荧光定量pcr测试检测

因业务调整，部分个人测试暂不接受委托，望见谅。

检测项目

灵敏度检测：评估检测下限参数，检测限范围1-100拷贝/μL，确保低丰度靶标可检出。

特异性检测：分析非特异性扩增风险，参数包括熔解曲线Tm值偏差±0.5°C，避免假阳性结果。

扩增效率评估：计算PCR反应效率百分比，目标值90%-110%，使用标准曲线斜率分析。

线性范围测试：测定动态范围参数，覆盖10^1-10^7拷贝数，线性相关系数R²>0.98。

Ct值精度验证：测量循环阈值变异系数，批内RSD<2%，确保定量重复性。

检测限确认：依据LoD参数，如95%检出概率对应的拷贝数阈值。

定量限分析：LoQ参数设定为RSD<25%的最低浓度点。

重现性测试：批间变异系数RSD<5%，基于多次独立实验数据。

准确性评估：与参考方法比较偏差，偏差范围±10%以内。

交叉污染控制：监测背景信号强度，荧光阈值ΔRn<0.1。

内参基因验证：检测内标Ct值稳定性，变异<1个循环。

熔解曲线分析：Tm值分辨率±0.2°C，用于产物特异性确认。

抑制剂效应测试：评估样本基质影响，回收率要求85%-115%。

引物二聚体检测：荧光信号监控，非特异性峰高度控制在基线5%以内。

标准曲线建立：斜率范围-3.1至-3.6，截距误差±0.5。

检测范围

病毒病原体检测：应用于呼吸道病毒如流感病毒筛查，实现早期诊断。

细菌感染诊断：针对食源性病原体如沙门氏菌，确保食品安全监控。

基因表达分析：量化mRNA转录水平，用于癌症标志物研究。

遗传病筛查：检测突变基因如囊性纤维化相关位点，辅助临床决策。

转基因生物检测：筛查农作物GMO成分，保障法规合规性。

法医DNA分型：个体识别分析，如STR位点定量。

环境微生物监测：评估水质或土壤中微生物污染水平。

肿瘤标志物定量：循环肿瘤DNA检测，支持癌症预后评估。

药物靶点验证：药物开发中基因靶标表达量测定。

细胞株鉴定：微生物污染或交叉污染快速排查。

疫苗效力测试：评估病毒载体拷贝数，确保批次一致性。

动物疫病防控：口蹄疫病毒等检测，助力畜牧业健康。

植物病原体诊断：作物病害如真菌感染早期发现。

食品安全控制：奶制品或肉类的微生物限量检测。

生物制品质控：基因治疗产品纯度验证。

检测标准

ISO 20395:2019：生物技术-核酸定量方法要求，涵盖灵敏度与特异性指标。

ISO 22174:2005：食品微生物学-PCR检测通则，规范食源性病原体测试。

GB/T 34796-2017：分子生物学检测通则，规定荧光定量PCR实验流程。

GB/T 27403-2008：实验室质量控制指南，适用于数据可靠性。

ASTM E2888-19：实时荧光PCR标准实践，包括扩增效率验证。

ISO/IEC 17025:2017：测试实验室通用要求，确保方法验证。

GB 4789.40-2016：食品安全国家标准-分子生物学方法。

ISO 15216-1:2017：病毒检测方法-食品样本部分。

GB/T 33526-2017：核酸检测试剂盒性能评价。

ASTM E1873-22：核酸序列检测标准指南。

检测仪器

荧光定量PCR检测系统：实时监测扩增过程，功能包括多通道荧光采集和温度控制。

热循环仪：执行PCR温度循环，功能确保精确升温降温至±0.1°C。

微孔板读取器：终点检测荧光信号，功能支持高通量样本分析。

核酸提取仪：自动化样本制备，功能实现DNA/RNA纯化回收率>90%。

离心机：样本预处理，功能用于细胞裂解和杂质去除。

分光光度计：定量核酸浓度，功能测量A260/A280比值以评估纯度。

凝胶电泳系统：验证扩增产物，功能通过条带大小确认特异性。

生物安全柜：样本处理防护，功能提供无菌环境防止污染。

恒温混匀仪：试剂混合，功能确保反应体系均一性。

数据采集软件：分析荧光曲线，功能计算Ct值和生成标准曲线。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件