组织表达水平分析

检测项目

mRNA表达量：定量检测特定基因信使RNA的丰度，是衡量基因转录活性的核心指标。

蛋白质表达量：直接测定目标蛋白在组织或细胞中的绝对或相对含量，反映基因的最终功能产物水平。

磷酸化蛋白水平：检测蛋白质特定氨基酸残基的磷酸化修饰程度，用于分析信号通路的激活状态。

甲基化水平：分析基因启动子区或特定CpG岛的DNA甲基化状态，与基因沉默密切相关。

乙酰化水平：测定组蛋白或非组蛋白的乙酰化修饰水平，关联染色质开放性和基因转录活性。

可变剪接异构体：识别和定量同一基因通过不同剪接方式产生的多种mRNA变体。

微小RNA（miRNA）表达谱：系统性分析一组miRNA的表达情况，用于研究转录后调控网络。

长链非编码RNA（lncRNA）表达：检测不编码蛋白质的长链RNA分子的表达水平，其在表观遗传调控中起关键作用。

环状RNA（circRNA）表达：定量分析呈闭合环状结构的非编码RNA，具有作为分子海绵等功能。

核糖体结合RNA分析：通过核糖体印记等技术，鉴定正在被翻译的mRNA，直接反映蛋白质合成活性。

检测范围

全转录组：对样本中所有类型的RNA（编码和非编码）进行无偏倚的全面分析。

目标基因Panel：针对与特定疾病或通路相关的一组预设基因进行定向、高灵敏度的表达检测。

单细胞水平：在单个细胞分辨率下分析基因表达，揭示细胞异质性和稀有细胞群的特征。

空间转录组：在保留组织空间位置信息的前提下，分析不同区域细胞的基因表达模式。

亚细胞定位：分析目标分子（如蛋白或RNA）在细胞核、细胞质、细胞膜等不同区室中的分布。

时间动态变化：在药物处理、发育过程或疾病进展的不同时间点取样，监测表达水平的时序性变化。

不同病理分期组织：比较正常组织、癌前病变、原发癌、转移癌等不同病理阶段的表达差异。

不同基因型样本：比较野生型与基因敲除、敲低或过表达模型中的表达谱变化。

不同处理组：分析经药物、激素、细胞因子或物理刺激处理后，组织表达谱的响应。

跨物种比较：对比同源基因在不同物种组织中的表达模式，用于进化与功能保守性研究。

检测方法

实时荧光定量PCR（qPCR）：基于荧光信号对特定DNA序列进行高灵敏度、高特异性的定量分析，是验证表达水平的金标准。

逆转录PCR（RT-PCR）：将RNA逆转录为cDNA后进行PCR扩增，用于定性或半定量检测基因表达。

RNA测序（RNA-seq）：高通量测序技术，可全面、精准地定量整个转录组并发现新转录本。

微阵列基因芯片：利用预先固定在芯片上的探针与标记样本杂交，进行中通量的表达谱筛查。

蛋白质印迹法（Western Blot）：通过凝胶电泳分离蛋白质，再利用特异性抗体进行检测和半定量。

酶联免疫吸附试验（ELISA）：利用抗原-抗体反应，对溶液中的特定蛋白质进行灵敏的定量检测。

免疫组织化学（IHC）：在组织切片上使用抗体标记目标蛋白，可在形态学背景下进行定位和半定量分析。

免疫荧光（IF）：使用荧光标记的抗体检测目标蛋白，可实现多色标记和亚细胞定位的精细观察。

原位杂交（ISH）：使用标记的核酸探针与组织切片中的目标RNA杂交，实现RNA的空间定位检测。

质谱分析：特别是基于液相色谱-串联质谱的蛋白质组学技术，可对复杂样本中的蛋白质进行大规模鉴定和定量。

检测仪器设备

实时荧光定量PCR仪：用于执行qPCR反应，通过监测循环中荧光信号的增长来定量初始模板量。

高通量测序仪：如Illumina NovaSeq等平台，是实现RNA-seq等大规模测序的核心设备。

微阵列扫描仪：用于扫描基因芯片杂交后的荧光信号，并将其转化为数字图像数据进行定量。

凝胶成像系统：用于对电泳凝胶（如琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶）进行拍照和条带定量分析。

蛋白电泳及转膜系统：包括电泳槽和转印仪，用于Western Blot实验中的蛋白分离和转移。

酶标仪：用于读取ELISA等实验中微孔板各孔的吸光度或荧光值，实现自动化定量。

正置/倒置荧光显微镜：观察免疫荧光、原位杂交等实验的染色结果，并进行图像采集。

激光共聚焦显微镜：提供高分辨率、高对比度的三维荧光图像，用于亚细胞结构的精细观察和定量。

液相色谱-串联质谱联用仪（LC-MS/MS）：蛋白质组学研究的核心设备，用于复杂肽段混合物的分离、鉴定和定量。

数字病理扫描仪：将整张组织切片高速扫描成高分辨率数字图像，便于IHC等结果的数字化分析和存档。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件