绝对分子量测定:通过光散射等技术直接测定仙草多糖在溶液中的绝对平均分子量,不依赖于标准品。
相对分子量测定:基于凝胶色谱法,通过与已知分子量的标准品进行比较,得出多糖的相对分子量及其分布。
数均分子量:基于样品中所有分子链的数量进行统计平均得到的分子量,对低分子量部分敏感。
重均分子量:基于样品中所有分子链的质量进行统计平均得到的分子量,对高分子量部分敏感。
Z均分子量:基于分子量的更高次方进行平均,对样品中极高分子量组分极为敏感。
分子量分布指数:计算重均分子量与数均分子量的比值,用于表征仙草多糖分子量的均一性或分散程度。
分子量分布曲线:绘制分子量随洗脱体积或时间变化的曲线,直观展示不同分子量组分的相对含量。
特性粘度测定:通过乌氏粘度计测定多糖溶液的特性粘度,并与分子量建立关联。
流体力学半径测定:利用动态光散射技术测定多糖分子在溶液中的旋转半径,反映分子的空间构象。
构象分析:结合分子量与特性粘度等数据,分析仙草多糖在溶液中的链构象,如球状、无规线团或棒状。
仙草热水提取粗多糖:对传统水提法获得的粗制仙草多糖进行初步分子量范围评估。
分级纯化后多糖组分:对经过柱层析、膜分离等方法分级后的均一性多糖组分进行精确分子量测定。
不同产地来源样品:比较分析不同地理来源的仙草原料所提取多糖的分子量特征差异。
不同采收期样品:研究仙草在不同生长阶段其多糖分子量及分布的变化规律。
不同提取工艺样品:评估超声、酶法、微波等不同提取技术对最终多糖产品分子量的影响。
降解产物分析:对经过酸、碱或酶降解处理的仙草多糖片段进行分子量监控。
化学修饰产物:对硫酸化、羧甲基化等化学修饰后的仙草多糖衍生物进行分子量变化检测。
制剂中间体与成品:在含仙草多糖的保健品或药品生产过程中,对关键中间体及终产品进行质量控制。
稳定性研究样品:在加速或长期稳定性试验中,监测仙草多糖分子量随时间的变化,评估其降解情况。
结构-活性关系研究:为探究仙草多糖分子量与其抗氧化、免疫调节等生物活性的构效关系提供基础数据。
凝胶渗透色谱法:最常用的方法,基于多糖分子在凝胶填料孔隙中的体积排阻效应进行分离和分子量测定。
多角度激光光散射法:与GPC联用,通过测量不同角度的散射光强,直接测定绝对分子量和分子尺寸。
尺寸排阻色谱法:与GPC原理类似,使用特定的色谱柱分离不同流体力学体积的多糖分子。
动态光散射法:通过分析溶液中分子布朗运动引起的散射光波动,测定分子的扩散系数和流体力学半径。
静态光散射法:通过测量散射光强与角度、浓度的关系,依据瑞利散射理论计算绝对分子量。
粘度法:通过测量多糖溶液的相对粘度、增比粘度和特性粘度,利用Mark-Houwink方程估算分子量。
超速离心沉降法:基于分子在强大离心力场下的沉降速度来测定分子量和分子形状。
质谱法:如基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱,适用于较低分子量多糖或寡糖的精确分子量测定。
端基分析法:通过化学方法测定多糖链末端的还原性基团数量,从而计算数均分子量,适用于线性多糖。
联用技术:将GPC/SEC与光散射、示差折光、粘度检测器联用,实现分离、检测与分子量测定的同步完成。
凝胶渗透色谱系统:核心分离设备,包括泵、进样器、色谱柱和恒温系统,用于按分子尺寸分离多糖。
多角度激光光散射检测器:与GPC系统在线连接,用于直接、绝对地测定流过检测池中多糖分子的分子量和半径。
示差折光检测器:通用型浓度检测器,用于检测GPC洗脱液中多糖的浓度,是计算分子量的基础。
在线粘度检测器:测量GPC洗脱液中多糖溶液的特性粘度,提供构象信息并与光散射数据互补。
动态光散射仪:独立的台式仪器,用于快速测定多糖样品在溶液中的粒径分布和流体力学半径。
乌氏粘度计:经典的玻璃毛细管粘度计,用于手动精确测定多糖稀溶液的特性粘度。
自动粘度计:自动化程度更高的粘度测量设备,可减少人为操作误差,提高测试效率。
高效液相色谱系统:配置尺寸排阻色谱柱,可作为进行SEC分析的平台,需搭配相应的检测器。
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪:用于精确测定低分子量仙草多糖或寡糖的分子量及寡糖序列分析。
数据处理工作站与软件:配备正规的GPC/SEC数据处理软件,用于采集信号、处理数据、计算分子量及绘制分布曲线。
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