抗氧化能力 DPPH 法测定

检测项目

总抗氧化能力评估：通过DPPH自由基清除率，综合评价样品中所有抗氧化成分的总和抗氧化效力。

单一化合物抗氧化活性：测定特定纯化合物（如维生素C、维生素E、黄酮、多酚等）清除DPPH自由基的能力。

植物提取物抗氧化活性：评估从不同植物部位（根、茎、叶、花、果实）提取物的抗氧化性能。

食品及饮料抗氧化能力：测定果汁、茶、酒、食用油、功能性食品等产品中抗氧化物质的活性。

药品及保健品抗氧化力：评估具有抗氧化功效的药品、中药制剂及膳食补充剂的体外抗氧化指标。

化妆品原料抗氧化性：测试用于化妆品中的天然或合成抗氧化剂原料（如辅酶Q10、白藜芦醇等）的活性。

生物样品抗氧化状态：研究血清、血浆、组织匀浆等生物样本中抗氧化物质的总水平。

化学反应动力学研究：通过测定不同反应时间的清除率，研究抗氧化剂与DPPH自由基的反应速率。

协同抗氧化效应：评估两种或多种抗氧化物质混合后，其抗氧化效果是相加、协同还是拮抗。

加工工艺影响评估：研究不同加工方式（如加热、干燥、发酵）对食品或原料抗氧化能力的改变。

检测范围

天然产物与中草药：适用于各类中药材、草药提取物及其复方制剂的抗氧化活性筛选。

功能性食品与营养品：涵盖益生菌、膳食纤维、蛋白肽、维生素矿物质补充剂等产品的功效评价。

果蔬及农产品：适用于新鲜水果、蔬菜、谷物、豆类及其加工制品中抗氧化成分的活性测定。

饮料制品：包括各类茶饮、咖啡、葡萄酒、果汁、植物蛋白饮料等液态产品的抗氧化力比较。

油脂及脂肪制品：用于评估食用植物油、动物脂肪、黄油及含油食品的氧化稳定性与抗氧化剂效力。

化妆品与护肤品：适用于面霜、精华液、乳液等产品中添加的抗氧化活性成分的功效验证。

生物医学研究样本：可用于细胞培养上清液、动物组织提取液等生物样本的氧化应激水平间接评估。

化工合成抗氧化剂：如BHT、BHA、TBHQ等合成抗氧化剂的标准品活性测定与质量控制。

环境与材料科学：延伸应用于评估某些具有抗氧化潜力的新型材料或环境样品。

教学与科研实验：作为高校及科研机构在食品科学、药学、营养学等正规的基础教学实验方法。

检测方法

DPPH自由基溶液配制：准确称取DPPH试剂，用无水乙醇或甲醇溶解，配制成特定浓度（如0.1 mM）的储备液，避光保存。

样品溶液制备：将待测样品用适当溶剂（水、乙醇、甲醇等）溶解或稀释至一系列浓度梯度，确保与DPPH溶液兼容。

反应体系建立：取一定体积的样品溶液与等体积的DPPH工作液于试管或微孔板中混合，设立样品空白和DPPH空白对照。

避光反应：将混合液在室温下于暗处静置反应一定时间（通常为30分钟），确保反应完全且避免光照导致自由基降解。

吸光度测定：使用分光光度计或酶标仪，在DPPH自由基的最大吸收波长（通常为517nm）处测定反应液的吸光度值。

清除率计算：根据公式：清除率(%) = [（A对照 - A样品）/ A对照] × 100%，计算各浓度样品的DPPH自由基清除能力。

剂量效应曲线绘制：以样品浓度为横坐标，清除率为纵坐标，绘制剂量-效应曲线，用于直观比较活性。

IC50值计算：通过回归分析，计算出清除率达到50%时所需的样品浓度（IC50值），该值越小表明抗氧化能力越强。

方法学验证：通常包括精密度、重复性、稳定性及加标回收率等实验，以确保检测结果的准确可靠。

结果分析与报告：综合清除率、IC50值及动力学参数，对样品的抗氧化能力进行定量描述和比较分析，形成检测报告。

检测仪器设备

紫外-可见分光光度计：核心设备，用于精确测定反应体系在517nm波长处的吸光度值，要求波长准确且稳定。

酶标仪（微孔板读数仪）：高通量检测的关键设备，特别适用于大量样品或浓度梯度的快速扫描测定。

分析天平（万分之一）：用于精确称量DPPH试剂、标准品及待测样品，确保溶液浓度准确。

超声波清洗器：用于加速难溶性样品的溶解、提取或均匀分散，提高样品前处理效率。

涡旋振荡器：用于快速混匀反应液，确保样品与DPPH试剂充分接触，反应均一。

pH计：用于测量和调节样品溶液的pH值，因为pH可能影响某些抗氧化剂的活性。

恒温水浴锅或温控仪：用于需要控制特定反应温度的实验条件，研究温度对活性的影响。

微量移液器及吸头：用于精确移取微升级至毫升级的液体样品、试剂及标准溶液。

离心机：用于处理浑浊或不澄清的样品液，通过离心获取上清液进行测定，避免干扰。

避光容器与设备：包括棕色容量瓶、避光反应架、铝箔等，用于DPPH溶液保存及反应过程避光，防止自由基见光分解。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件