凝胶过滤色谱测试

检测项目

分子量测定：通过标准曲线，精确测定目标蛋白质、多肽或核酸等生物大分子的表观分子量。

聚合体分析：检测样品中高分子量聚合体（如二聚体、多聚体）的含量与分布，是生物药关键质量属性。

片段分析：评估蛋白质或抗体药物中因降解产生的低分子量片段的比例。

样品纯度评估：根据色谱峰的单一性或复杂性，快速判断目标产物的纯度。

聚集状态研究：分析蛋白质在溶液中的天然寡聚状态（如单体、二聚体、四聚体）。

脱盐与缓冲液置换：将样品从高盐或非兼容缓冲液中转移到所需缓冲体系，是样品前处理常用步骤。

复合物形成验证：通过分子量变化，验证蛋白质-蛋白质或蛋白质-配体复合物是否成功形成。

工艺相关杂质监测：检测纯化工艺中可能残留的宿主细胞蛋白、核酸或层析介质脱落物。

稳定性指示分析：监测药物在储存或压力条件下分子大小分布的变化，评估其稳定性。

洗脱体积确定：精确测定目标分子的特征洗脱体积，用于方法建立和工艺放大。

检测范围

单克隆抗体与抗体偶联药物：分析其聚合体、片段及不同电荷变体（结合离子交换时）的分布。

重组治疗性蛋白：如胰岛素、生长激素、细胞因子等的纯度、聚合体和活性形式分析。

疫苗产品：包括多糖疫苗、病毒样颗粒疫苗的粒径分布和聚集状态评估。

血浆来源蛋白：如白蛋白、免疫球蛋白、凝血因子等制剂的聚合体含量控制。

酶与酶制剂：研究酶的天然寡聚状态及储存过程中的聚集或降解行为。

核酸与基因治疗产品：质粒DNA、mRNA、寡核苷酸的纯度分析及与载体复合物的表征。

多糖与聚合物：测定右旋糖酐、聚乙二醇等合成或天然聚合物的分子量分布。

病毒与病毒载体：用于腺相关病毒、慢病毒等基因治疗载体的空壳/完整壳粒比例分析。

纳米颗粒与脂质体：评估其粒径均一性、稳定性及载药后的尺寸变化。

食品与工业酶：在食品工业中用于分析酶制剂的组成，或监控发酵产物的分离纯化。

检测方法

标准曲线法：使用已知分子量的标准品绘制洗脱体积-分子量对数曲线，用于未知样品测定。

等度洗脱法：在恒定流速和缓冲液条件下进行洗脱，是最常用和标准的分析方法。

在线多检测器联用：串联紫外、示差折光、光散射和粘度检测器，获取更全面的分子信息。

制备型分离方法：放大色谱柱尺寸和流速，用于从复杂混合物中制备性收集高纯度组分。

脱盐与缓冲液交换方法：使用具有特定排阻极限的介质，快速分离大分子与小分子溶质。

稳定性应力测试方法：对样品进行热、光、机械等应力处理后再行分析，评估其降解途径。

方法学验证：对方法的专属性、线性、精密度、准确度及定量限等进行系统验证。

高通量筛选方法：使用96孔板形式的过滤板或微型色谱柱，快速平行处理多个样品。

二维色谱联用技术：将凝胶过滤色谱与反相色谱、离子交换色谱等联用，实现复杂样品深度解析。

过程分析技术应用：将GFC集成到生物反应或纯化工艺流程中，实现实时监测与控制。

检测仪器设备

高效液相色谱系统：提供稳定高压输液、精确进样和梯度控制的现代GFC核心平台。

凝胶过滤色谱柱：填充有不同分离范围葡聚糖、琼脂糖或硅胶基质的惰性多孔微球。

紫外-可见光检测器：最常用的检测器，用于在特定波长（如280nm, 260nm）检测蛋白质或核酸。

多角度激光光散射检测器：直接测定绝对分子量和均方根半径，无需标准曲线。

示差折光检测器：通用型浓度检测器，适用于无特征紫外吸收的样品（如多糖）。

动态光散射检测器（在线）：提供流体动力学半径信息，辅助峰鉴定和聚集状态分析。

自动进样器：实现样品盘的高精度、高重复性和无人值守的自动连续进样。

柱温箱：精确控制色谱柱温度，确保分离过程的重现性和稳定性，尤其对温度敏感样品。

馏分收集器：根据时间或信号触发，自动收集从色谱柱洗脱出的目标组分。

色谱数据工作站：用于仪器控制、数据采集、处理、分析和报告生成的专用软件系统。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件