海蒿子多糖信号通路测试

检测项目

NF-κB通路关键蛋白磷酸化水平：检测IκBα、p65等蛋白的磷酸化状态，评估海蒿子多糖对NF-κB通路活性的影响。

MAPK通路蛋白激酶活性：测定ERK1/2、JNK、p38 MAPK的磷酸化水平，分析多糖对MAPK信号网络的调控作用。

PI3K/Akt通路活性检测：通过检测Akt（Ser473）和PDK1的磷酸化，评估海蒿子多糖对细胞生存与代谢通路的调节。

STAT3转录因子磷酸化与核转位：分析STAT3的Tyr705磷酸化及其在细胞核内的聚集，探究其对炎症或增殖信号的响应。

TGF-β/Smad通路信号转导：检测Smad2/3的磷酸化及与Smad4的结合，研究多糖对纤维化或生长抑制通路的作用。

Wnt/β-catenin通路关键分子：测定β-catenin的稳定性及核内积累，评估海蒿子多糖对经典Wnt通路的干预效果。

AMPK能量感应通路激活：检测AMPKα（Thr172）的磷酸化，分析多糖是否通过调节细胞能量状态发挥作用。

Nrf2/ARE抗氧化通路激活：评估Nrf2蛋白的核转位及其下游基因表达，研究多糖的抗氧化应激能力。

TLR受体介导的MyD88依赖通路：分析TLR4受体激活后MyD88、IRAK、TRAF6等衔接蛋白的相互作用。

凋亡相关通路蛋白Caspase-3/8/9活性：测定Caspase家族蛋白酶活性，明确海蒿子多糖对细胞凋亡通路的促进或抑制。

检测范围

免疫细胞系（如RAW264.7、THP-1）：用于研究海蒿子多糖对免疫炎症相关信号通路的调节作用。

肿瘤细胞系（如HepG2、A549、MCF-7）：用于探究多糖通过特定通路抑制肿瘤细胞增殖或诱导凋亡的机制。

内皮细胞系（如HUVEC）：评估多糖对血管生成相关信号通路（如VEGFR2）的影响。

肝星状细胞系（如LX-2）：用于研究多糖抗肝纤维化过程中对TGF-β等通路的干预。

肠道上皮细胞系（如Caco-2）：分析多糖对肠道屏障功能及相关炎症通路的保护作用。

动物模型组织样本（肝、肾、脾）：从在体水平验证海蒿子多糖处理后的组织内关键通路蛋白的变化。

原代巨噬细胞（小鼠腹腔或骨髓来源）：提供更接近生理状态的模型，用于免疫通路研究。

斑马鱼模型：利用其透明特性，在活体水平可视化观察特定信号通路的激活情况。

3D细胞球模型：模拟体内微环境，研究多糖在更复杂体系中信号通路的传递。

患者来源的原代细胞：在转化医学研究中，评估多糖对特定疾病相关信号通路的潜在调控。

检测方法

蛋白质免疫印迹（Western Blot）：定性或半定量检测信号通路中关键蛋白的表达与磷酸化水平。

酶联免疫吸附测定（ELISA）：定量检测细胞培养上清或裂解液中特定磷酸化蛋白或细胞因子的浓度。

免疫荧光染色与共聚焦显微镜观察：可视化观察信号蛋白（如NF-κB p65）的亚细胞定位与核转位过程。

实时荧光定量PCR（qRT-PCR）：检测信号通路下游靶基因的mRNA表达变化，验证通路功能性输出。

报告基因检测法：构建NF-κB、AP-1等反应元件的荧光素酶报告基因质粒，定量评估通路转录活性。

免疫共沉淀（Co-IP）与Pull-down技术：研究信号通路中蛋白质间的相互作用，如受体与衔接蛋白的结合。

流式细胞术（磷酸化流式）：在单细胞水平高通量、多参数地分析细胞内信号蛋白的磷酸化状态。

激酶活性检测试剂盒：使用特定底物，直接测定从样品中免疫沉淀的激酶（如Akt、MAPK）的活性。

蛋白质芯片技术：高通量同步检测多种信号通路相关蛋白的磷酸化或表达谱。

CRISPR/Cas9基因编辑技术：敲除或敲入特定通路基因，验证海蒿子多糖作用的信号节点必要性。

检测仪器设备

垂直电泳槽与转印系统：用于Western Blot实验中的蛋白分离与膜转移。

化学发光成像分析系统：捕获并分析Western Blot、凝胶等化学发光或荧光信号。

酶标仪：用于ELISA、MTT、报告基因等检测的吸光度或荧光值读取。

激光扫描共聚焦显微镜：高分辨率进行免疫荧光样本的断层扫描与三维重建。

实时荧光定量PCR仪：精确检测信号通路下游基因的转录水平变化。

流式细胞仪：配备多激光器与检测器，用于磷酸化流式等细胞内信号的高通量分析。

蛋白纯化系统（如AKTA）：用于大量制备和纯化通路相关重组蛋白，用于体外研究。

微量分光光度计/纳米滴度计：快速、微量地测定核酸或蛋白样品浓度，用于上游样本制备。

细胞培养箱与生物安全柜：提供无菌环境，用于各类检测所用细胞的培养与处理。

多功能微孔板检测系统：整合吸光、荧光、发光等多种检测模式，适用于多种通路活性检测试剂盒。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件