流式细胞术分选试验

检测项目

细胞表面抗原分选：基于细胞表面特异性蛋白（如CD分子）的表达，分离目标细胞群体，如CD4+ T淋巴细胞。

细胞内蛋白分选：对固定和破膜后的细胞进行染色，分选表达特定细胞内蛋白（如细胞因子、转录因子）的细胞。

核酸含量分选：根据细胞DNA或RNA的含量进行分选，常用于细胞周期分析中分离不同周期的细胞。

细胞活力分选：利用死活细胞染料区分并分选出活细胞群体，排除死亡细胞对后续实验的干扰。

报告基因表达细胞分选：分选表达荧光蛋白（如GFP、RFP）或其他报告基因的转基因细胞。

稀有细胞分选：从大量背景细胞中高效分离出比例极低的目标细胞，如循环肿瘤细胞（CTCs）。

侧群细胞分选：基于细胞排出荧光染料（如Hoechst 33342）的能力，分选具有干细胞特性的侧群细胞。

细胞增殖分选：利用染料稀释法（如CFSE），分选不同增殖代次的细胞进行功能研究。

磷酸化蛋白分选：通过检测信号通路中关键蛋白的磷酸化状态，分选处于特定激活状态的细胞。

凋亡细胞分选：根据磷脂酰丝氨酸外翻或 caspase 活性等指标，分选处于不同凋亡阶段的细胞。

检测范围

免疫学研究：分离各类免疫细胞亚群，如T细胞、B细胞、NK细胞、树突状细胞及其不同功能亚型。

肿瘤学研究：分选肿瘤干细胞、循环肿瘤细胞、肿瘤浸润淋巴细胞，用于研究肿瘤发生机制和免疫治疗。

干细胞研究：分离和纯化造血干细胞、间充质干细胞、胚胎干细胞及诱导多能干细胞等。

微生物学应用：分选不同种类的细菌、酵母菌或病毒感染后的宿主细胞，用于微生物分类和宿主-病原体相互作用研究。

药物研发与筛选：高通量分选对药物产生特定反应的细胞，用于药效评估和药物靶点发现。

染色体分选：制备特定染色体，用于构建基因组文库、基因定位和比较基因组杂交。

单细胞组学研究：为单细胞测序、单细胞蛋白质组学等提供高纯度的单细胞来源。

植物细胞研究：分选不同倍性的植物细胞、原生质体或特定组织类型的细胞。

海洋生物学研究：用于浮游生物的分类、计数和功能研究。

血液学与输血医学：制备高纯度的血细胞成分，如网织红细胞、血小板或用于移植的CD34+造血干细胞。

检测方法

荧光激活细胞分选法：最主流的方法，基于细胞的荧光和散射光信号，使液滴带电后通过高压偏转板实现物理分离。

电荷式液滴偏转：FACS的核心技术，通过给含有目标细胞的液滴施加电荷，使其在电场中发生偏转落入收集管。

微流控芯片分选法：在芯片通道内利用流体力学、声学或介电力等原理对细胞进行非接触式分选，对细胞损伤小。

磁激活细胞分选辅助法：常作为预富集步骤，先用磁珠粗筛目标细胞，再用流式进行高纯度精细分选。

指数式扩增筛选法：将流式分选与体外培养扩增相结合，用于分离和扩增极其稀少的细胞群体。

多参数逻辑门设门法：通过设置前向散射、侧向散射和多色荧光信号的组合逻辑门，精确圈定目标细胞群体。

单细胞分选模式：将仪器设置为每次只分配一个目标细胞至微孔板或PCR管中，用于单克隆培养或单细胞分析。

高速分选模式：通过提高液流速度和电子处理能力，实现每秒数万个细胞的分选速度，适用于大规模样本。

无菌分选技术：在整个分样系统中保持无菌环境，使分选出的细胞可直接用于培养或体内回输。

低温保护下分选：在低温环境下进行操作，以最大程度保持细胞的活性和功能状态。

检测仪器设备

流式细胞分选仪：核心设备，集成激光激发、光学检测、液滴形成与偏转、样本收集等功能模块。

激光器系统：提供单色或多色激光（如488nm蓝激光、640nm红激光），用于激发不同荧光染料。

光学系统与滤光片组：包括一系列二向色镜和带通滤光片，用于分离和收集特定波长的荧光信号。

流动室与液流系统：核心部件，样本流在鞘液的包裹下形成层流，使细胞单列通过检测点。

荧光检测器：通常是光电倍增管或雪崩光电二极管，将微弱的荧光信号转换为电信号。

散射光检测器：前向散射光检测器检测细胞大小和相对大小，侧向散射光检测器检测细胞的颗粒度和内部复杂度。

液滴形成与充电系统：通过压电晶体振动使液流断裂成均匀液滴，并对含有目标细胞的液滴进行充电。

高压偏转板：产生稳定的静电场，使带电液滴根据所带电荷的正负发生偏转，落入指定的收集管中。

无菌样本收集装置：包括可灭菌的收集管架、微孔板适配器等，用于接收分选后的纯净细胞。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件