信号传导抑制试验

检测项目

受体酪氨酸激酶活性抑制：评估抑制剂对EGFR、HER2等受体酪氨酸激酶自磷酸化及下游信号启动的阻断能力。

MAPK/ERK通路抑制：检测化合物对Ras/Raf/MEK/ERK级联反应中关键蛋白磷酸化水平的抑制作用。

PI3K/Akt/mTOR通路抑制：分析抑制剂对PI3K活性、Akt磷酸化及mTOR复合物功能的影响。

JAK-STAT信号抑制：测定药物对JAK激酶活化及STAT蛋白入核转录的干扰效果。

Wnt/β-catenin通路抑制：评估试剂对β-catenin稳定性、核转位及其靶基因转录的抑制。

TGF-β/Smad通路抑制：检测抑制剂对TGF-β受体激酶活性及Smad蛋白磷酸化与复合物形成的影响。

NF-κB通路抑制：分析化合物对IκB降解、NF-κB核转位及炎症基因表达的阻断作用。

细胞凋亡信号抑制：评估药物对死亡受体通路或线粒体通路中Caspase级联活化的抑制。

GPCR下游信号抑制：测定配体或抑制剂对G蛋白偶联受体所激活的二级信使（如cAMP， Ca2+）产生的干扰。

细胞周期相关信号抑制：检测对Cyclin-CDK复合物活性及检查点信号（如p53）通路的抑制作用。

检测范围

肿瘤靶向药物研发：用于高通量筛选和验证针对致癌信号通路的候选化合物或生物制剂。

自身免疫性疾病治疗评估：应用于评估抑制过度免疫信号（如JAK-STAT， NF-κB）的药物疗效。

炎症性疾病机制研究：用于研究在慢性炎症中关键炎症信号通路的活化与抑制机制。

干细胞生物学研究：应用于分析Wnt， Notch等维持干细胞多能性关键通路的调控。

心血管疾病药物筛选：用于评估调节心肌细胞生长、凋亡或纤维化相关信号通路的药物。

神经退行性疾病研究：应用于探究异常蛋白聚集所涉及信号通路的抑制策略。

代谢性疾病研究：用于评估胰岛素信号通路等代谢相关途径的调节剂效果。

感染与免疫反应：应用于研究病原体感染后宿主细胞信号通路的改变及干预手段。

药物耐药性研究：用于分析肿瘤或病原体对现有药物产生耐药性背后的信号通路逃逸机制。

基础细胞信号转导研究：作为基础研究工具，用于阐明特定信号分子在通路中的功能与调控网络。

检测方法

蛋白质免疫印迹：通过检测信号通路中关键蛋白的磷酸化水平变化，直观反映抑制效果。

酶联免疫吸附试验：采用特异性抗体定量检测细胞裂解液或培养上清中磷酸化蛋白或下游因子的含量。

免疫荧光/组织化学：在细胞或组织原位观察信号分子定位与表达量的变化，评估空间抑制效应。

报告基因检测法：将通路特异性反应元件连接报告基因，通过检测报告基因活性量化通路抑制程度。

激酶活性检测：使用特定底物与ATP，在体外或细胞水平直接测量靶点激酶活性的抑制率。

流式细胞术：利用荧光标记的磷酸化特异性抗体，在单细胞水平快速定量分析信号蛋白的活性状态。

细胞增殖与活力检测：通过MTT、CCK-8等方法间接评估信号抑制对细胞生长和存活的影响。

蛋白质芯片技术：可同时高通量检测多个信号通路中大量蛋白的磷酸化或表达变化。

荧光共振能量转移技术：用于实时监测活细胞内信号分子间相互作用或构象变化，反映抑制剂作用动力学。

质谱磷酸化蛋白质组学：全局性、无偏地鉴定和定量信号抑制前后全蛋白质组的磷酸化修饰变化。

检测仪器设备

酶标仪：用于读取ELISA、细胞活力检测及部分报告基因实验的吸光度或荧光值。

蛋白质印迹系统：包括电泳仪、转膜仪和化学发光成像系统，用于Western Blot分析。

流式细胞仪

流式细胞仪：用于进行基于荧光抗体染色的细胞内信号磷酸化蛋白的高通量单细胞分析。

荧光显微镜/共聚焦显微镜：用于免疫荧光样本的观察与成像，提供亚细胞定位信息。

实时荧光定量PCR仪

实时荧光定量PCR仪：用于检测信号通路下游靶基因的转录水平变化，验证抑制效果。

微孔板读板机（多功能）

微孔板读板机（多功能）：具备光吸收、荧光、发光等多种检测模式，适用于多种生化与细胞检测。

细胞培养系统

细胞培养系统：包括CO2培养箱、生物安全柜等，为试验提供标准化的细胞培养环境。

液相色谱-质谱联用仪

液相色谱-质谱联用仪：用于磷酸化蛋白质组学等深度分析，精确鉴定和定量修饰蛋白。

高内涵成像分析系统

高内涵成像分析系统：可自动对多孔板中的细胞进行快速成像并定量分析多个荧光参数，实现高通量筛选。

激酶活性检测专用仪器

激酶活性检测专用仪器：如基于闪烁亲近测定或迁移率变动分析的专用设备，用于高灵敏度激酶活性分析。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件