肽序列质谱解析

检测项目

肽段分子量测定：精确测定酶解后肽段的质荷比（m/z），是后续序列解析的基础数据。

肽段碎片离子分析：对碰撞诱导解离产生的b/y离子等碎片进行鉴定，用于推导氨基酸序列。

从头测序：在不依赖数据库的情况下，直接根据质谱碎片图谱推导出未知肽段的完整氨基酸序列。

数据库搜索鉴定：将实验质谱数据与蛋白质序列数据库进行比对，鉴定已知的肽段与蛋白质。

翻译后修饰鉴定：检测并定位肽段上的磷酸化、糖基化、乙酰化等化学修饰位点与类型。

二硫键定位：通过分析非还原条件下的质谱数据，确定蛋白质分子内或分子间二硫键的连接位置。

突变与变异分析：识别肽段序列中存在的单氨基酸变异或多态性，用于疾病研究或物种鉴定。

定量分析：基于质谱信号强度，对肽段及对应蛋白质进行相对或绝对定量，比较不同样品间的差异。

蛋白复合物解析：通过交联质谱技术，解析蛋白质-蛋白质相互作用界面及复合物的空间结构信息。

杂质与降解产物分析：鉴定生物制药产品（如多肽药物）中的工艺相关杂质或储存过程中的降解片段。

检测范围

简单蛋白酶解产物：适用于经胰蛋白酶等特异性酶切后产生的简单肽段混合物分析。

复杂生物样本：可处理细胞、组织、血清等全蛋白提取物酶解后的高度复杂肽段混合物。

重组与合成多肽：对基因工程表达或化学合成的多肽药物及候选分子进行序列确证与纯度检查。

低丰度肽段：通过高灵敏度设备结合富集手段，检测样本中含量极低的靶标肽段。

翻译后修饰肽段：专门针对带有各种化学修饰的肽段进行富集与解析，揭示其功能调控机制。

交联肽段：适用于经化学交联剂处理后的肽段，用于研究蛋白质高级结构或相互作用网络。

N端/C端肽段：通过特定方法富集或标记蛋白质N端或C端肽段，用于蛋白质组末端分析。

亚化学计量样品：可对皮摩尔乃至飞摩尔级别的微量样品进行序列解析，满足痕量分析需求。

多物种混合样本：能够解析来自不同生物物种（如微生物群落）的混合蛋白质组样本。

非典型酶切肽段：除了常规酶切，也适用于化学裂解或非特异性酶切产生的肽段分析。

检测方法

液相色谱-串联质谱法：将液相色谱分离与串联质谱联用，是肽序列解析最核心的高通量技术平台。

基质辅助激光解吸电离-串联飞行时间质谱法：利用MALDI源产生离子，TOF/TOF分析器进行串联质谱分析，常用于肽质量指纹图谱和测序。

电子转移解离/高能碰撞解离法：ETD和HCD是两种互补的碎片化技术，能提供更完整的碎片离子信息，尤其利于修饰分析。

数据依赖性采集法：DDA是主流采集模式，自动选择强度最高的前体离子进行碎裂，适用于未知样本的发现研究。