免疫组化标记检测

检测项目

细胞角蛋白（CK）：用于标记上皮来源的细胞，是鉴别癌与肉瘤、判断肿瘤上皮来源的关键标志物。

白细胞共同抗原（CD45）：淋巴造血细胞的特异性标记，主要用于淋巴瘤、白血病等造血系统肿瘤的诊断与鉴别。

波形蛋白（Vimentin）：间叶组织来源细胞的标志物，常用于肉瘤的诊断，以及与上皮源性肿瘤的鉴别。

S-100蛋白：广泛分布于神经外胚层来源的细胞，用于标记黑色素瘤、神经鞘瘤、胶质瘤等肿瘤。

雌激素受体（ER）与孕激素受体（PR）：乳腺癌等激素依赖性肿瘤的重要预后和预测指标，指导内分泌治疗。

人表皮生长因子受体2（HER2）：乳腺癌、胃癌等肿瘤的预后指标及靶向治疗（如曲妥珠单抗）的用药依据。

Ki-67增殖指数：反映肿瘤细胞增殖活性的核抗原，是评估肿瘤生长速度和预后的重要指标。

前列腺特异性抗原（PSA）：前列腺上皮细胞的特异性标记，用于前列腺癌的诊断和转移癌的溯源。

甲状腺转录因子-1（TTF-1）：甲状腺和肺腺上皮的特异性核转录因子，主要用于肺腺癌与鳞癌的鉴别及甲状腺癌的诊断。

CD20与CD3：分别标记B淋巴细胞和T淋巴细胞，用于淋巴瘤的分型及淋巴细胞亚群的分析。

检测范围

肿瘤病理诊断与分型：确定肿瘤的组织学来源、分类（如癌、肉瘤、淋巴瘤）及具体亚型，是核心应用领域。

预后评估指标检测：通过检测ER、PR、HER2、Ki-67等指标，评估肿瘤的生物学行为和患者预后。

治疗靶点预测：检测特定的药物作用靶点（如HER2、PD-L1、ALK），为靶向治疗和免疫治疗提供依据。

感染性疾病病原体鉴定：利用特异性抗体在组织中定位病毒（如HPV、EJianCe）、细菌等病原体抗原。

自身免疫性疾病研究：检测病变组织中免疫球蛋白、补体等免疫复合物的沉积，辅助诊断如狼疮性肾炎等疾病。

神经病理学诊断：用于脑肿瘤的分类（如胶质瘤分级）、神经变性性疾病中异常蛋白（如β-淀粉样蛋白）的检测。

微小转移灶识别：在淋巴结或骨髓中通过特异性标记物（如CK）发现常规染色难以识别的微小肿瘤转移灶。

细胞增殖与凋亡研究：通过Ki-67、PCNA标记增殖细胞，TUNEL法等标记凋亡细胞，研究肿瘤生长动力学。

胚胎发育与分化研究：通过特定蛋白的时空表达模式，研究组织胚胎发育、细胞分化及谱系追踪。

法医病理学鉴定：用于损伤时间推断、组织种属鉴定以及某些特定原因（如过敏、窒息）的死亡诊断。

检测方法

石蜡切片制备：将组织经甲醛固定、脱水透明后浸蜡包埋，切成薄片，是免疫组化的标准样本来源。

抗原修复：采用热诱导表位修复法或酶消化法，以暴露因固定而被遮蔽的抗原表位，是染色成功的关键步骤。

内源性过氧化物酶阻断：使用过氧化氢溶液阻断组织内源性的过氧化物酶活性，防止非特异性显色造成的背景干扰。

非特异性结合位点封闭：使用正常非免疫动物血清或蛋白溶液封闭，减少抗体与组织的非特异性结合。

一抗孵育：将针对目标抗原的特异性一抗滴加至组织切片上，在适宜温度下孵育使其与抗原充分结合。

二抗孵育：滴加与一抗种属匹配且偶联了酶或荧光素的二抗，与一抗的Fc段结合，起放大信号的作用。

辣根过氧化物酶（HRP）显色系统：常用DAB作为底物，在HRP催化下产生不溶性的棕色沉淀，于普通光学显微镜下观察。

碱性磷酸酶（AP）显色系统：常用BCIP/NBT作为底物，产生蓝紫色沉淀，适用于双染或内源性过氧化物酶丰富的组织。

苏木素复染：显色后用苏木素染料对细胞核进行复染，提供组织形态学背景，便于定位阳性信号。

结果判读与评分：由病理医师在显微镜下根据阳性信号的染色强度、阳性细胞百分比及定位进行半定量分析和诊断报告。

检测仪器设备

石蜡切片机：用于将蜡块切割成厚度为3-5微米的连续薄片，是制备高质量组织切片的核心设备。

摊片机与烤片机：摊片机将切片展开于载玻片上，烤片机则通过加热使切片牢固附着，防止后续操作中脱落。

全自动免疫组化染色仪：集成脱蜡、抗原修复、抗体孵育、洗涤、显色等步骤的全自动化设备，保证染色的一致性和高通量。

生物显微镜：用于观察组织形态和免疫组化染色结果的基本光学仪器，配备不同倍数的物镜和目镜。

高压锅或微波炉/电磁炉：用于热诱导抗原修复过程，提供高温高压或恒温加热环境以充分暴露抗原表位。

湿盒：在抗体孵育过程中使用，为切片提供湿润环境，防止抗体溶液蒸发干燥导致非特异性结合或染色失败。

移液器与滴瓶：精确移取和滴加各种试剂、抗体及缓冲液，确保反应体系准确和试剂用量一致。

冰箱与冷冻柜：用于储存对温度敏感的一抗、二抗、显色试剂盒及其他生物试剂，通常需要-20℃或4℃保存。

纯水系统：制备高纯度的去离子水或蒸馏水，用于配制缓冲液、洗涤液等，避免水中离子干扰实验结果。

数字病理扫描系统：将整张免疫组化切片高速扫描成高分辨率数字图像，便于远程会诊、定量分析和数据存档。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件