条纹花叶病毒快速检测

因业务调整，部分个人测试暂不接受委托，望见谅。

检测项目

病毒粒子形态学观察、外壳蛋白分子量测定、核酸提取纯度分析、dsRNA特征片段鉴定、衣壳蛋白抗原表位定位、侵染性克隆构建验证、系统侵染动态监测、交叉保护效果评估、寄主范围测定、症状学分级标准、传播介体特异性检测、温度钝化点测试、稀释限点测定、体外存活期试验、血清学反应效价测定、核酸杂交特异性验证、RT-PCR引物特异性评价、实时荧光定量Ct值分析、全基因组测序拼接、进化树构建分析、重组事件筛查、沉默抑制因子功能验证、病毒载量定量模型建立、抗血清制备效价测试、免疫胶体金试纸条灵敏度验证、超薄切片制备技术规范、负染电镜制样标准化流程、纳米孔测序快速鉴定技术验证

检测范围

玉米叶片样本、小麦穗部组织、水稻茎秆汁液、高粱根系分泌物、甘蔗韧皮部切片、大麦籽粒胚乳、燕麦叶鞘表皮细胞悬浮液、黑麦草气孔保卫细胞刮取物、狗尾草维管束显微样本、稗草花叶病斑研磨液、黍子叶脉浸出液样本、薏苡种子表面冲洗液样本组培苗离体培养物筛选样本人工接种阳性对照样本田间自然发病典型病株系统侵染植株整株取样无症状带毒植株潜伏期样本昆虫介体唾液腺提取物机械接种摩擦接种液种子带毒率测定样本土壤残留病毒活性测试样本灌溉水样过滤浓缩物农具表面擦拭取样样本

检测方法

1.双抗体夹心ELISA法：采用单克隆抗体包被微孔板捕获病毒颗粒，酶标二抗显色定量分析抗原浓度。

2.实时荧光定量RT-PCR：设计特异性TaqMan探针靶向CP基因保守区段，通过Ct值计算病毒核酸拷贝数。

3.免疫胶体金层析技术：利用纳米金标记抗体与病毒颗粒结合显色带实现现场快速诊断。

4.超薄切片电镜观察：经戊二醛-锇酸双重固定后制备70nm切片观察病毒粒子晶体排列特征。

5.小RNA深度测序法：提取18-24nt病毒来源siRNA进行高通量测序及生物信息学组装。

6.核酸斑点杂交技术：将待测RNA转印至尼龙膜后与地高辛标记cDNA探针进行特异性杂交。

7.生物测定法：采用昆诺藜作为指示植物进行汁液摩擦接种观察典型枯斑反应。

8.等温扩增技术：使用逆转录重组酶聚合酶扩增（RT-RPA）在恒温条件下快速扩增靶序列。

检测标准

GB/T36851-2018植物病毒ELISA检测技术规范

NY/T2287-2019禾本科作物病毒病田间调查与分级标准

SN/T2127-2019进出境植物检疫玉米条纹花叶病毒检疫鉴定方法

ISO16140-3:2021分子生物学方法验证通用技术要求

EPPOPM7/98(2)植物病毒诊断规程

GB/T3543.5-2020农作物种子检验规程真实性和品种纯度鉴定

ISO21571:2020食品中病毒核酸检测前处理通用指南

NY/T401-2021脱毒种薯（苗）病毒检测技术规程

GB/T19495.5-2018转基因产品检测核酸定量PCR方法

ASTME3022-18分子生物学检测方法验证标准指南

检测仪器

1.全自动酶标分析仪：配备450nm/630nm双波长滤光片系统完成96孔板吸光度精确测量。

2.实时荧光定量PCR仪：配置FAM/HEX双通道光学模块实现多重靶标同步扩增监测。

3.超速离心机：配备SW32Ti转子完成病毒颗粒蔗糖密度梯度纯化（100,000g离心）。

4.冷冻透射电镜：采用场发射电子枪在200kV加速电压下获得0.2nm分辨率病毒粒子图像。

5.核酸蛋白分析仪：通过紫外吸收法测定A260/A280比值评估核酸提取质量。

6.全自动电泳系统：配置预染蛋白Marker完成外壳蛋白SDS-PAGE分子量精确测定。

7.生物分子相互作用分析仪：基于表面等离子共振技术测定抗体-抗原结合动力学参数。

8.超低温样品粉碎仪：采用液氮预冷研磨罐实现植物组织细胞壁低温破碎。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件