肿瘤富集效率分析

检测项目

循环肿瘤细胞富集效率：评估从外周血中分离并计数循环肿瘤细胞的回收率与纯度，是液体活检的关键质控指标。

循环肿瘤DNA富集效率：衡量从血浆或血清中提取并纯化循环肿瘤DNA的得率，确保下游低频突变检测的灵敏度。

外泌体富集效率：评价从体液样本中分离肿瘤源性外泌体的能力，包括颗粒浓度与特异性标志物阳性率。

肿瘤组织细胞悬液制备效率：检测从实体瘤组织中解离获得活体单细胞的得率与活性，用于单细胞测序等分析。

稀有突变等位基因频率提升率：通过富集前后对比，计算目标突变等位基因频率的提升倍数，反映富集方法对信号放大的效能。

背景野生型DNA清除率：评估富集过程对非目标野生型DNA的去除能力，直接影响检测的信噪比。

细胞完整性保持率：评价富集后循环肿瘤细胞或组织细胞的形态完整性与生物活性是否得以维持。

核酸片段大小分布：分析富集后的循环肿瘤DNA或RNA的片段长度分布特征，验证其是否符合肿瘤源性核酸的典型模式。

蛋白质标志物回收率：针对基于表面标志物（如EpCAM）的富集方法，评估目标蛋白及其所标记细胞的回收效能。

样本间交叉污染率：通过设立阴性对照，检测富集处理过程中不同样本间发生交叉污染的程度，确保结果特异性。

检测范围

外周血样本：包括全血、血浆、血清，是循环肿瘤细胞、循环肿瘤DNA和外泌体富集分析最主要的样本来源。

骨髓穿刺液：用于富集播散至骨髓的肿瘤细胞，对血液系统肿瘤及实体瘤骨髓转移的诊断和监测至关重要。

胸腔积液与腹水：处理这些体腔积液，富集其中的游离肿瘤细胞和核酸，用于晚期癌症患者的诊断与基因分型。

新鲜或冷冻组织标本：对手术或活检获取的实体瘤组织进行解离，富集高纯度的肿瘤细胞群用于后续分析。

尿液样本：适用于泌尿系统肿瘤（如膀胱癌、前列腺癌）的无创检测，富集尿液中的脱落肿瘤细胞或DNA。

脑脊液：用于中枢神经系统肿瘤或脑膜转移癌的检测，富集其中的稀有肿瘤细胞或核酸。

细针穿刺抽吸物：对甲状腺、乳腺等器官的穿刺物进行富集处理，提高其中少量肿瘤细胞的检出率。

石蜡包埋组织切片：通过显微切割等技术从福尔马林固定石蜡包埋组织中富集特定区域的肿瘤细胞。

唾液与其他体液：探索性应用于头颈部肿瘤等的研究，富集其中可能存在的肿瘤源性生物标志物。

细胞培养上清液：在基础研究中，用于评估肿瘤细胞系释放的外泌体或游离核酸的富集方法效能。

检测方法

免疫磁珠分选法：利用包被特异性抗体（如抗EpCAM）的磁珠捕获目标细胞，通过磁场进行分离，是CTC富集的经典方法。

微流控芯片技术：基于尺寸差异、流体动力学或表面抗体修饰，在微通道内高效捕获CTC等稀有细胞，自动化程度高。

密度梯度离心法：利用不同细胞组分的密度差异进行分离，常用于初步去除血液中的红细胞和粒细胞。

膜过滤法：依据细胞大小，使用特定孔径的滤膜截留较大的CTC，而让血细胞通过，操作相对简单快速。

差速离心法：通过不同转速和时间的离心组合，逐步分离外泌体、细胞碎片等不同组分。

聚合物沉淀法：使用聚乙二醇等试剂使外泌体或大分子复合物共沉淀，实现从体液中批量富集。

数字PCR定量法：通过绝对定量富集前后样本中特定突变或标志物的拷贝数，精确计算富集效率与等位基因频率变化。

下一代测序法：对富集前后的样本进行高通量测序，通过生物信息学分析全面评估基因组覆盖度、突变谱变化及背景噪音降低情况。

流式细胞术分析：对富集产物进行多色荧光标记和上机分析，直接计数目标细胞并评估其纯度与活性。

免疫荧光染色与显微镜计数：作为金标准方法之一，通过CK+/CD45-/DAPI+等标志物对富集到的CTC进行鉴定和手动/自动计数。

检测仪器设备

流式细胞分选仪：能够基于多参数荧光和物理特性，对细胞进行高速分析和高纯度分选，用于验证和纯化富集产物。

微流控芯片系统：集成有特定设计的捕获芯片、精密流体控制泵和收集模块的完整平台，用于自动化CTC或外泌体富集。

磁力分选架/分选器：与免疫磁珠配套使用，提供强磁场以实现磁珠标记细胞与未标记细胞的快速分离。

超速离心机：配备特定转子，能提供高达10万倍重力以上的离心力，是外泌体、病毒等纳米颗粒分离的金标准设备。

数字PCR仪：用于对富集前后的痕量核酸进行绝对定量分析，灵敏度极高，是评估ctDNA富集效率的关键设备。

下一代测序仪：通过对富集样本进行全基因组、全外显子组或靶向测序，从全局角度评估富集方法的效能与偏向性。

倒置荧光显微镜及自动扫描系统：用于对过滤膜或芯片上捕获的细胞进行免疫荧光染色后的观察、拍照和自动扫描计数。

生物分析仪/片段分析仪：基于微流控芯片电泳技术，快速、精确地分析核酸的浓度、完整性及片段大小分布。

纳米颗粒跟踪分析仪：通过激光散射和颗粒追踪技术，对外泌体等纳米颗粒进行粒径分布和浓度测定，评估富集效果。

实时荧光定量PCR仪：通过相对或绝对定量的方式，快速检测富集前后特定基因标志物的含量变化，初步评估效率。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件