因业务调整，部分个人测试暂不接受委托，望见谅。
检测项目
牛源性成分定性检测、羊源性成分定性检测、水牛源性成分定性检测、牦牛源性成分定性检测、山羊源性成分定性检测、绵羊源性成分定性检测、鹿源性成分定性检测（梅花鹿）、鹿源性成分定性检测（马鹿）、鹿源性成分定性检测（驯鹿）、羚羊源性成分定性检测（特定种）、骆驼源性成分定性检测（单峰驼）、骆驼源性成分定性检测（双峰驼）、反刍动物通用成分筛查、牛与羊种间鉴别、牛属内种间鉴别（黄牛/水牛/牦牛）、羊属内种间鉴别（山羊/绵羊）、鹿科内种间鉴别（梅花鹿/马鹿/驯鹿）、反刍动物组织源特异性鉴定（肌肉/肝脏/血液/骨粉/皮张/毛发/角）、反刍动物加工状态鉴别（生鲜/热处理/深度水解）、反刍动物DNA提取效率评估、饲料中反刍动物源性污染物筛查、肉制品中反刍动物成分定量分析（牛含量）、肉制品中反刍动物成分定量分析（羊含量）、乳制品中反刍动物源乳成分鉴定（牛奶/羊奶/水牛奶）、乳制品中反刍动物源乳定量分析（牛奶含量）、明胶及胶原蛋白制品中反刍动物源成分鉴定、油脂制品中反刍动物源脂肪成分筛查、宠物食品中禁用反刍动物成分筛查（如疯牛病疫区来源）、化妆品中反刍动物源组分鉴定（如胎盘素/胶原蛋白）、中药材及保健品中反刍动物源材料真伪鉴别（如羚羊角粉/鹿茸）
检测范围
生鲜牛肉及制品（牛排/肉馅/肉丸）、生鲜羊肉及制品（羊排/羊肉卷/肉串）、生鲜鹿肉及制品、混合肉糜制品（牛肉+猪肉/羊肉+鸡肉）、肉骨粉及动物饲料原料（鱼粉替代物筛查）、宠物干粮及湿粮配方原料、工业明胶及食用明胶原料胶囊壳果冻布丁酸奶稳定剂果酱增稠剂糖果涂层药用辅料照相材料粘合剂皮革鞣制剂化妆品增稠剂纺织浆料造纸施胶剂食品包装膜肠衣火腿肠衣香肠衣胶原蛋白肽粉保健品胶囊片剂冲剂口服液医用敷料止血材料组织工程支架骨修复材料生物墨水乳清蛋白粉酪蛋白酸钠婴儿配方奶粉成人奶粉奶酪黄油奶油冰淇淋炼乳酸奶发酵乳乳饮料含乳饮料植物奶混合奶制品牛羊油脂工业油脂生物柴油原料肥皂饲料添加剂肥料有机肥土壤改良剂皮革制品皮鞋皮包皮带皮衣裘皮大衣毛毯羊毛衫羊绒衫羽绒服填充物疑似物中药材饮片粉末羚羊角鹿茸鹿角霜阿胶龟甲胶杂皮胶血余炭角类工艺品骨雕角雕标本生物标本考古遗骸法医物证环境样本土壤沉积物水体滤膜饲料厂生产线残留物食品加工设备拭子运输工具残留物餐饮厨余垃圾
检测方法
本领域主要采用基于DNA分子生物学技术的聚合酶链式反应(PCR)及其衍生方法进行特异性检测。***DNA提取与纯化：**依据样品基质特性选择相应方法。固体样品(肌肉/组织/饲料)采用蛋白酶K消化结合酚-氯仿抽提或商用硅胶膜柱纯化试剂盒；液体样品(奶/油)需离心富集或特殊裂解缓冲液处理；深加工样品(明胶/水解蛋白)需优化裂解条件提高碎片DNA回收率；含抑制物样品(皮革/土壤)需加强纯化步骤或稀释处理。提取的DNA需通过紫外分光光度计或荧光染料法测定浓度与纯度(A260/A280比值)，必要时进行琼脂糖凝胶电泳评估完整性。***常规PCR：**针对特定反刍动物物种(如牛Bostaurus,绵羊Ovisaries)或类群(反刍亚目Ruminantia)的高度保守且特异的基因序列设计引物。常用靶基因包括线粒体细胞色素b基因(Cytb)、线粒体12SrRNA基因(12SrRNA)、线粒体16SrRNA基因(16SrRNA)、核基因组生长激素基因(GH)、核基因组肌间线蛋白基因(Desmin)等。反应体系包含TaqDNA聚合酶、dNTPs、引物对、模板DNA及缓冲液。经变性(94-95C)、退火(引物特异性结合温度,通常50-65C)、延伸(72C)的循环扩增后，产物通过琼脂糖凝胶电泳分离，溴化乙锭(EB)或更安全的荧光染料染色，紫外凝胶成像系统观察特定大小条带判断结果。