分离蛋白多糖分子量测试

检测项目

重均分子量：样品中所有分子链的质量加权平均分子量，是表征聚合物平均大小的核心参数。

数均分子量：样品中所有分子链的数量加权平均分子量，对低分子量组分更为敏感。

Z均分子量：基于分子量的Z均值，对高分子量尾端组分极为敏感。

分子量分布：描述样品中不同分子量组分的相对含量，通常以分布宽度指数表示。

多糖组分分子量：在分离状态下，专门测定蛋白多糖分子中多糖链部分的分子量。

蛋白核心分子量：测定蛋白多糖分子中核心蛋白部分的分子量，需在去除多糖链后进行。

完整复合物分子量：测定完整的、未解离的蛋白多糖复合物的表观或绝对分子量。

流体力学半径：通过分子在溶液中的扩散行为推算出的等效球体半径，与分子量相关。

特性粘度：测定高分子在稀溶液中的增比粘度，可用于估算分子量和判断分子构象。

聚集态分析：检测样品中是否存在因非共价相互作用形成的二聚体、多聚体或超大复合物。

检测范围

硫酸软骨素蛋白多糖：如聚集蛋白聚糖，主要存在于软骨等结缔组织中。

硫酸肝素蛋白多糖：如基底膜蛋白聚糖，广泛分布于细胞表面和细胞外基质。

硫酸皮肤素蛋白多糖：如核心蛋白聚糖，参与调节胶原纤维的形成。

透明质酸结合蛋白多糖：如连接蛋白，与透明质酸非共价结合形成超大复合物。

细胞表面蛋白多糖：如 syndecan 家族，其跨膜结构域将多糖链锚定在细胞膜上。

糖胺聚糖链：对从蛋白多糖上酶解或化学裂解下来的单一或多糖链进行分子量测定。

重组表达蛋白多糖：通过基因工程手段生产的、用于研究或治疗目的的蛋白多糖。

药物制剂中的蛋白多糖：如肝素钠（一种高度硫酸化的糖胺聚糖）及其类似物的质量控制。

食品源性蛋白多糖：从海洋生物（如海参、鱼软骨）或动物组织中提取的功能性蛋白多糖。

蛋白多糖降解产物：在病理过程或体外降解实验中产生的、分子量较小的蛋白多糖片段。

检测方法

尺寸排阻色谱法：基于分子流体力学体积差异进行分离，通过标准曲线推算分子量。

多角度激光光散射法：与SEC联用，无需标准品即可直接测定绝对分子量和均方根半径。

场流分离法：在流道场中根据扩散系数分离，特别适用于超大、易碎或具有相互作用的复合物。

质谱法：如MALDI-TOF MS或ESI-MS，提供高精度的分子量信息，尤其适用于组分分析。

沉降速度分析法：利用分析超速离心，根据沉降系数分布推算分子量和形状信息。

沉降平衡分析法：利用分析超速离心达到平衡状态，直接测定绝对分子量。

粘度法：通过测量特性粘度，结合Mark-Houwink方程估算分子量并判断链构象。

动态光散射法：通过测量散射光强的波动来获取流体力学半径和粒径分布信息。

凝胶电泳法：如SDS-AGE或琼脂糖凝胶电泳，通过与已知分子量标准品对比进行半定量估算。

体积排阻色谱-示差折光-粘度三检测器联用法：结合浓度、光散射和粘度信号，提供最全面的分子结构信息。

检测仪器设备

高效液相色谱系统：作为SEC分离的核心部件，提供稳定的流动相和精确的进样。

多角度激光光散射检测器：用于直接、绝对测量高分子在溶液中的分子量和尺寸。

示差折光检测器：通用型浓度检测器，用于测定洗脱组分的浓度。

在线粘度检测器：测量洗脱液的特性粘度，提供分子构象和支化度信息。

紫外-可见光检测器：用于检测含有发色团（如蛋白部分）的样品浓度。

场流分离系统：提供更温和、更广泛的分离范围，适用于超大分子和复杂样品。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪：用于测定多糖链、肽段或完整复合物的精确分子量。

分析型超速离心机：配备光学检测系统，用于沉降速度和沉降平衡分析。

动态光散射仪：快速测量样品的流体力学粒径分布和稳定性。

自动进样器和馏分收集器：实现高通量、自动化的样品分析和目标组分的制备收集。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件