蛋白表达水平试验

检测项目

总蛋白定量：测定样品中所有蛋白质的总浓度，是后续特异性分析的基础步骤。

特定目标蛋白定量：针对某一特定蛋白质（如某种激酶或受体）进行精确定量分析。

蛋白质磷酸化水平：检测蛋白质特定氨基酸残基（如丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸）的磷酸化修饰程度。

蛋白质糖基化水平：分析蛋白质上糖链的添加情况，对蛋白质功能与定位至关重要。

蛋白质泛素化水平：检测蛋白质是否被泛素分子标记，通常与蛋白质降解途径相关。

蛋白质乙酰化/甲基化水平：评估表观遗传调控相关的蛋白质翻译后修饰状态。

蛋白质亚细胞定位分析：确定目标蛋白在细胞质、细胞核、线粒体等细胞器中的分布情况。

蛋白质复合物形成分析：研究目标蛋白与其他蛋白相互作用形成复合物的能力与水平。

蛋白质降解速率测定：通过追踪蛋白质丰度随时间的变化，评估其半衰期和稳定性。

蛋白质活性/功能测定：不直接测量蛋白量，而是通过其酶活或结合活性间接反映功能性蛋白水平。

检测范围

基础分子生物学研究：用于研究基因功能、信号通路、细胞周期等基础生命过程。

疾病生物标志物发现与验证：在血清、组织等临床样本中寻找与疾病相关的差异表达蛋白。

药物研发与药效评估：评估药物对靶点蛋白表达或活性的影响，以及脱靶效应。

癌症研究与分型：分析癌组织中致癌或抑癌蛋白的表达水平，用于分子分型与预后判断。

免疫学与炎症研究：检测细胞因子、趋化因子、抗体及免疫检查点蛋白的表达水平。

神经科学：研究神经递质受体、离子通道、突触相关蛋白在神经系统中的表达变化。

干细胞与发育生物学：追踪分化或发育过程中关键调控蛋白的动态表达谱。

微生物学与病毒学：分析病原体蛋白在宿主内的表达，或宿主抗感染相关蛋白的反应。

农业与转基因生物分析：检测转基因作物或动物中外源基因的蛋白表达产物。

法医学与毒理学：在毒物暴露或特定条件下，生物体内特征性蛋白标志物的检测。

检测方法

Western Blot（蛋白质印迹）：通过凝胶电泳分离蛋白，转膜后利用特异性抗体进行检测的半定量/定量方法。

酶联免疫吸附试验（ELISA）：利用抗原-抗体反应和酶标显色，对可溶性蛋白进行高灵敏度定量。

免疫组织化学/免疫荧光（IHC/IF）：在组织切片或细胞爬片上原位检测蛋白表达与定位的常用技术。

流式细胞术：对悬浮细胞或微粒表面的蛋白标志物进行快速、多参数的定量分析。

质谱技术（如LC-MS/MS）：基于质荷比对蛋白质进行鉴定和绝对定量，通量高且无需抗体。

蛋白质芯片：将大量抗体或抗原固定在芯片上，实现高通量的平行蛋白检测。

比色法/荧光法总蛋白测定（如BCA法）：基于生色反应快速测定样品总蛋白浓度。

邻近延伸分析技术（PEA）：利用一对邻近探针和PCR扩增，实现超高灵敏度的蛋白检测。

表面等离子共振（SPR）：实时、无标记地监测生物分子间相互作用，可分析结合动力学与浓度。

简单Western（毛细管电泳免疫分析）：自动化毛细管电泳平台，实现快速、自动化的Western Blot类分析。

检测仪器设备

垂直电泳槽及电源：用于SDS-PAGE凝胶电泳，根据分子量分离蛋白质混合物。

半干/湿式转印仪：将凝胶中分离的蛋白质转移至硝酸纤维素膜或PVDF膜上。

化学发光/荧光成像系统：捕获Western Blot膜上抗体结合后产生的化学发光或荧光信号。

酶标仪：读取ELISA、BCA等96孔板或384孔板中样品的光吸收或荧光强度。

激光共聚焦显微镜：用于高分辨率、三维的免疫荧光图像采集与分析。

流式细胞仪：对单个细胞进行多色荧光分析和分选的强大设备。

液相色谱-串联质谱联用仪（LC-MS/MS）：进行蛋白质组学深度鉴定和定量的核心高端设备。

实时荧光定量PCR仪：在PEA等基于核酸扩增的蛋白检测方法中，用于信号读取与定量。

表面等离子共振仪（SPR）：用于无标记实时分析生物分子相互作用的专用设备。

自动化毛细管电泳系统（如ProteinSimple Jess）：集成分离、免疫检测和数据分析的“简单Western”专用平台。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件