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成分分析,配方还原,食品检测,药品检测,化妆品检测,环境检测,性能检测,耐热性检测,安全性能检测,水质检测,气体检测,工业问题诊断,未知成分分析,塑料检测,橡胶检测,金属元素检测,矿石检测,有毒有害检测,土壤检测,msds报告编写等。

核酸荧光定量检测

发布时间:2025-06-30

关键词:核酸荧光定量测试周期,核酸荧光定量测试标准,核酸荧光定量项目报价

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来源:北京中科光析科学技术研究所

文章简介:

核酸荧光定量检测是基于实时荧光信号监测的核酸扩增精确定量技术,核心在于荧光染料/探针与扩增产物的特异性结合及信号采集分析。检测要点涵盖标准曲线建立、扩增效率验证(90%-110%)、动态范围确认(≥6个数量级)及内参基因校准,要求仪器具备多通道荧光检测能力与温控精度±0.3℃。
点击咨询

因业务调整,部分个人测试暂不接受委托,望见谅。

检测项目

绝对定量分析:采用标准品梯度稀释建立回归曲线(R²≥0.99),检测限1.0×10¹ copies/mL,定量范围1.0×10¹~1.0×10⁹ copies/mL

相对基因表达量:基于ΔΔCt算法计算表达差异,要求内参基因Ct值变异系数≤5%

病原微生物载量检测:针对病毒/细菌特异性基因(如SARS-CoV-2 ORF1ab/N基因),检测灵敏度95%置信区间≥98%

转基因成分定量:筛查外源调控元件(CaMV 35S、NOS终止子),定量精度RSD≤3.5%

SNP分型检测:采用TaqMan探针法,分辨率≥99.7%,等位基因频率检出下限5%

miRNA表达谱:应用茎环引物技术,可检测22nt小RNA,动态范围跨越4个数量级

拷贝数变异(CNV):基于ΔCt值分析,可识别≥1.5倍拷贝数差异

融合基因检测:设计跨越断裂点引物,检出限达0.1%突变频率

甲基化水平分析:结合亚硫酸盐处理,可定量0.5%甲基化差异

多重病原体联检:六通道同步检测,交叉反应率≤0.01%

检测范围

临床诊断样本:血清/血浆/全血中HBV DNA、HCV RNA载量检测,样本体积需求≥200μL

病原微生物检测:呼吸道分泌物中甲型流感病毒分型,CT值≤38判定阳性

肿瘤基因筛查:FFPE组织样本EGFR/T790M突变检测,DNA提取量≥10ng/μL

转基因农作物:玉米基因组中CaMV 35S启动子定量,阈值设定0.9%

食品安全监测:肉类制品种源成分鉴定(牛/猪/鸡源性基因),检出限0.1%

法医DNA分析:体液斑痕人类特异性Alu序列检测,降解样本适用性≥80%

药物代谢基因:CYP2C19*2/*3等位基因分型,适用口腔拭子样本

环境微生物:水体中大肠杆菌uidA基因定量,符合EPA 1611标准

干细胞分化标记:OCT4/SOX2多能性基因表达监控,RNA完整性RIN≥7.0

畜疫防控:口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体检测,符合OIE标准

检测标准

ISO 20395:2018 生物技术-核酸定量方法性能要求

GB/T 37875-2019 核酸定量测定试剂盒质量评价技术规范

YY/T 1596-2017 甲型流感病毒核酸检测试剂盒

EP17-A2 临床实验室定量检测方法检出能力评价

GB/T 19495.5-2018 转基因产品检测 实时荧光PCR方法

ISO/IEC 17025:2017 检测和校准实验室能力通用要求

YY/T 1456-2016 乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸定量检测试剂盒

SN/T 5334.5-2020 口岸冠状病毒检测实时荧光RT-PCR法

GB 4789.42-2016 食品微生物学检验 诺如病毒实时荧光RT-PCR检测

WS/T 683-2020 新型冠状病毒临床实验室检测技术指南

检测仪器

荧光定量PCR仪:配置六通道光学系统(激发波长范围450-650nm),温控精度±0.1℃/秒,支持96孔板高速循环(2小时内完成40循环)

超微量分光光度计:核酸浓度检测范围0.2~15,000 ng/μL,A260/A280比值偏差≤0.03,最小检测体积0.3μL

自动化核酸提取仪:磁珠法纯化效率≥95%,单次处理96样本,交叉污染率<0.01%

梯度PCR仪:温度梯度范围30~100℃,孔间温差精度±0.3℃,支持0.1℃步进调节

生物安全柜:CLASS II A2型,下降风速0.35±0.025 m/s,HEPA过滤器效率99.99%

超低温离心机:最大RCF 30,000×g,温控范围-20℃至40℃,转子适配0.2mL PCR管

电泳成像系统:紫外透射波长302nm,可检测1ng DNA条带,像素分辨率4.2 MP

恒温金属浴:控温范围4~100℃,温度均匀性±0.5℃,适配0.2mL/0.5mL/1.5mL管

震荡混匀器:转速范围100~3000 rpm,支持微孔板三维混匀

超纯水系统:产水电阻率18.2 MΩ·cm,总有机碳≤3 ppb

检测流程

1、咨询:提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品,安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据,编写报告草件,确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件

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