重组胶原蛋白辅料质量检测

因业务调整，部分个人测试暂不接受委托，望见谅。

检测项目

重组胶原蛋白辅料的质量控制需执行多维度检测体系： 1. **纯度测定**：通过高效液相色谱（HPLC）与紫外分光光度法评估目标蛋白占总蛋白含量的百分比，要求非目标杂蛋白残留量低于1%。 2. **分子量分布**：采用SDS-PAGE电泳与质谱联用技术验证重组胶原蛋白的分子量一致性，确保其符合申报规格（如Ⅰ型胶原蛋白典型分子量为300 kDa）。 3. **氨基酸序列分析**：通过Edman降解法或串联质谱（MS/MS）确认氨基酸排列顺序的正确性及翻译后修饰（如羟脯氨酸含量）。 4. **微生物限度**：依据GB 15979标准进行需氧菌总数、霉菌酵母菌及特定致病菌（金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌）的定量检测。 5. **内毒素控制**：使用鲎试剂凝胶法测定细菌内毒素水平，注射级辅料需满足≤0.25 EU/mL的限值要求。

检测范围

本检测方案适用于以下三类样品： - **原料级样品**：包括发酵液粗提物、冻干粉体及溶液态重组胶原蛋白原料 - **中间品**：涵盖纯化过程中的离子交换层析洗脱液、超滤浓缩液等半成品 - **终产品**：包含医用敷料、注射填充剂及护肤品添加剂的成品制剂 特殊形态样品需执行附加测试：凝胶类产品需测定交联度与溶胀率；冻干粉体需检测复溶时间与水分残留；医疗器械涂层材料需增加体外降解速率测试。

检测方法

1. **理化特性分析** - 纯度测定：采用反相HPLC（C18色谱柱），流动相为0.1% TFA水溶液-乙腈梯度体系，检测波长220 nm - 分子量测定：执行还原型SDS-PAGE（4-20%梯度胶）结合Image Lab软件定量分析 - 热稳定性测试：通过差示扫描量热法（DSC）测定变性温度（Tm值） 2. **结构确证方法** - 圆二色光谱（CD）：在190-250 nm波长范围扫描测定α-螺旋结构特征峰 - 傅里叶变换红外光谱（FTIR）：分析酰胺I带（1600-1700 cm⁻¹）的二级结构组成 - X射线衍射（XRD）：验证三股螺旋结构的周期性重复单元 3. **生物学安全性评价** - 细胞毒性试验：依据ISO 10993-5标准，使用L929成纤维细胞进行MTT法测试 - 致敏性评估：通过LLNA局部淋巴结试验测定刺激指数（SI） - 溶血试验：采用兔红细胞悬液测定血红蛋白释放量

检测仪器

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件