检测项目
母体药物浓度-时间曲线:通过测定不同时间点生物样本中环辛烯基衍生物原形的浓度,绘制药时曲线,评估其吸收与消除动力学。
主要代谢物鉴定与定量:识别并定量生物转化产生的主要代谢物,如羟基化、脱烷基化等产物,明确主要代谢途径。
表观分布容积测定:计算药物在体内分布程度的理论容积,反映其组织亲和力与分布特性。
血浆清除率分析:评估单位时间内机体清除药物血浆的能力,是衡量药物消除速度的关键参数。
半衰期计算:确定药物浓度下降一半所需的时间,直接反映药物在体内的滞留时间。
血浆蛋白结合率:测定药物与血浆蛋白(主要是白蛋白)的结合比例,影响其分布、代谢活性和药效。
代谢稳定性评估:通常在肝微粒体或肝细胞中进行,量化母体化合物在代谢系统中的降解速率,预测体内清除率。
CYP450酶亚型鉴定:利用特异性化学抑制剂或重组人CYP450酶,鉴定负责其代谢的关键细胞色素P450酶亚型。
代谢产物谱分析:全面、非靶向地分析所有可能的代谢产物,绘制完整的代谢转化图谱。
质量平衡研究:通过放射性标记技术追踪药物及其代谢物的总回收率,确保代谢途径的完整性。
检测范围
体外肝微粒体温孵体系:使用人或实验动物(大鼠、犬等)的肝微粒体,进行初步代谢速率和酶表型研究。
原代肝细胞培养模型:采用新鲜分离或冻存的人或动物原代肝细胞,提供更接近生理状态的代谢环境。
重组CYP450酶系:使用表达单一CYP亚型的重组酶系统,精确确定参与代谢的具体酶亚型。
体内血浆样本:采集给药后不同时间点的动物或人体血浆,用于药代动力学核心参数分析。
体内尿液与胆汁样本:收集尿液和胆汁,用于鉴定和定量排泄途径中的代谢产物,特别是II相结合物。
组织分浆样本:对肝脏、肾脏、脑等重要组织进行匀浆处理,分析药物的组织分布与局部代谢。
粪便样本:分析经胆汁排泄和直接肠道排泄的药物及相关代谢物。
体外肠微粒体或Caco-2细胞模型:评估环辛烯基衍生物在肠道可能发生的首过代谢。
血浆及肝S9组分:用于评估II相代谢反应(如葡萄糖醛酸化、硫酸化)的活性。
跨物种比较样本:涵盖小鼠、大鼠、犬、猴及人等不同种属的生物样本,进行代谢种属差异比较。
检测方法
液相色谱-串联质谱法:高灵敏度、高选择性的主流方法,用于复杂生物基质中母体药物及代谢物的定性与定量分析。
<强>高分辨率质谱法强>:采用Q-TOF或Orbitrap等高分辨质谱,精确测定代谢物分子量,推断其元素组成和结构。
<强>放射性示踪法强>:使用14C或3H标记的化合物,通过液体闪烁计数或放射性HPLC进行质量平衡和代谢物谱研究。
<强>酶动力学分析法强>:通过测定不同底物浓度下的代谢速率,计算米氏常数和最大反应速率等动力学参数。
<强>化学抑制实验法强>:使用特异性CYP450酶抑制剂共同温孵,根据抑制程度判断主要参与的代谢酶亚型。
<强>抗体抑制实验法强>:利用针对特定CYP450亚型的抑制性抗体,确认该亚型在代谢中的作用。
<强>固相萃取/液液萃取前处理法强>:从生物样本中提取、净化和富集目标分析物,以降低基质干扰并提高检测灵敏度。
<强>蛋白质沉淀法强>:快速去除血浆等样本中的蛋白质,是常用的简单前处理方法之一。
<强>在线电化学模拟法强>:利用电化学系统模拟生物体内的氧化代谢过程,快速预测可能的氧化代谢产物。
<强>核磁共振波谱法强>:用于对分离得到的主要未知代谢产物进行精确的结构解析与确认。
检测仪器设备
<强>三重四极杆液质联用仪强>:进行靶向定量分析和多反应监测的核心设备,灵敏度高、线性范围宽。
<强>高分辨飞行时间液质联用仪强>:用于非靶向代谢物筛查和未知物结构推测的关键仪器。
<强>线性离子阱-轨道阱组合质谱仪强>:兼具高分辨和多级质谱功能,非常适合代谢产物的深度结构解析。
<强>高效液相色谱仪强>:作为质谱的前端分离系统,配备C18等反相色谱柱实现化合物分离。
<强>液体闪烁计数器强>:用于检测放射性标记实验中的样品放射性强度。
<强>恒温振荡培养箱强>:为体外肝微粒体、肝细胞等温孵实验提供恒温及振荡环境。
<强>超高效液相色谱仪强>:使用小粒径色谱柱,提供更快分离速度和更高色谱峰分辨率。
<强>生物样品均质仪强>:用于快速、均匀地破碎组织样本,制备组织匀浆。
<强>高速冷冻离心机强>:用于低温条件下快速分离血浆、去除蛋白沉淀物及细胞碎片。
<强>氮吹浓缩仪强>:在温和加热下利用氮气吹扫液体样品,实现提取液的快速浓缩与定容。
检测流程
1、咨询:提品资料(说明书、规格书等)
2、确认检测用途及项目要求
3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)
4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)
5、收到样品,安排费用后进行样品检测
6、检测出相关数据,编写报告草件,确认信息是否无误
7、确认完毕后出具报告正式件
8、寄送报告原件