***实时荧光定量PCR(qPCR)：**在PCR反应体系中加入荧光报告基团(SYBRGreenI染料法或TaqMan探针法)，实时监测扩增过程中荧光信号累积。SYBRGreenI法成本较低，需熔解曲线分析确认产物特异性；TaqMan探针法特异性更高，利用探针水解释放荧光。qPCR可进行绝对定量(通过标准曲线计算目标DNA拷贝数)或相对定量(比较Ct值)，用于测定样品中特定反刍动物成分的含量比例(如牛肉掺假比例)。***多重PCR(MultiplexPCR)：**在同一反应体系中加入多对针对不同目标物种或内参基因的特异性引物，通过优化引物浓度和退火温度实现单次扩增同时检测多个目标。常用于物种鉴别(如同时区分牛、羊、猪)或掺假筛查。***数字PCR(dPCR)：**将反应体系分割成大量微反应单元进行独立扩增，终点通过统计阳性微滴数进行绝对定量。对复杂基质抑制物耐受性强，定量精度高，尤其适用于痕量目标DNA或高度降解样品的精确定量。***物种特异性引物设计验证：**所有引物均需通过生物信息学比对确保特异性(BLAST搜索)，并使用包含目标物种及近缘非目标物种的参考样本进行严格的实验室验证(特异性测试)，以及灵敏度测试确定最低检出限(LOD)。
检测标准
GB/T20190-2006饲料中牛羊源性成分的定性检测聚合酶链式反应(PCR)法
GB/T21101-2007动物源性饲料中哺乳动物源性成分定性检测方法实时荧光PCR方法
GB/T21102-2007动物源性饲料中骆驼源性成分定性检测方法PCR方法
GB/T21103-2007动物源性饲料中鹿源性成分定性检测方法PCR方法
GB/T21104-2007动物源性饲料中哺乳动物源性成分定量测定实时荧光PCR方法
GB/T38164-2019常见畜禽动物品种及其制品掺假的快速鉴定PCR法
SN/T1119-2002进口饲料添加剂牛羊源性成份的检测方法PCR方法
SN/T2051-2008食品、化妆品和饲料中牛羊猪源性成分检测方法实时PCR法
SN/T3731.4-2013食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法第4部分：鹿成分检测PCR法
ISO20836:2021Microbiologyofthefoodchain—Polymerasechainreaction(PCR)forthedetectionofmicroorganisms—Thermalperformancetestingofthermalcyclers
ISO20837:2006Microbiologyoffoodandanimalfeedingstuffs—Polymerasechainreaction(PCR)forthedetectionoffood-bornepathogens—Requirementsforsamplepreparationforqualitativedetection
ISO22118:2011Microbiologyoffoodandanimalfeedingstuffs—Polymerasechainreaction(PCR)forthedetectionandquantificationoffood-bornepathogens—Performancecharacteristics
AOACOfficialMethod
SM2013.05DNA-BasedIdentificationofBovine,Ovine,Caprine,andPorcineMaterialsinMeatandFeedProductsUsingReal-TimePCR
检测仪器
