生物标志物定量等离子共振检测

检测项目

蛋白质浓度定量：直接测量溶液中或芯片表面结合的特异性靶蛋白的绝对浓度，是SPR最核心的定量应用。

抗体-抗原亲和力测定：通过实时监测结合与解离过程，精确计算抗体与抗原之间的结合常数（KD）、结合速率（ka）和解离速率（kd）。

核酸杂交动力学分析：实时监测DNA-DNA、DNA-RNA或RNA-RNA之间的杂交过程，用于基因分型、突变检测和microRNA定量。

小分子药物筛选：评估小分子化合物与靶点蛋白（如酶、受体）的结合活性和特异性，是药物发现的关键环节。

受体-配体相互作用：研究细胞表面受体（如G蛋白偶联受体）与其天然配体或药物分子的相互作用动力学。

蛋白-蛋白相互作用：定量分析信号通路中关键蛋白之间的结合强度与动力学，揭示细胞通讯机制。

酶活性与抑制分析：通过监测底物结合或产物生成引起的信号变化，实时定量酶活性和抑制剂效力。

细胞外囊泡表面标志物定量：对外泌体等细胞外囊泡表面的特异性蛋白标志物进行定量分析，用于液体活检。

生物标志物多指标联检：通过多通道或阵列芯片，同时定量一个样本中多种不同的疾病相关生物标志物。

疫苗抗原表征：评估疫苗抗原与中和抗体的结合能力，用于疫苗研发和质量控制。

检测范围

蛋白质类标志物：涵盖细胞因子、生长因子、激素、酶、抗体、肿瘤标志物（如PSA， CEA）等多种蛋白质。

核酸类标志物：包括基因组DNA、信使RNA（mRNA）、微小RNA（miRNA）、循环肿瘤DNA（ctDNA）等。

小分子化合物：激素、代谢物、维生素、药物及其代谢产物等分子量小于1000 Da的物质。

多肽与寡核苷酸：短链氨基酸序列和人工合成的DNA/RNA短链，常用于药物先导物和探针研究。

糖类与糖蛋白：分析聚糖结构及其与凝集素的相互作用，或糖蛋白的整体结合特性。

脂质体与膜蛋白：在模拟细胞膜的环境（如脂质双分子层）中研究膜蛋白的功能和相互作用。

全细胞与细菌：直接分析完整细胞或细菌与固定化配体的粘附作用，用于病原体检测和细胞学研究。

病毒样颗粒：定量分析病毒表面蛋白与受体或抗体的相互作用，用于病毒学研究与疫苗开发。

临床血清/血浆样本：直接对复杂的临床体液样本中的特定生物标志物进行定量，无需复杂纯化。

细胞培养上清液：实时监测细胞分泌的蛋白质或代谢产物，用于细胞功能研究和生物工艺开发。

检测方法

直接结合法：将捕获分子固定于芯片，直接测量分析物与之结合产生的SPR信号变化，是最常用的方法。

夹心法/间接法：先捕获目标物，再引入带有标记或高分子的二抗或检测分子以放大信号，提高灵敏度。

竞争抑制法：适用于小分子检测，样品中的小分子与芯片上固定的类似物竞争结合有限量的抗体，信号与浓度负相关。

动力学分析：通过连续流速注射分析物，实时记录结合与解离曲线，并利用软件拟合获得动力学参数。

浓度定量分析：在稳态结合阶段测量响应值，通过已知浓度的标准品绘制标准曲线，计算未知样品浓度。

多周期再生分析：在一次实验中，使用温和的再生溶液解离结合的分析物，使芯片表面重复使用，进行多个结合-解离循环。

单周期浓度分析：依次注入递增浓度的同一样品，无需再生，直接获得结合曲线用于动力学或亲和力拟合。

表面捕获法：先将一种相互作用分子（如抗体）固定在芯片上，用于从样品中捕获并富集目标分子，再进行结合分析。

脂质体增强法：将待测分子锚定在脂质体上，利用脂质体的大质量引起显著的信号放大，特别适合小分子检测。

局部折射率校正：通过设置参比通道或使用特殊芯片，扣除溶液折射率背景干扰，提高在复杂样本JianCe测的准确性。

检测仪器设备

SPR光学检测单元：仪器的核心，通常包含光源、棱镜、检测器，用于产生和测量等离子共振角的变化。

微流体系统：由精密泵、阀门和微流路芯片组成，控制样品以稳定流速流经传感器表面，确保数据可靠性。

传感器芯片：镀有金膜的玻璃基底，表面常修饰有羧基、链霉亲和素、镍螯合物等化学层，用于固定生物分子。

自动进样器：实现多个样品、缓冲液和再生溶液的高通量、自动化顺序进样，减少人为误差。

温控系统：精确控制样品和检测池的温度，因为分子相互作用对温度敏感，温控是获得可重复数据的关键。

数据处理软件：用于实时采集信号、进行基线校正、动力学拟合、亲和力计算和浓度定量的正规分析软件。

多通道/阵列SPR系统：允许同时平行检测多个相互作用对或进行高通量筛选，大幅提升检测效率。

参比通道：仪器中用于实时扣除非特异性结合、基质效应和折射率漂移的对照检测通道。

芯片耦合设备：用于将传感器芯片精准对准并耦合到光学棱镜上的机械装置，确保光路准确。

缓冲液脱气装置：在运行前去除缓冲液中的溶解气体，防止在微流路中产生气泡，干扰流速和信号稳定性。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件