蛋白酶测定检测

因业务调整，部分个人测试暂不接受委托，望见谅。

检测项目

总蛋白酶活性：采用酪蛋白底物水解法定量，检测范围5-2000 U/mg，灵敏度±0.5 U。

胰蛋白酶特异性：基于BApNA显色反应，测量波长410nm，线性范围0.1-50 μg/mL。

最适pH值测定：缓冲体系pH 3.0-10.0，梯度间隔0.5，活性偏差≤2%。

温度稳定性：20-80℃温控测试，记录半衰期及失活温度点。

金属离子影响度：检测Ca²⁺/Zn²⁺等8种离子在0.1-10mM浓度下的激活/抑制率。

米氏常数(Km)：通过Lineweaver-Burk双倒数法计算，精度达10⁻⁶M。

最适反应温度：恒温控制±0.1℃偏差，范围覆盖4-95℃。

抑制剂耐受性：检测EDTA/PMSF等抑制剂在0.01-5mM的IC₅₀值。

储存稳定性：加速实验（40℃/RH75%），定期取样测定活性衰减曲线。

分子量分布：SDS-PAGE电泳分析，分辨率±1kDa，纯度要求≥95%。

等电点测定：等电聚焦电泳法，pH梯度3-10，精度±0.05pH。

动力学参数Vmax：紫外分光光度法连续监测，时间分辨率0.1s。

底物亲和力：荧光标记底物Kd值测定，检测限0.01nM。

检测范围

食品工业酶制剂：烘焙用蛋白酶、肉品嫩化酶活性验证。

洗涤剂添加剂：去污蛋白酶的热稳定性及去渍效能评估。

药用胰蛋白酶：医药级原料的比活性及内毒素控制检测。

诊断试剂原料：凝血酶原激活剂的效价标定。

皮革处理酶：脱毛蛋白酶的专一性及胶原水解率测试。

饲料添加剂：胃蛋白酶在模拟消化环境的活性保留率。

研究用工具酶：限制性蛋白酶的切割位点特异性分析。

化妆品用酶：抗氧化蛋白酶的透皮吸收性验证。

废水处理生物酶：有机质降解酶的耐毒性检测。

生物合成中间体：肽键合成酶的转肽效率测定。

纺织工业酶：丝光处理蛋白酶的纤维损伤度评估。

细胞消化试剂：组织分离酶的残留活性检测。

检测标准

ISO 14902:2001 动物饲料蛋白酶活性测定方法

AOAC Official Method 982.30 乳制品蛋白酶检测

GB/T 23527-2009 蛋白酶制剂活性测定通用方法

ASTM E2694-11 工业蛋白酶热稳定性测试标准

JP XVII 胰蛋白酶效价生物测定法

GB 1886.174-2016 食品安全国家标准 食品工业用酶制剂

EP 10.0 2.5.37 药用胰蛋白酶纯度检测

ISO 20776-1:2019 抗菌肽的蛋白酶敏感性测试

DIN 10470:1999 乳酪制造用凝乳酶活性标准

USP <1058> 分析仪器确认指南（酶标仪校准）

检测仪器

紫外可见分光光度计：连续监测405nm处硝基苯胺显色，波长精度±0.5nm。

荧光微孔板检测系统：高通量测定荧光底物水解速率，灵敏度0.01 RFU。

全自动酶标分析仪：96孔板并行检测，温控精度±0.2℃，支持动力学分析。

毛细管电泳仪：酶解产物分子量分布测定，分离效率>10⁵理论塔板数。

等温滴定量热仪：直接测量酶促反应热力学参数，检测限0.1μcal/s。

HPLC-质谱联用仪：肽段指纹图谱分析，质量精度±0.01Da。

圆二色光谱仪：蛋白质二级结构变化监测，波长范围190-260nm。

微量热泳动仪：实时监测酶-底物结合常数，样品量需求<5μL。

快速停流装置：毫秒级反应动力学捕捉，死时间≤1.5ms。

表面等离子共振仪：无标记检测酶抑制剂亲和力，分辨率0.1RU。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件