***样品前处理设备：*****冷冻研磨仪/均质器：**用于高效粉碎冷冻或坚韧样品(肌肉组织、骨骼、皮革)，确保样本均一性利于后续DNA释放。***高速冷冻离心机：**用于样品裂解后的固液分离，沉淀杂质或富集细胞碎片/DNA复合物。***恒温水浴锅/金属浴：**提供精确恒温环境用于蛋白酶K消化等温育步骤。***漩涡混合器：**快速混匀液体样品与裂解液/试剂。***微量移液器(单道/多道)：**精确移取微量液体试剂和样本的核心工具。***核酸提取纯化设备：*****核酸自动提取仪：**基于磁珠法或硅胶膜柱法原理自动化完成裂解液转移、结合、洗涤和洗脱步骤，提高通量并减少人为误差。***台式离心机(微量)：**用于硅胶膜柱法核酸提取过程中的离心步骤。***真空抽滤装置(可选)：**配合某些柱式提取试剂盒使用。***核酸浓度与纯度分析设备：*****紫外可见分光光度计(微量比色皿)：**测量DNA溶液在260nm和280nm处的吸光度(A260/A280)，评估浓度和纯度(蛋白质污染)。***荧光分光光度计/Qubit
TM系统：**使用高灵敏度荧光染料(如PicoGreen,QubitdsDNAHSAssay)专一性结合双链DNA进行精确定量，尤其适用于低浓度或含杂质样本。***琼脂糖凝胶电泳系统(电源+电泳槽)：**DNA质量初步评估工具，通过电泳分离观察条带大小和完整性判断降解程度。***聚合酶链式反应(PCR)核心设备：*****普通PCR仪(梯度功能)：**提供精确的温度循环控制(变性-退火-延伸)，用于常规终点法PCR扩增。梯度功能便于优化不同引物的退火温度。***实时荧光定量PCR仪(qPCR仪)：**PCR扩增与荧光信号实时监测一体化设备。配备多个光学通道可同时监测多种荧光染料(SYBRGreenI,FAM,HEX,VIC,ROX等)。用于定量分析(qPCR)和高特异性探针法(TaqMan)实验。***数字PCR仪(dPCR仪)：**将反应体系分割成数万至数百万个微滴或微孔进行独立扩增的设备。通过终点荧光信号计数实现绝对定量，无需标准曲线。***扩增产物分析设备：*****琼脂糖凝胶电泳系统+UV凝胶成像系统/蓝光透射仪：**PCR产物最常用的分析方法。电泳分离后，通过EB或其他安全染料染色，在紫外光或蓝光激发下成像观察特定大小条带判断结果。***毛细管电泳仪(CE)：**用于高分辨率分离和精确大小测定多重PCR产物或微卫星标记片段，自动化程度高，数据数字化记录。***辅助设备与环境控制：*****超净工作台/PCR工作站：**提供洁净操作空间并进行紫外线消毒，最大限度降低气溶胶污染风险。***超纯水系统：**制备无核酸酶(DNase-free)、无RNA酶(RNase-free)的超纯水用于配制试剂和溶液。***冰箱(-20C/-80C)：**-20C储存常用试剂(DNA模板短期保存)；-80C长期保存珍贵样本和标准品。***制冰机：**提供实验所需的碎冰。***数据分析计算机与软件：**qPCR/dPCR仪器配套软件用于实验设置、数据采集与分析(Ct值计算,标准曲线拟合,拷贝数计算,熔解曲线分析)；凝胶成像系统软件用于条带分析；通用软件进行数据管理和报告生成。
检测流程
1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)
2、确认检测用途及项目要求
3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)
4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)
5、收到样品，安排费用后进行样品检测
6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误
7、确认完毕后出具报告正式件
8、寄送报告原件
