核酸蛋白交联等离子共振检测

检测项目

核酸-蛋白质结合动力学：实时测定DNA/RNA与特定蛋白（如转录因子）结合与解离的速率常数，解析相互作用动力学参数。

蛋白质-蛋白质相互作用亲和力：精确测量两种蛋白质之间的结合常数（KD），评估相互作用强度。

小分子药物筛选：检测候选小分子化合物与靶标蛋白的结合活性，用于高通量药物先导物发现。

抗体-抗原表征：分析单克隆抗体或多克隆抗体与其对应抗原的表位结合特异性、亲和力及动力学。

核酸适配体筛选与优化：在交联状态下评估核酸适配体与靶蛋白的结合性能，用于优化适配体序列。

酶-底物相互作用：研究酶（如核酸酶）与其核酸底物在交联状态下的特异性识别和催化前复合物形成。

表观遗传修饰影响：检测DNA甲基化、组蛋白修饰等表观遗传标记如何影响其与相应阅读蛋白的结合能力。

复合物组装分析：研究多组分核酸-蛋白质复合物（如转录起始复合物）的逐级组装过程与稳定性。

竞争结合实验：通过加入竞争分子，分析不同核酸序列或突变蛋白对核心相互作用的干扰能力。

浓度定量分析：基于响应信号与分子量的关系，对交联样品中目标核酸或蛋白成分进行相对或绝对定量。

检测范围

基础分子生物学研究：应用于转录调控、翻译起始、DNA修复等过程中核心核酸-蛋白质互作机制的研究。

药物发现与开发：覆盖从靶点验证、高通量筛选到先导化合物优化的全流程，特别是针对“不可成药”靶点。

诊断试剂开发：用于开发基于特异性核酸蛋白识别的高灵敏度生物传感器和诊断试纸条的核心验证。

表观遗传学分析：研究组蛋白修饰、DNA甲基化与相应结合蛋白的相互作用网络。

病毒学与病原体检测：研究病毒核酸与宿主蛋白的相互作用，以及开发病原体核酸快速检测方法。

食品安全监测：检测食品中可能存在的特定病原体核酸或过敏原蛋白，构建快速检测平台。

环境微生物检测：用于环境中特定功能基因（核酸）及其表达产物（蛋白）的关联分析。

合成生物学：表征人工设计的基因回路中调控元件（核酸）与工程化蛋白模块的相互作用效能。

生物材料表征：评估功能化生物材料表面固定的核酸探针与溶液中靶蛋白的结合特性。

法医学应用：用于微量DNA样本与特定蛋白标记物的高灵敏度关联分析。

检测方法

表面等离子体共振技术：核心光学方法，通过监测传感器表面折射率变化实时反映生物分子结合与解离。

共价交联固定法：通过化学方法将核酸或蛋白质共价固定在SPR芯片的金膜表面，提高稳定性。

链霉亲和素-生物素捕获法：最常用的间接固定法，将生物素标记的核酸或蛋白捕获到芯片上，保持分子活性。

直接结合检测法：将一种相互作用分子固定，另一种以溶液形式流过芯片表面，直接测量结合信号。

竞争抑制检测法：在溶液相中加入游离竞争物，通过信号抑制程度分析竞争分子的活性。

夹心法检测：先固定捕获分子，结合目标后，再用第二种识别分子进行检测，可提高特异性与灵敏度。

多循环动力学分析：在同一通道内依次进行结合、解离和再生多个循环，获取高质量的动力学数据。

单循环动力学分析：在单个结合-解离循环中，通过连续递增分析物浓度获取动力学数据，节省样品。

浓度梯度分析：设置不同浓度的分析物依次流过固定有配体的芯片表面，用于稳态亲和力分析。

表面再生优化：开发温和而有效的再生条件（如特定pH缓冲液），在不损伤固定分子的前提下移除结合的分析物，实现芯片重复使用。

检测仪器设备

SPR生物传感器主机：包含光学检测单元、液体处理系统和温控系统的核心仪器，用于产生和检测SPR信号。

系列化SPR传感芯片：核心耗材，通常为玻璃基底镀金膜，表面修饰有羧基、链霉亲和素等不同化学基质。

微流体流动池与管路系统：精确控制样品溶液以稳定流速流过芯片表面，确保相互作用的均一性。

高精度注射泵或液相色谱系统：用于精确输送样品和缓冲液，实现浓度梯度和脉冲注入。

集成式自动进样器：支持多样品盘，实现高通量、自动化的样品顺序进样，减少人为误差。

专用数据采集与分析软件：实时采集传感器图谱，并提供动力学拟合、亲和力计算等高级分析模块。

缓冲液脱气装置：用于去除流动相中的气泡，防止微流路堵塞和信号噪声干扰。

高精度温控模块：确保实验过程在恒温（如25°C或37°C）下进行，保证数据可靠性和重复性。

芯片预处理工作站：用于芯片的清洗、活化、配体固定和封闭等预处理步骤，可手动或自动完成。

参考通道与背景扣除系统：仪器通常设计有参考流动池，用于实时扣除背景信号、非特异性吸附及缓冲液折射率变化带来的干扰。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件