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发布时间:2025-07-01
关键词:ad小鼠模型构建测试方法,ad小鼠模型构建测试范围,ad小鼠模型构建测试标准
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来源:北京中科光析科学技术研究所
因业务调整,部分个人测试暂不接受委托,望见谅。
基因型鉴定:通过PCR或测序技术确认转基因插入及表达。检测参数包括引物特异性验证、扩增产物大小(如APP基因片段约500bp)、纯合/杂合子比例分析。
脑组织Aβ斑块定量:采用硫磺素S或6E10免疫组化染色。参数包括斑块数量(个/mm²)、斑块面积占比(%)、皮层/海马区域分布密度。
Tau蛋白过度磷酸化检测:使用AT8/AT100抗体进行Western Blot。检测磷酸化位点ser202/thr205表达量,灰度值定量分析磷酸化tau与非磷酸化tau比值。
神经元丢失评估:尼氏染色或NeuN免疫组化计数。参数包括海马CA1区神经元密度(cells/mm²)、皮层IV-V层神经元数量变化率(%)。
胶质细胞活化分析:GFAP(星形胶质细胞)和Iba1(小胶质细胞)染色。检测胶质细胞覆盖率(%)、细胞体增大指数、活化形态学分级(0-3级)。
突触可塑性检测:电生理LTP记录。参数包括基础fEPSP斜率(mV/ms)、高频刺激后增幅(%)、维持时间(min)。
脑脊液Aβ42/Aβ40比值:ELISA法定量。检测灵敏度0.1pg/mL,动态范围3.9-250pg/mL,临界比值≤0.05。
行为学水迷宫测试:空间记忆评估。参数包括逃避潜伏期(s)、平台穿越次数、目标象限停留时间占比(%)。
新物体识别实验:识别记忆指数计算。参数包括探索总时长(s)、新物体探索时间比例(DI≥0.7为正常)。
炎症因子检测:Luminex多因子检测。定量TNF-α、IL-1β、IL-6浓度(pg/mg蛋白),检测下限0.5pg/mL。
转基因小鼠品系:APP/PS1双转基因模型、5XFAD模型、TauP301L模型等。适用于特定病理表型研究。
基因编辑模型:CRISPR-Cas9技术构建的APOEε4敲入模型。用于遗传风险因素研究。
药物干预材料:Aβ寡聚体抑制剂(如小分子化合物MW150)、BACE1抑制剂、tau蛋白聚集阻断剂。
干细胞治疗制剂:神经前体细胞悬液、间充质干细胞外泌体。评估细胞存活率与分化状态。
生物材料支架:功能性水凝胶载药系统。检测缓释效率与生物相容性。
中药复方提取物:石杉碱甲提取物、人参皂苷Rg1组合物。分析血脑屏障透过率。
医疗器械植入物:深部脑刺激电极、颅内给药导管。评估组织反应与器械安全性。
营养干预制剂:磷脂酰丝氨酸复合物、姜黄素纳米乳剂。检测生物利用度与代谢产物。
环境诱导模型:臭氧暴露诱导模型。适用于环境因素致病机制研究。
手术构建模型:侧脑室Aβ42注射模型。用于急性病理进程研究。
转基因动物鉴定:ISO 10957-2018实验动物遗传质量控制规范
病理切片制备:GB/T 34700-2017实验动物病理学诊断规范
免疫组化定量:ISO 19085-6:2021组织化学分析技术指南
ELISA检测:GB/T 38100-2019蛋白质定量测定方法通则
行为学测试:ISO 24442:2022实验动物认知功能评估指南
电生理记录:IEC 60601-2-40医用电气设备安全标准
细胞治疗产品:GB/T 3976-2021干细胞制剂质量要求
脑脊液采集:ASTM F3208-20脑脊液取样操作规范
纳米材料表征:ISO/TS 21357:2021纳米药物表征技术规范
数据统计分析:GB/T 3358.3-2009统计学词汇第3部分:实验设计
激光共聚焦显微镜:配备405/488/561nm激光器,实现多通道荧光同步采集,Z轴分辨率0.5μm,用于三维重建淀粉样斑块。
全自动行为分析系统:内置红外追踪矩阵(分辨率0.5cm),采样频率30Hz,精确量化动物运动轨迹与探索行为。
高通量电泳系统:微流控芯片支持96样本并行检测,电压范围50-500V,分离分辨率3bp,用于转基因片段分离。
超灵敏化学发光仪:检测灵敏度达fg级,动态范围6个数量级,配备自动进样器,完成Aβ42/Aβ40比值精确测定。
在体多通道记录系统:32通道微电极阵列,阻抗≤0.5MΩ,采样率40kHz,同步记录海马theta节律(4-12Hz)与gamma振荡(30-80Hz)。
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