抑制位点定位分析

检测项目

蛋白质磷酸化位点抑制分析：鉴定并分析特定激酶活性被抑制后，其下游底物蛋白质磷酸化位点的变化情况。

酶活性中心抑制验证：通过定位抑制剂与酶活性中心的结合位点，验证其竞争性或非竞争性抑制机制。

转录因子DNA结合位点抑制：分析小分子化合物或蛋白如何抑制转录因子与其靶DNA序列的特异性结合。

信号通路关键节点抑制：定位在特定信号转导通路中，抑制剂所作用的精确蛋白节点或修饰位点。

变构抑制位点鉴定：发现并确认远离酶活性中心的变构调节位点被抑制后的构象与功能变化。

受体-配体结合界面抑制：分析抑制剂如何阻断细胞表面受体与其天然配体的相互作用界面。

表观遗传修饰酶抑制位点分析：定位组蛋白甲基化酶、乙酰化酶等表观遗传修饰酶被抑制的具体催化或调节域。

RNA聚合酶抑制位点定位：研究抑制剂作用于RNA聚合酶转录复合体的具体亚基或功能域。

离子通道门控抑制分析：确定药物分子抑制电压门控或配体门控离子通道开放的具体结构域。

蛋白质-蛋白质相互作用界面抑制：鉴定能够破坏特定蛋白复合体形成的小分子所作用的精确接触界面。

检测范围

全基因组CRISPR筛选靶点：在全基因组范围内筛选对特定抑制剂敏感的基因或调控元件。

激酶组底物磷酸化谱：针对整个激酶组或其大部分成员，系统分析抑制剂对其底物磷酸化状态的全局影响。

代谢通路关键酶集合：覆盖某一完整代谢通路中的所有关键酶，进行抑制剂的靶点特异性评估。

细胞表面受体家族：针对某一类细胞表面受体家族（如GPCRs、RTKs），分析抑制剂的结合选择性与范围。

核内转录调控复合体：聚焦于细胞核内参与转录起始与延伸的各类复合体，定位抑制发生的环节。

泛素-蛋白酶体系统组分：涵盖泛素激活酶、结合酶、连接酶及蛋白酶体等全套系统组分的抑制分析。

细胞周期调控蛋白网络：对控制细胞周期进程的核心蛋白网络进行系统的抑制位点扫描。

病原体关键毒力因子：针对细菌或病毒的关键毒力蛋白或复制酶，定位抗菌/抗病毒药物的作用位点。

表观基因组读写擦酶：范围涵盖负责DNA甲基化、组蛋白修饰的“写入”、“擦除”和“读取”蛋白。

细胞凋亡信号通路蛋白：系统分析内源性与外源性凋亡通路中，各关键蛋白的抑制敏感位点。

检测方法

质谱磷酸化蛋白质组学：利用高分辨率质谱技术，大规模鉴定并定量抑制剂处理前后磷酸化肽段的变化。

表面等离子共振技术：实时、无标记地测量抑制剂分子与靶蛋白之间的结合动力学与亲和力。

等温滴定量热法：通过精确测量结合过程的热变化，确定抑制剂结合的化学计量、焓变和熵变。

X射线晶体衍射学：解析抑制剂-靶蛋白复合物的高分辨率三维结构，直接可视化结合位点与模式。

冷冻电子显微镜技术：用于解析难以结晶的大分子复合物与抑制剂结合后的高分辨率结构。

氢氘交换质谱：通过监测蛋白质骨架氢氘交换速率的变化，间接推断抑制剂结合引起的构象动态改变区域。

交联质谱分析：利用化学交联剂捕获蛋白质间或蛋白质内的空间临近信息，分析抑制剂对相互作用的影响。

荧光偏振/共振能量转移：基于荧光信号的变化，检测抑制剂对分子间结合或酶活性的干扰程度。

定点突变与功能回补实验：通过将推测的抑制位点进行突变，验证其对抑制剂敏感性的改变。

分子对接与动力学模拟：利用计算化学方法，在原子水平预测和模拟抑制剂与靶点的结合模式与稳定性。

检测仪器设备

高分辨率液相色谱-串联质谱仪：用于深度磷酸化蛋白质组学等组学分析的核心设备，提供精确的质量数与序列信息。

表面等离子共振仪：专门用于实时生物分子相互作用分析，可自动化完成结合、解离常数测定。

等温滴定量热仪：高灵敏度量热设备，直接测量生物分子结合或反应过程中的热力学参数。

X射线单晶衍射仪：获取原子分辨率蛋白质晶体结构的关键设备，用于精确确定抑制位点坐标。

300kV冷冻透射电子显微镜：用于解析生物大分子复合物近原子分辨率结构的尖端显微成像系统。

氢氘交换自动化平台

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件