肽序列质谱分析

检测项目

肽段分子量测定：精确测定酶解后肽段的质荷比（m/z），是后续鉴定的基础数据。

肽段序列解析：通过分析串联质谱（MS/MS）产生的碎片离子，推导出肽段的氨基酸排列顺序。

蛋白质鉴定：将解析出的肽段序列与蛋白质数据库进行比对，从而鉴定出样品中的蛋白质种类。

翻译后修饰鉴定：检测肽段上发生的磷酸化、糖基化、乙酰化等化学修饰，并定位修饰位点。

蛋白质定量分析：基于肽段离子信号强度或同位素标记，对不同样品中的蛋白质进行相对或绝对定量。

二硫键定位：通过分析非还原条件下的肽段质谱图，确定蛋白质分子内或分子间的二硫键连接方式。

突变与变异分析：检测肽段序列中是否存在氨基酸替换、插入或缺失等点突变或多态性。

蛋白质相互作用位点分析：结合交联质谱技术，鉴定蛋白质-蛋白质相互作用的具体界面区域。

N端/C端测序：通过特定的酶解或化学方法，对蛋白质的末端序列进行确认。

杂质与降解产物分析：鉴定生物制药产品（如多肽类药物）中的工艺相关杂质或降解产物。

检测范围

复杂生物样品：如细胞裂解液、组织匀浆液、血清、血浆等全蛋白质组样本。

重组蛋白与抗体药物：对生物制药过程中表达和纯化的目标蛋白进行序列确认和质控分析。

合成多肽：验证化学合成或固相合成的多肽产物的序列正确性、纯度和修饰状态。

酶解产物分析：对经胰蛋白酶、 Lys-C 等蛋白酶消化后的肽段混合物进行鉴定。

低丰度蛋白检测：通过高灵敏度质谱仪结合预分离技术，检测样本中含量极低的蛋白质。

膜蛋白分析：针对疏水性强的膜蛋白，通过特殊样品处理手段实现其肽段的质谱鉴定。

考古与法医学样本：从古代骨骼、毛发或微量痕迹中提取并鉴定蛋白质，用于物种鉴别或历史研究。

食品与过敏原检测：鉴定食品成分中的蛋白质来源，或检测特定过敏原蛋白的存在。

植物与微生物蛋白质组：应用于农业科学研究及微生物病原体鉴定等领域。

生物标志物发现：通过比较疾病与健康样本的蛋白质组差异，寻找潜在的诊断或预后标志物。

检测方法

液相色谱-串联质谱法：将液相色谱分离与串联质谱联用，是肽段分析最主流的技术平台。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法：常用于肽段质量指纹图谱分析和简单混合物的分子量测定。

数据依赖采集模式：一种自动化的MS/MS采集模式，对强度最高的前体离子依次进行碎裂分析。