信号通路抑制率测试

检测项目

MAPK/ERK通路抑制率：评估测试物质对丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶信号转导级联反应的抑制效率。

PI3K/Akt/mTOR通路抑制率：测定样品对磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白这一关键生存与生长通路的抑制能力。

JAK/STAT通路抑制率：检测对Janus激酶/信号转导与转录激活因子通路活性的抑制效果，常用于免疫与炎症研究。

Wnt/β-catenin通路抑制率：量化测试物对Wnt/β-连环蛋白通路，尤其是β-连环蛋白稳定与核转位的抑制作用。

NF-κB通路抑制率：评估对核因子κB从抑制状态激活并转入细胞核这一过程的阻断效率。

TGF-β/Smad通路抑制率：测定对转化生长因子-β/Smad蛋白介导的信号转导的抑制程度。

Hedgehog通路抑制率：检测对Hedgehog配体介导的Gli转录因子活性通路的抑制率。

Notch通路抑制率：评估对Notch受体裂解及胞内结构域核转位信号事件的抑制效果。

细胞凋亡通路抑制率：测定对Caspase级联反应等关键凋亡执行通路的抑制情况。

细胞周期通路抑制率：评估对Cyclin-CDK复合物等驱动细胞周期进程的关键调控节点的抑制作用。

检测范围

受体酪氨酸激酶通路：涵盖EGFR、FGFR、VEGFR等多种生长因子受体下游的信号网络抑制测试。

G蛋白偶联受体相关通路：涉及GPCR激活后cAMP、Ca2+、PKC等第二信使系统的抑制率检测。

细胞应激反应通路：包括p38 MAPK、JNK等应激活化蛋白激酶通路的抑制效果评估。

代谢相关信号通路：涵盖AMPK、胰岛素信号等与细胞能量代谢紧密关联通路的抑制测试。

DNA损伤应答通路：检测对ATM/ATR、Chk1/Chk2等DNA损伤感应激酶通路的抑制率。

自噬相关信号通路：评估对JianCeK1复合物、Beclin-1等启动自噬过程的关键信号的抑制作用。

干细胞维持与分化通路：涵盖Oct4、Nanog、Sox2等多能性因子相关核心通路的抑制率测试。

表观遗传调控通路：涉及对组蛋白修饰酶、DNA甲基化转移酶等功能性通路的活性抑制检测。

细胞粘附与迁移通路：包括对FAK、Src、Integrin下游信号影响细胞运动的通路抑制测试。

炎症与免疫调节通路：涵盖TLR、NLR等模式识别受体及下游炎症小体通路的抑制率评估。

检测方法

蛋白质免疫印迹法：通过检测信号通路中关键蛋白磷酸化水平的变化，定量计算抑制率。

酶联免疫吸附测定法：使用特异性抗体，通过显色或发光定量检测磷酸化靶蛋白，计算抑制百分比。

报告基因检测法：构建含有特定响应元件的荧光素酶报告基因质粒，通过测定荧光素酶活性变化反映通路抑制情况。

免疫荧光染色法：利用荧光标记抗体在细胞原位观察信号分子定位与丰度变化，进行半定量抑制分析。

流式细胞术：使用磷酸化特异性流式抗体，在单细胞水平高通量统计信号蛋白活性被抑制的细胞比例。

激酶活性测定法：采用体外激酶实验或均相时间分辨荧光技术，直接测量样品对特定激酶活性的抑制率。

蛋白质芯片技术：通过高通量蛋白质芯片同步检测多条信号通路中多个节点的磷酸化状态，全面评估抑制谱。

实时荧光定量PCR法：检测信号通路下游特定靶基因的转录水平变化，间接反映上游通路的抑制效果。

核质分离与电泳迁移率变动分析：用于检测如NF-κB等转录因子的核转位或DNA结合能力是否被抑制。

基于细胞表型的高内涵成像分析：通过自动化显微镜获取多参数细胞图像，分析由信号抑制导致的形态、数量等表型变化。

检测仪器设备

多功能酶标仪：用于ELISA、报告基因检测、细胞活性测定等多种光学读数的吸光度、荧光及化学发光检测。

化学发光成像系统：高灵敏度捕获Western Blot膜上的化学发光信号，用于精确定量蛋白条带灰度值以计算抑制率。

流式细胞仪：实现对细胞内磷酸化信号蛋白进行多色荧光标记后的快速、定量单细胞分析。

激光共聚焦显微镜：用于高分辨率免疫荧光图像的采集，JianCe观察信号分子在亚细胞结构的定位与强度变化。

实时荧光定量PCR仪：精确测定信号通路下游响应基因的mRNA表达量变化，评估转录水平抑制效果。

高内涵细胞成像分析系统：整合自动化显微镜与图像分析软件，高通量获取并分析基于细胞形态的通路抑制表型数据。

蛋白电泳及转印系统：包括电泳槽、电源和湿转/半干转印仪，是进行Western Blot分析的核心基础设备。

微孔板洗板机：在ELISA等实验步骤中实现孔板的自动化清洗，提高操作的一致性和效率。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件