羟基自由基清除率测定

检测项目

样品总抗氧化能力评估：通过测定清除率，综合评价样品对抗羟基自由基氧化损伤的整体能力。

单一化合物清除效能：精确测定特定纯化合物（如维生素C、黄酮、多酚）对羟基自由基的清除效果。

天然提取物活性比较：用于比较不同植物、中药提取物的羟基自由基清除活性，筛选高效原料。

食品及饮料抗氧化性能：评估果汁、茶饮、功能性食品等在模拟生理环境下抵御自由基氧化的潜力。

药品及保健品功效成分验证：验证具有抗氧化宣称的药品或保健品中有效成分的体外活性。

化妆品原料筛选：筛选具有抗衰老、抗光老化潜力的化妆品添加剂，如植物精华、活性肽等。

化学反应动力学研究：通过不同浓度、时间点的清除率测定，研究清除反应的速率和机制。

IC50值测定：计算清除率达到50%时所需样品的浓度，是量化抗氧化活性的关键指标。

协同抗氧化效应研究：考察多种抗氧化物质混合后，对羟基自由基清除作用是相加、协同还是拮抗。

环境样品氧化应激评估：应用于生物或环境样品，间接评估其受氧化应激的程度或自身的抗氧化状态。

检测范围

天然植物与中药提取物：如绿茶多酚、葡萄籽原花青素、姜黄素、白藜芦醇等各种植物活性成分。

合成抗氧化剂：包括丁基羟基茴香醚（BHA）、二丁基羟基甲苯（BHT）、特丁基对苯二酚（TBHQ）等食品添加剂。

维生素类物质：维生素C、维生素E及其衍生物等水溶性与脂溶性维生素。

蛋白质与肽类：乳清蛋白、大豆肽、谷胱甘肽以及各种具有抗氧化功能的活性肽。

多糖类化合物：香菇多糖、枸杞多糖、海藻多糖等具有潜在自由基清除能力的生物大分子。

食品与农产品：各类水果、蔬菜、谷物、食用油脂、蜂蜜及它们的加工制品。

饮料制品：各种茶汤、咖啡、葡萄酒、果汁及功能性饮料。

药品与保健品：具有抗氧化功效的中成药、化学药、膳食补充剂等。

化妆品原料：用于护肤、防晒产品的植物提取物、抗氧化活性成分。

生物体液与组织分浆：血清、血浆、细胞裂解液等，用于评估机体氧化还原状态。

检测方法

Fenton反应法：最经典的方法，利用Fe²⁺与H₂O₂反应产生·OH，通过指示剂被氧化程度计算清除率。

水杨酸捕获法：Fenton法的改进，水杨酸与·OH反应生成有色产物，在510nm测吸光度变化。

邻二氮菲-Fe²⁺氧化法：利用·OH氧化邻二氮菲-Fe²⁺络合物使其褪色，通过536nm吸光值降低程度计算。

脱氧核糖降解法：·OH攻击脱氧核糖产生丙二醛等产物，与硫代巴比妥酸反应显色，于532nm测定。

电子自旋共振法：利用自旋捕获剂捕获短寿命的·OH形成稳定自旋加合物，通过ESR谱直接检测，结果最准确。

化学发光法：基于·OH与鲁米诺等发光剂反应产生光信号，通过测定发光强度来量化自由基浓度。

荧光光谱法：使用荧光探针（如对苯二甲酸）与·OH反应生成高荧光产物，通过荧光强度变化进行检测。

流动注射分析法：将样品注入连续流动的载流中，与Fenton试剂在线混合反应并自动检测，效率高。

细胞模型评估法：在细胞培养体系中诱导产生内源性·OH，通过检测细胞存活率、氧化损伤标志物等间接评估。

高效液相色谱联用法：与HPLC联用，分离复杂样品中的抗氧化成分并同时测定其清除·OH的活性。

检测仪器设备

紫外-可见分光光度计：最常用的设备，用于测定基于显色或褪色反应的吸光度值变化。

荧光分光光度计：用于荧光探针法的检测，具有灵敏度高、选择性好的特点。

电子自旋共振波谱仪：用于ESR方法，是直接检测和鉴定自由基的权威仪器，但价格昂贵。

化学发光检测仪：或配备化学发光检测模块的多功能酶标仪，用于测量化学发光信号。

多功能酶标仪：可进行吸光度、荧光、化学发光等多种模式的微孔板检测，适合高通量筛选。

高效液相色谱仪：用于复杂样品中抗氧化成分的分离，常与DAD或荧光检测器联用。

pH计：用于精确调节反应体系的pH值，因为Fenton等反应对pH非常敏感。

恒温水浴锅或恒温培养箱：为反应提供恒定温度环境，确保实验的重现性。

漩涡混合器：用于快速混合小体积的反应液，使反应物充分接触。

精密移液器与天平：用于试剂的精确量取和称量，是保证数据准确性的基础工具。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件