超分辨成像验证

检测项目

分辨率标定：使用已知尺寸的标准样品（如荧光微球、光栅）定量测定成像系统的极限分辨率。

定位精度分析：评估系统对单个荧光分子或纳米结构中心位置的确定精度，通常以纳米级标准差表示。

图像均匀性评估：检测视场内不同区域成像分辨率与信噪比的一致性，识别边缘与中心的性能差异。

串扰与通道配准验证：在多色成像中，检测不同荧光通道之间的信号串扰程度并进行精确的空间对准。

三维分辨率验证：测量系统在轴向（Z方向）的分辨率，评估其三维超分辨成像能力。

时间分辨率与动态追踪能力：验证系统在活细胞成像中捕捉快速动态过程的能力，评估时间分辨率。

光毒性与光漂白效应评估：量化成像光照对样品活性与荧光信号稳定性的影响，评估技术适用性。

重建算法可靠性验证：通过模拟数据或已知结构，检验超分辨重建算法结果的准确性与抗噪性。

长期稳定性测试：监测系统在长时间连续工作状态下，关键性能参数（如分辨率、漂移）的稳定性。

样品适应性验证：测试系统对不同类型生物样品（固定细胞、活细胞、组织切片）的成像效果与兼容性。

检测范围

空间分辨率范围：覆盖从传统衍射极限（~250 nm）至数十纳米的超分辨尺度。

样品厚度范围：涵盖薄样品（单层细胞）至较厚样品（如组织切片或小型模式生物）。

荧光波长范围：覆盖常用荧光探针的激发与发射光谱，如蓝色、绿色、红色及远红外波段。

时间尺度范围：从毫秒级的快速事件到数小时甚至数天的长期生命过程观测。

定位精度范围：通常在1纳米至20纳米之间，取决于具体成像模式与信噪比。

视场范围：从单个细胞的局部区域到数百微米的大视野拼接成像。

荧光分子密度范围：验证从稀疏标记到高密度标记条件下算法的处理能力。

环境条件范围：包括常温、37℃恒温、以及CO2控制等活细胞培养环境。

样品物理状态：包括固定样品、活体样品、以及经过特殊处理的（如透化、膨胀）样品。

多模态关联范围：与电子显微镜、原子力显微镜等其他技术进行关联成像的匹配验证。

检测方法

荧光微球尺寸分析法：使用亚衍射极限尺寸的荧光微球成像，通过点扩散函数拟合测量实际分辨率。

傅里叶环相关法：对同一结构的两幅独立重建图像进行傅里叶环相关计算，定量得出分辨率值。

单分子定位重复性法：对同一荧光分子进行多次定位，以其位置分布的标准差评估定位精度。

双色标定样品共定位法：使用已知距离的双色标记结构（如DNA折纸）验证多色成像的通道配准精度。

漂移校正与稳定性测量法：通过嵌入的 fiduciary markers 或图像相关法，测量并校正系统在成像期间的漂移。

模拟数据对比法：使用已知结构的计算机模拟图像，加入噪声后经算法重建，对比原始结构以验证算法。

信噪比与对比度定量法：在图像中选取目标与背景区域，计算其信号强度比值，评估图像质量。

活细胞成像活性评估法：通过细胞形态、运动或特定功能指标，评估成像过程对细胞活性的影响。

三维点扩散函数测量法：使用亚分辨率的荧光微球进行Z轴扫描，获取并拟合三维PSF以确定轴向分辨率。

标准生物结构验证法：使用具有明确纳米结构的细胞器（如核孔复合体、微管）作为“标尺”进行功能验证。

检测仪器设备

超分辨显微镜主机：如STED、SIM、PALM/STORM等类型的商用或自主研发的超分辨成像系统。

高精度纳米位移台：用于样品三维扫描、漂移补偿以及大视野拼接的压电陶瓷或步进电机位移台。

高灵敏度探测器：如电子倍增电荷耦合器件（EMCCD）或科学级互补金属氧化物半导体（sCMOS）相机。

高稳定激光光源系统：提供多波长、高强度且功率稳定的激发光，特别是STED所需的环形损耗光。

活细胞培养与环境控制系统

TIRF照明模块

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件