哺乳动物代谢途径研究

检测项目

葡萄糖代谢物：检测血液和组织中的葡萄糖、丙酮酸、乳酸等，评估糖酵解、糖异生和三羧酸循环的入口状态。

脂质代谢物：分析游离脂肪酸、甘油三酯、胆固醇及其酯化物，揭示脂质合成、分解与转运的动态平衡。

氨基酸谱：全面定量血浆或组织中的必需与非必需氨基酸，反映蛋白质周转和特定代谢途径的活性。

三羧酸循环中间物：检测柠檬酸、α-酮戊二酸、琥珀酸等，直接反映细胞能量代谢的核心循环效率。

酮体：测定β-羟丁酸、乙酰乙酸和丙酮，是评估肝脏脂肪酸氧化和全身能量供应状态的关键指标。

核苷酸及其代谢物：分析ATP、ADP、AMP、NAD(P)H等，指示细胞的能量电荷和氧化还原电位。

胆汁酸谱：鉴定多种初级和次级胆汁酸，用于研究肝脏功能、肠道菌群互作及脂质消化吸收。

激素水平：检测胰岛素、胰高血糖素、瘦素、脂联素等，从系统层面理解代谢的神经内分泌调控。

氧化应激标志物：测量谷胱甘肽（氧化型与还原型）、MDA、8-OHdG等，评估代谢过程中产生的活性氧及其造成的损伤。

尿素循环中间物：分析鸟氨酸、瓜氨酸、精氨酸等，监测氨解毒能力和蛋白质分解代谢的终末途径。

检测范围

血清/血浆：最常用的生物样本，反映生物体系统性的、动态变化的代谢状态。

全血：用于分析与血细胞相关的代谢，如糖酵解中间物或谷胱甘肽代谢。

肝脏组织：哺乳动物的代谢中枢，是研究糖异生、脂肪酸氧化、酮体生成和胆汁酸合成等核心途径的关键组织。

脂肪组织（白色与棕色）：研究脂质储存、脂解作用、脂肪因子分泌及产热代谢的重要对象。

骨骼肌组织：体内最大的葡萄糖处置器官，用于研究胰岛素敏感性、糖原代谢和支链氨基酸代谢。

脑组织及特定脑区：探索中枢神经系统对摄食、能量平衡的调控，以及脑内特有的能量代谢模式。

肠道组织与内容物：结合肠道菌群分析，研究宿主-微生物共代谢，如短链脂肪酸、胆汁酸和色氨酸代谢。

肾脏组织：研究糖异生、酸碱平衡调节、水盐代谢以及某些激素降解的重要场所。

细胞系与原代细胞：在可控条件下，用于特定代谢途径的机制研究，如肝细胞、脂肪细胞或肌管细胞模型。

实验动物模型（小鼠、大鼠等）：包括野生型、基因敲除/过表达、疾病模型（如肥胖、糖尿病）动物，是体内代谢研究的基石。

检测方法

液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）：高灵敏度、高特异性的靶向定量方法，广泛应用于各类小分子代谢物的绝对定量分析。

气相色谱-质谱联用（GC-MS）：适用于挥发性或经衍生化后具有挥发性的代谢物，如有机酸、脂肪酸和糖类，常用于代谢组学筛查。

核磁共振波谱（NMR）：非破坏性、高重复性的方法，能提供代谢物的结构信息，用于无偏向的代谢指纹图谱分析。

酶联免疫吸附测定（ELISA）：基于抗原-抗体反应，特异性检测血液或组织裂解液中的蛋白质类激素或细胞因子。

生化比色/荧光法：利用特定酶促反应或化学显色反应，在酶标仪或分光光度计上对单一代谢物（如葡萄糖、甘油三酯）进行快速批量检测。

稳定同位素示踪技术：使用13C、15N或2H标记的底物，通过MS或NMR追踪其在代谢网络中的流向与转化速率，研究代谢通量。

免疫组织化学/荧光染色：在组织切片上定位特定代谢相关蛋白（如GLUT4、CPT1A）的表达与分布，实现形态与功能的结合分析。

实时荧光定量PCR（qPCR）：检测代谢关键酶、转运蛋白或调控因子的mRNA表达水平，从转录层面揭示代谢调控。

蛋白质印迹法（Western Blot）：测定代谢途径中关键蛋白的表达量及其翻译后修饰（如磷酸化）状态。

Seahorse细胞能量代谢分析：实时监测活细胞的耗氧率（OCR）和细胞外酸化率（ECAR），直接评估线粒体呼吸和糖酵解功能。

检测仪器设备

三重四极杆液质联用仪（LC-MS/MS）：进行靶向代谢组学分析的黄金标准设备，具备极高的灵敏度和定量准确性。

高分辨质谱仪（如Q-TOF, Orbitrap）：用于非靶向代谢组学发现研究，能精确测定代谢物的分子量，进行未知物鉴定。

气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）：配备电子轰击离子源，拥有强大的标准谱库，适用于挥发性代谢物的定性与定量分析。

核磁共振波谱仪（NMR）：通常为400 MHz及以上场强，用于生物流液或组织提取物的1H-NMR或13C-NMR分析。

全自动生化分析仪：集成化平台，可高速、自动化地完成数十项常规血液生化指标（如血脂四项、肝肾功能）的检测。

多功能酶标仪：具备吸光度、荧光和化学发光检测模式，用于微孔板形式的各类生化与细胞学检测。

Seahorse XF分析仪：专门用于实时测量活细胞能量代谢的表型，是研究细胞代谢功能的特色工具。

超高效液相色谱仪（UPLC/HPLC）：作为质谱的前端分离系统，其高压和高柱效为复杂生物样本的分离提供了保障。

低温组织研磨仪：在低温下快速破碎各种生物组织（如肝脏、肌肉），保持代谢物稳定性，用于样本前处理。

活体代谢监测系统（CLAMS）：整合了间接测热法的小动物监测系统，可长时间连续测量动物的耗氧量、二氧化碳产生量、摄食和活动等，全面评估整体能量代谢。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件