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    血液样本邻苯二甲酸酯代谢物分析

    发布时间:2026-06-11

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    检测概要:本检测详细阐述了血液样本中邻苯二甲酸酯代谢物分析的全流程技术体系。本检测系统介绍了该分析所涵盖的核心检测项目、目标代谢物的检测范围、当前主流的检测方法学原理与步骤,以及完成精准分析所必需的精密仪器设备。内容旨在为环境暴露评估、毒理学研究及临床监测领域的专业人员提供一份全面、结构化的技术参考。

检测项目

邻苯二甲酸单乙酯:邻苯二甲酸二乙酯的主要水解代谢产物,常用于评估相关塑化剂的短期暴露水平。

邻苯二甲酸单丁酯:邻苯二甲酸二丁酯在体内的特征性初级代谢物,是评估DBP暴露最常用的生物标志物。

邻苯二甲酸单异丁酯:邻苯二甲酸二异丁酯的代谢产物,用于区分和评估不同丁酯同分异构体来源的暴露。

邻苯二甲酸单苄酯:邻苯二甲酸苄基丁酯的代谢标志物,其存在与个人护理品等消费品的使用关联密切。

邻苯二甲酸单环己酯:由邻苯二甲酸二环己酯代谢产生,在特定工业应用和材料中可能作为暴露指标。

邻苯二甲酸单-2-乙基己酯:作为DEHP的主要氧化代谢产物,比其水解产物MEHP更稳定,是评估DEHP长期或慢性暴露的优选生物标志物。

邻苯二甲酸单-2-乙基-5-羟基己酯:DEHP的次级氧化代谢物,提供了DEHP在体内进一步生物转化的信息,常与MEHP、MEHHP等联合分析。

邻苯二甲酸单-2-乙基-5-氧代己酯:DEHP的另一关键次级氧化代谢物,与MEHHP共同构成评估DEHP内暴露剂量的核心指标组合。

邻苯二甲酸单-2-乙基-5-羧基戊基酯:DEHP的终末氧化代谢产物,半衰期较长,能更准确地反映一段时间内的累积暴露情况。

邻苯二甲酸单正辛酯:源自邻苯二甲酸二正辛酯的代谢,可用于评估高分子量邻苯二甲酸酯的暴露。

检测范围

初级水解单酯:如MEP、MnBP、MiBP、MBzP等,直接由母体化合物酶解生成,反映近期暴露。

次级氧化代谢物:如MEHHP、MEOHP、MECPP等,由初级代谢物进一步氧化形成,稳定性更高,反映较长时间窗口的暴露。

游离态代谢物:指未与葡萄糖醛酸等结合、以原形存在于血液中的部分,需在分析前进行酶解处理以释放。

结合态代谢物总量:指游离态与葡萄糖醛酸结合态的总和,通常通过酶解后测定,代表体内总负荷。

痕量水平检测3:血液中PAEs代谢物浓度通常在ng/mL甚至pg/mL级别,要求方法具备极高的灵敏度。

多种同分异构体区分:如MnBP与MiBP,需要色谱方法具备良好的分离能力以实现准确定量。

内源性干扰物排除3:血液基质复杂,需有效分离目标物与磷脂、蛋白质、脂肪酸等内源性物质的干扰。

宽线性动态范围3:不同个体暴露水平差异巨大,方法需覆盖从检出限到数百ng/mL的宽浓度范围。

母体化合物残留3:虽然主要分析代谢物,但有时也需关注样本采集和处理过程中母体PAEs的引入污染。

质量控制样品范围3:包括方法空白、基质加标、平行样及有证标准物质等,确保整个分析过程的质量可控。

检测方法

固相萃取:最常用的前处理方法,利用C18、HLB等吸附剂选择性富集净化和浓缩目标代谢物,有效去除基质干扰。

液相萃取:采用有机溶剂(如乙腈、乙酸乙酯)进行液-液萃取,方法经典,适用于多种极性代谢物的提取。

酶解处理3:使用β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶水解样本,将结合态代谢物转化为游离态,用于测定总浓度。

同位素稀释法3:在样本预处理前加入稳定同位素标记的内标(如D4-MEP, D4-MEHP),可有效校正前处理及仪器分析的损失和基质效应。

高效液相色谱串联质谱法3:当前的金标准方法,LC实现分离,三重四极杆质谱在多反应监测模式下提供高选择性和高灵敏度定量。

气相色谱串联质谱法3:适用于挥发性较好的代谢物(如部分短链单酯),通常需进行衍生化步骤以提高灵敏度和色谱行为。

色谱分离优化3:采用反相C18色谱柱,以甲醇/水和乙腈/水(常含甲酸或乙酸铵)为流动相进行梯度洗脱,实现所有目标物的基线分离。

质谱多反应监测3:为每个目标物及其同位素内标优化两对特征离子对(定量离子对和定性离子对),确保定性的准确性和定量的精密度。

标准曲线法定量3:使用系列浓度的标准溶液绘制标准曲线,以内标法或外标法计算样本中目标代谢物的准确浓度。

质量控制与保证3:贯穿分析全程,包括空白实验、平行样分析、加标回收实验、盲样测试及使用标准参考物质验证方法准确性。

检测仪器设备

三重四极杆液相色谱串联质谱仪: 核心检测设备,具备高效分离和高通量、高灵敏度定量能力,是完成超痕量多组分分析的关键。

高效液相色谱仪: 用于承载色谱柱并提供精确的梯度洗脱程序,实现复杂血液基质中目标代谢物的物理分离。

固相萃取装置: 手动或自动化的SPE工作站,用于批量处理样本,实现目标物的富集、净化和浓缩。

高速冷冻离心机: 用于血液样本的离心分离(如分离血清/血浆)、蛋白沉淀后的离心及样本预处理中的各离心步骤。

氮吹浓缩仪: 在温和加热下使用高纯氮气吹扫样品提取液,快速蒸发溶剂,使目标物浓缩至小体积以供上机分析。

涡旋混合器: 用于样本、内标、萃取溶剂等的快速、充分混合,确保反应或萃取完全。

-80°C超低温冰箱: 用于长期保存血液样本及标准品储备液,防止目标物降解并保证样本稳定性。

>pH计: 精确测量和调节样品或缓冲溶液的pH值,以优化固相萃取或液液萃取的效率。

>分析天平(万分之一): 用于精确称量标准品、试剂等,是配制标准溶液和流动相的基础。

>超纯水系统: 制备符合质谱分析要求的超纯水(电阻率≥18.2 MΩ·cm),用于配制流动相、标准溶液及清洗容器。

检测流程

1、咨询:提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品,安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据,编写报告草件,确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件

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