肽相关杂质分析

检测项目

工艺相关杂质：指在肽合成、纯化、储存等生产过程中引入的杂质，如缺失肽、插入肽、错误序列肽等。

产品相关杂质：指肽主链或侧链在生产和储存过程中发生化学变化产生的杂质，如氧化、脱酰胺、二硫键错配等。

缺失序列肽：在固相合成过程中，某个氨基酸未能成功偶联，导致序列中缺少一个或多个氨基酸的杂质。

插入序列肽：在合成过程中，错误地多偶联了一个或多个氨基酸，导致序列增长的杂质。

截短肽：指比目标肽序列短的肽链片段，通常由不完全合成或裂解产生。

延长肽：指比目标肽序列长的肽链片段，通常由过度偶联或未完全封端引起。

二硫键异构体：指含有正确氨基酸序列但二硫键配对方式与目标产物不同的杂质，影响高级结构与活性。

脱酰胺产物：肽链中天冬酰胺或谷氨酰胺残基侧链酰胺基水解，生成天冬氨酸或谷氨酸的杂质。

氧化产物：甲硫氨酸、色氨酸、半胱氨酸等对氧敏感的氨基酸残基发生氧化反应生成的杂质。

二酮哌嗪：肽链N端两个氨基酸环化形成的六元环结构，是常见的降解杂质，尤其在含有脯氨酸的序列中。

检测范围

合成多肽原料药：涵盖固相合成或液相合成的治疗性多肽、诊断用多肽的原料药纯度与杂质谱分析。

多肽制剂：包括注射液、冻干粉针、鼻喷雾剂、透皮制剂等各种剂型中肽的降解杂质与相关物质。

生物技术衍生肽：通过基因工程表达后酶切或化学修饰得到的肽类物质的杂质分析。

肽类中间体：在肽合成工艺过程中产生的关键中间体的纯度监控与杂质鉴定。

肽偶联药物：如抗体偶联药物（ADC）中的毒素肽段、细胞穿透肽等连接部分的杂质分析。

肽类对照品/标准品：用于质量控制的肽类对照物质的标定与杂质定性定量分析。

肽库筛选产物：从组合化学肽库中筛选出的活性先导化合物的初步纯度评估与杂质排查。

化妆品用活性肽：应用于化妆品中的信号肽、载体肽等的安全性与稳定性相关杂质检测。

食品源性生物活性肽：从蛋白质酶解获得的具有特定功能的多肽产品的杂质与副产物分析。

工艺溶剂与试剂残留：合成与纯化过程中使用的有机溶剂、切割试剂、保护基团试剂的残留量检测。

检测方法

反相高效液相色谱法：基于肽的疏水性差异进行分离，是肽纯度分析和杂质筛查最核心、最常用的方法。

离子交换色谱法：基于肽的净电荷差异进行分离，特别适用于分离电荷变体，如脱酰胺产物等。

疏水相互作用色谱法：在高盐浓度下基于肽表面疏水 patches 的差异进行分离，对疏水性相近杂质的分离有优势。

尺寸排阻色谱法

毛细管电泳法：基于肽的电荷-质量比差异进行高效分离，分辨率高，样品消耗少，常用于电荷异构体分析。