏感性评估：测定耐药基因表达在药物治疗响应中的应用。

法医DNA定量：用于犯罪现场样本中人类或动物DNA的浓度分析。

植物病原诊断：检测农作物病害相关病原菌的核酸载量。

动物遗传筛选：在育种中定量性状相关基因的表达差异。

微生物组研究：分析肠道或口腔菌群中特定细菌的比例和丰度。

食品安全监控：定量食品中污染物如毒素基因或添加剂残留。

疫苗效力测试：测量免疫应答基因在疫苗开发中的表达水平。

药理毒理学研究：评估药物处理下基因表达变化在细胞毒性模型中的应用。

检测标准

依据ISO 20395:2019标准进行核酸目标序列定量性能评估，涵盖qPCR方法验证。

执行GB/T 39560.1-2020分子生物学检测方法第一部分：实时荧光定量PCR技术要求。

遵循ASTM E1873-17指南用于PCR技术中核酸序列检测的标准化流程。

采用GB/T 34796-2017核酸定量检测方法通则规范样品处理和数据分析。

参照ISO/IEC 17025通用实验室能力要求确保测试过程的质量控制。

应用ISO 17822-1:2020体外诊断检测系统性能评估标准用于临床样本。

依据GB/T 27404-2008实验室质量控制规范进行设备校准和结果验证。

遵守MIQE（Minimum Information for Publication of Quantitative Real-Time PCR Experiments）指南确保数据报告完整性。

检测仪器

实时荧光定量PCR仪：集成温度循环和荧光检测模块，功能为实时监测PCR过程中荧光信号变化，支持多通道染料检测。

荧光分光光度计：配备激发和发射单色器，功能为测量样本荧光光谱和强度，用于定量验证和背景校正。

微孔板阅读器：采用高通量荧光检测技术，功能为同时分析多样本靶标，适用于批量筛选和标准曲线生成。

毛细管电泳系统：结合激光诱导荧光检测，功能为分离并定量核酸片段，提供尺寸分辨和浓度计算。

数字PCR平台：基于微滴分区技术，功能为提供绝对定量参考，校准相对荧光数据并减少变异。

流式细胞仪：集成荧光探测单元，功能为高速定量细胞悬浮液中标记核酸，支持单细胞水平分析。

荧光显微镜：配备CCD相机和软件模块，功能为可视化细胞或组织内荧光信号，辅助原位定量验证。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件