体外药效学实验

检测项目

细胞增殖抑制实验：评估药物对特定肿瘤细胞或正常细胞增殖能力的影响，是抗肿瘤药物筛选的基础。

细胞毒性实验：检测药物对细胞的直接杀伤或损伤作用，常用MTT、CCK-8等方法进行定量分析。

细胞凋亡检测：通过Annexin V/PI染色、Caspase活性测定等方法，分析药物诱导程序性细胞死亡的能力。

细胞周期分析：利用流式细胞术检测药物处理后细胞在各周期（G0/G1， S， G2/M）的分布变化。

酶活性抑制实验：在无细胞体系中，直接测定药物对靶酶（如激酶、蛋白酶）活性的抑制程度。

受体结合实验：通过竞争结合或饱和结合实验，测定药物与特定靶点受体（如GPCR）的亲和力（Ki/IC50）。

抗菌活性测定（MIC/MBC）：测定药物抑制细菌生长的最低浓度（MIC）和杀灭细菌的最低浓度（MBC）。

抗病毒活性测定：评估药物抑制病毒复制、感染或进入细胞的能力，常计算半数有效浓度（EC50）。

细胞迁移与侵袭实验：通过Transwell小室等模型，研究药物对肿瘤细胞迁移和侵袭能力的抑制作用。

报告基因实验：利用构建的报告基因载体，检测药物对特定信号通路（如Wnt， NF-κB）的激活或抑制效应。

检测范围

小分子化学药物：包括新化学实体、仿制药及已知药物的新适应症，评估其体外生物活性与作用机制。

生物大分子药物：涵盖抗体、重组蛋白、多肽、核酸药物等，检测其与靶点的结合及功能调节活性。

天然产物与中药提取物：筛选具有潜在药理活性的植物、微生物或海洋来源的化合物或混合物。

抗肿瘤药物：针对各类实体瘤和血液瘤细胞系，进行增殖抑制、凋亡诱导等多维度药效评价。

抗感染药物：针对细菌、真菌、病毒及寄生虫等病原体，在体外水平评价其抑制或杀灭效果。

心血管系统药物：利用心肌细胞、血管内皮细胞等模型，研究药物对离子通道、收缩功能等的影响。

神经系统药物：采用神经元细胞、胶质细胞等模型，评价药物在神经保护、递质调节等方面的作用。

免疫调节剂：在免疫细胞（如T细胞、巨噬细胞）模型中，评估药物对免疫应答的增强或抑制作用。

代谢性疾病药物：使用肝细胞、脂肪细胞、肌细胞等模型，研究药物对糖、脂代谢的调控作用。

联合用药评价：研究两种或多种药物联合使用时的协同、相加或拮抗效应，为临床方案提供依据。

检测方法

MTT比色法：通过检测线粒体琥珀酸脱氢酶还原MTT形成的甲瓒量，间接反映活细胞数量和活性。

CCK-8法：基于水溶性四唑盐被细胞内脱氢酶还原生成橙色甲瓒染料，灵敏度高且操作简便。

流式细胞术：用于快速、多参数分析细胞凋亡、周期、表面标志物表达及细胞内钙离子浓度等。

荧光素酶报告基因检测：将靶基因启动子与荧光素酶基因相连，通过检测发光强度反映通路活性。

酶联免疫吸附试验（ELISA）：定量检测细胞培养上清或裂解液中的特定细胞因子、磷酸化蛋白等靶标分子。

Western Blotting：通过电泳分离和特异性抗体识别，检测特定靶蛋白的表达水平及翻译后修饰状态。

实时荧光定量PCR（qPCR）：定量分析药物处理后特定基因mRNA表达水平的变化，从转录水平评估药效。

高内涵成像分析（HCA）：自动化荧光显微成像结合图像分析，在单细胞水平获取多参数形态与功能信息。

放射配体结合实验：使用放射性标记的配体，精确测定药物与受体结合的亲和力与特异性。

微量热泳动（MST）技术：基于分子在温度梯度场中的运动变化，无标记地直接测量分子间的结合亲和力。

检测仪器设备

酶标仪（微孔板阅读器）：用于读取96或384孔板的光吸收（OD值）、荧光或化学发光信号，是基础检测核心设备。

流式细胞仪：能够对悬浮细胞进行快速、多参数分析，是细胞表型、功能及周期检测的关键设备。

倒置荧光显微镜：用于观察活细胞或固定细胞的形态、荧光标记定位及进行基本的成像分析。

高内涵成像分析系统：集成自动化显微镜、荧光模块和高级图像分析软件，实现高通量细胞水平多参数筛选。

实时荧光定量PCR仪：用于精确、灵敏地定量基因表达变化，评估药物对转录水平的调控作用。

蛋白印迹系统：包括电泳仪、转膜仪和化学发光成像仪，用于蛋白质表达与修饰的定性和半定量分析。

液相色谱-质谱联用仪（LC-MS/MS）：用于复杂样品中药物及其代谢产物的定性与定量分析，以及靶点鉴定。

等温滴定量热仪（ITC）：通过精确测量结合过程的热变化，直接测定生物分子相互作用的结合常数、焓变和熵变。

表面等离子共振仪（SPR）：实时、无标记地监测生物分子间的相互作用动力学，提供结合速率和解离速率常数。

自动化液体处理工作站：实现加药、稀释、分液等步骤的自动化与标准化，提高实验通量和重复性，减少人为误差。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件