tunel法测定细胞凋亡检测

因业务调整，部分个人测试暂不接受委托，望见谅。

检测项目

DNA断裂位点标记效率：末端转移酶催化荧光dUTP掺入效率≥95%，阳性信号定位精度0.2μm

凋亡细胞定量分析：每视野计数≥500个细胞，阳性率检测限0.5%

核形态学共定位验证：DAPI复染定位偏差≤3μm，核碎裂特征符合率98%

组织穿透深度控制：冷冻切片厚度8-10μm，石蜡切片厚度4-6μm

内源性酶抑制：DNase I处理浓度1-3U/mL，作用时间15±2min

背景信号控制：封闭血清浓度5-10%，非特异性吸附＜5%

荧光强度定量：激发波长488nm，发射波长515-565nm，光子计数CV值≤8%

双染法协同检测：Caspase-3/TUNEL共定位相关系数r≥0.85

阴性对照设置：省略末端转移酶组荧光强度≤100AU

阳性对照设置：DNase I处理组阳性率≥95%

检测范围

肿瘤药理研究：化疗药物诱导的肿瘤细胞凋亡率检测

神经退行性疾病：脑组织切片神经元程序性死亡定量

心血管药理评价：心肌缺血再灌注损伤凋亡细胞图谱

毒理学安全性评估：肝/肾组织中毒性损伤凋亡检测

发育生物学研究：胚胎组织程序性细胞死亡定位

免疫学基础研究：淋巴细胞亚群凋亡动力学分析

器官移植排斥反应：移植物浸润细胞凋亡监测

放射医学研究：电离辐射诱导肠隐窝细胞凋亡定量

中药活性成分筛选：天然产物促凋亡效应验证

生殖医学研究：卵巢颗粒细胞闭锁凋亡率测定

检测标准

ISO 10993-5:2009医疗器械生物学评价第5部分

GB/T 16886.5-2017医疗器械致敏性原位检测法

ASTM F2312-11组织工程产品细胞活性标准指南

ISO 10993-18:2020化学表征框架下的生物学评价

GB/T 39769-2021细胞凋亡检测通用要求

ICH S6(R1)生物技术药物临床前安全性评价

OECD 489体内彗星试验指南

USP 1046细胞培养技术通则

ISO 20391-2:2019细胞计数方法学验证

CLSI MM17-A免疫组化染色质量控制指南

检测仪器

激光扫描共聚焦显微镜：配备405/488/561nm三激光器，Z轴分辨率0.35μm，实现三维凋亡定位

全自动玻片扫描系统：20倍物镜下扫描速度30mm²/s，单次载入48张切片

高通量荧光显微成像仪：配置LED光源的5通道滤光片，通量≥96孔板/小时

微量酶标分析系统：整合540nm吸收光与520nm荧光双检测，酶标板震荡频率0-1500rpm

冷冻切片成像工作站：-25℃环境控温，低温切片厚度精度±1μm

数字病理定量分析平台：AI辅助细胞核分割算法，阳性识别准确率＞93%

多光谱成像系统：10nm带宽可调光谱拆分，消除组织自发荧光干扰

原位PCR扩增仪：热盖控温精度±0.2℃，支持玻片原位扩增

激光显微切割系统：紫外激光切割精度5μm，实现特定凋亡细胞分离

流式细胞分选仪：488nm激光检测FITC通道，分选纯度≥99%

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件