免疫亲和色谱实验

检测项目

黄曲霉毒素总量：利用特异性抗体，从复杂样品基质中高效富集和纯化黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2等，为后续定量分析做准备。

赭曲霉毒素A：针对粮食、饲料及葡萄酒中的赭曲霉毒素A进行特异性吸附与纯化，有效去除干扰物质。

玉米赤霉烯酮：特异性捕获谷物及其制品中的玉米赤霉烯酮及其衍生物，提高检测的准确性和灵敏度。

脱氧雪腐镰刀菌烯醇：通过免疫亲和柱选择性吸附小麦、玉米等谷物中的呕吐毒素，实现快速净化。

T-2/HT-2毒素：利用广谱或特异性抗体，同时或分别纯化谷物中的T-2毒素和HT-2毒素。

伏马毒素：对玉米及相关产品中的伏马毒素B1、B2等进行特异性富集，降低基质效应。

食品中维生素：如测定婴幼儿配方食品中的生物素、叶酸等，通过免疫亲和原理实现水溶性维生素的高效分离。

血清特定蛋白：如糖化血红蛋白、C反应蛋白等，用于临床诊断，实现从血液样本中的高选择性分离。

药物残留：如动物源性食品中的氯霉素、磺胺类药物等，通过抗体-抗原反应实现痕量残留物的提取与净化。

环境激素：针对水或土壤样本中的双酚A、雌二醇等环境内分泌干扰物进行特异性吸附与检测前处理。

检测范围

谷物及粮油制品：包括小麦、玉米、大米、花生油等，是真菌毒素检测的主要应用领域。

饲料及原料：涵盖配合饲料、预混料及玉米粕、豆粕等，监控其真菌毒素污染水平，保障动物安全。

酒类与饮料：如果酒、啤酒、果汁等，用于检测赭曲霉毒素A、展青霉素等污染物。

调味品：如酱油、醋、辣椒酱等发酵或易霉变产品中的真菌毒素分析。

乳及乳制品：检测可能存在的黄曲霉毒素M1等代谢产物残留。

肉类与水产：分析动物组织或水产品中的药物残留、生物毒素等。

临床血液样本：用于分离和纯化特定的疾病标志蛋白或激素，辅助临床诊断。

尿液样本：用于药物代谢监测或某些激素水平的检测前处理。

环境水样：包括地表水、地下水及生活污水，富集其中微量的有机污染物。

中药材及保健品：监控其可能存在的真菌毒素污染或非法添加的化学成分。

检测方法

柱预处理：使用适当的缓冲液或纯水对免疫亲和柱进行平衡，确保抗体活性处于最佳结合状态。

样品提取：根据目标物性质，采用水、有机溶剂（如甲醇-水溶液）或缓冲液对固体或液体样品进行均质、振荡或超声提取。

提取液过滤与稀释：将提取液过滤以去除颗粒物，并根据需要用水或缓冲液进行稀释，以降低有机溶剂浓度，避免破坏抗体活性。

过柱吸附：控制流速使样品提取液缓慢通过免疫亲和柱，目标物与柱内抗体发生特异性结合而被捕获。

淋洗除杂：使用水或特定的淋洗缓冲液冲洗柱子，洗去非特异性吸附的杂质，而目标物仍牢固结合在柱上。

目标物洗脱：采用甲醇、乙腈等有机溶剂或低pH缓冲液作为洗脱剂，破坏抗原-抗体结合，将纯净的目标物洗脱下来。

洗脱液收集：用洁净的试管或玻璃瓶定量收集洗脱液，此液体即为经过高度净化的待测样品。

洗脱液浓缩/复溶：根据需要，对洗脱液进行氮吹浓缩或温和挥干后，用合适的溶剂重新溶解，以便进样分析。

仪器联用分析：将最终净化液通过高效液相色谱、液相色谱-质谱联用仪或荧光检测器等进行分析和定量。

柱子再生与保存：部分免疫亲和柱可在特定条件下进行再生和重复使用，使用后需按说明书要求妥善保存。

检测仪器设备

免疫亲和色谱柱：核心部件，内填固定有特异性抗体的凝胶介质，是实现选择性吸附的关键。

高效液相色谱仪：与IAC联用的主要分析设备，用于对纯化后的目标物进行分离和定量。

液相色谱-质谱联用仪：提供更高的选择性和灵敏度，用于复杂基质中多种目标物的确证和准确定量。

荧光检测器：常用于具有天然荧光或衍生后产生荧光的毒素（如黄曲霉毒素）的检测，灵敏度高。

紫外-可见光检测器：用于检测具有紫外吸收的目标化合物，是HPLC的通用型检测器。

固相萃取装置：提供可控的负压或正压，用于控制样品液通过免疫亲和柱的流速，实现自动化或半自动化操作。

高速匀质器或粉碎机：用于固体样品的粉碎和均质化，确保提取的代表性和效率。

振荡器或涡旋混合器：用于液体样品的充分混合或加速提取过程中的传质。

氮吹仪：用于温和地吹干洗脱液中的有机溶剂，实现对目标物的浓缩。

精密移液器与天平：用于试剂的精确量取和样品的准确称量，是保证实验重现性的基础设备。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件