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    代谢组学液相色谱-质谱联用测试

    发布时间:2026-04-01

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    检测概要:本检测详细介绍了代谢组学研究中核心的分析技术——液相色谱-质谱联用测试。文章系统阐述了该技术的四大核心模块:检测项目、检测范围、检测方法与检测仪器设备。通过列举40个具体的技术要点,旨在为读者提供一份全面、深入的技术参考,涵盖从基础代谢物分析到复杂生物标志物发现的全流程,适用于生命科学、医学研究及药物开发等领域的研究人员。

检测项目

氨基酸及其衍生物分析:定量和定性分析生物样本中20多种常见氨基酸及其修饰产物,反映蛋白质代谢状态。

有机酸谱分析:检测三羧酸循环、糖酵解等核心能量代谢途径中的中间产物,评估细胞能量代谢水平。

脂肪酸与脂质代谢物分析:涵盖游离脂肪酸、短链脂肪酸以及多种脂质代谢中间体,研究脂代谢紊乱相关疾病。

糖类与糖代谢中间体分析:包括单糖、双糖、糖酵解和磷酸戊糖途径的中间代谢物,揭示糖代谢通路变化。

核苷酸及其代谢物分析:检测嘌呤、嘧啶核苷酸及其降解产物,用于研究细胞增殖、凋亡及免疫调节。

胆汁酸靶向分析:特异性检测初级和次级胆汁酸谱,评估肝脏功能、肠道菌群与脂质消化吸收状况。

维生素与辅酶分析:定量水溶性和脂溶性维生素及其活性形式,探究微量营养素在代谢中的作用。

神经递质与相关代谢物分析:检测儿茶酚胺、吲哚胺、氨基酸类神经递质,用于神经科学和精神病学研究。

植物次级代谢物分析:针对植物样本,分析黄酮类、生物碱、萜类等化合物,用于植物代谢组学和中药研究。

氧化应激标志物分析:检测谷胱甘肽、抗坏血酸、脂质过氧化产物等,评估机体氧化还原平衡状态。

检测范围

极性小分子代谢物:覆盖分子量通常在1000 Da以下、具有较高极性的代谢物,如有机酸、氨基酸等。

中等极性至非极性代谢物:包括大部分脂类、固醇类以及某些疏水性维生素,需采用不同的色谱分离条件。

宽动态浓度范围:检测技术可覆盖从pmol/mL到μmol/mL甚至更宽浓度范围的代谢物,满足不同丰度物质分析需求。

复杂生物基质:适用于血清、血浆、尿液、组织匀浆液、细胞提取物、粪便、脑脊液等多种生物样本。

药物及其代谢产物:能够检测外源性药物在生物体内的原型及其I相、II相代谢产物,用于药代动力学研究。

微生物代谢产物:分析肠道菌群或环境微生物产生的短链脂肪酸、吲哚类、苯酚类等特征代谢物。

同位素标记代谢流中间体:通过稳定同位素标记技术,追踪特定原子在代谢网络中的流向,用于代谢通量分析。

疾病特异性生物标志物:筛选和验证与癌症、糖尿病、心血管疾病等相关的潜在小分子标志物。

植物和食品提取物:应用于食品代谢组学、农产品质量检测以及功能性成分分析等领域。

环境样本中的代谢物:扩展至土壤、水体等环境样本,用于生态毒理学和环境微生物组研究。

检测方法

反相液相色谱法:最常用的色谱方法,使用C18等非极性固定相,适用于分离中等极性至非极性代谢物。

亲水相互作用色谱法:用于高效分离高极性、强亲水性代谢物,弥补反相色谱的不足,常与反相色谱互补使用。

电喷雾离子化:主流的软电离技术,使待测物在液相中形成带电液滴并去溶剂化生成气相离子,适用于大多数代谢物。

大气压化学电离:适用于弱极性、低极性、热稳定性较差的化合物,是对ESI离子源的有效补充。

全扫描模式:在设定的质荷比范围内无差别地采集所有离子信号,用于非靶向代谢组学,发现未知代谢物。

选择反应监测/多反应监测:针对目标代谢物的特定母离子和子离子对进行高选择性、高灵敏度的检测,用于靶向定量分析。

数据依赖采集模式:在全扫描基础上,自动选择强度高的离子进行二级碎裂,用于获取代谢物的结构信息。

稳定同位素内标法定量:使用同位素标记的类似物作为内标,有效校正前处理和离子化过程中的基质效应和回收率差异。

代谢物数据库检索与鉴定:将实验获得的质谱数据与HMDB、METLIN等公共或自建数据库进行比对,实现代谢物鉴定。

多元统计分析:运用主成分分析、偏最小二乘判别分析等化学计量学方法,从海量数据中提取差异代谢物信息。

检测仪器设备

超高效液相色谱仪:采用小粒径色谱柱和超高压系统,提供高分辨率、高速度和灵敏度的色谱分离。

三重四极杆质谱仪:定量分析的“金标准”,具有极高的灵敏度和特异性,是靶向代谢组学的核心设备。

高分辨率质谱仪:如Q-TOF、Orbitrap等,能提供精确分子量信息,是进行非靶向代谢组学分析和代谢物鉴定的关键。

自动进样器:实现样本的高通量、高精度自动进样,保证实验的重复性和稳定性,减少人为误差。

柱温箱:精确控制色谱柱温度,确保色谱保留时间的重现性,并优化某些热敏性代谢物的分离效果。

真空脱气机:在线去除流动相中的溶解气体,防止在色谱系统内产生气泡,确保流速稳定和基线平稳。

电喷雾离子源:将液相色谱流出的分析物转化为气相离子的接口装置,其设计和性能直接影响离子化效率。

碰撞室:在串联质谱中,通过惰性气体碰撞使母离子碎裂产生子离子,用于结构解析和MRM定量。

高真空系统:包括机械泵和分子涡轮泵,为质量分析器提供必需的高真空环境,保证离子的正常传输和分离。

数据处理工作站:配备正规软件,用于仪器控制、数据采集、谱图处理、定量计算及统计分析的全流程管理。

检测流程

1、咨询:提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品,安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据,编写报告草件,确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件

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