双向电泳分离

检测项目

样品前处理与溶解：对生物样品进行裂解、还原和烷基化处理，确保蛋白质充分溶解并保持其天然电荷状态，为后续等电聚焦奠定基础。

固相pH梯度胶条选择与平衡：根据目标蛋白质的等电点范围选择合适的IPG胶条，并进行充分的平衡处理，使蛋白质与SDS充分结合。

第一向等电聚焦：在高压电场下依据蛋白质等电点差异进行分离，精确控制聚焦时间、电压梯度及温度条件，确保pH梯度的线性与稳定。

第二向SDS-PAGE：将经过等电聚焦的胶条转移至聚丙烯酰胺凝胶上，根据蛋白质分子量大小进行垂直方向的二次分离。

凝胶染色与显影：采用考马斯亮蓝、银染或荧光染料对分离后的蛋白质点进行染色，评估染色方法的灵敏度与线性范围。

凝胶图像采集与分析：使用高分辨率扫描仪或成像系统获取凝胶数字图像，并进行斑点检测、背景扣除和归一化处理。

蛋白质斑点切取与酶解：从凝胶中精确切取目标蛋白质斑点，进行脱色、还原烷基化和胰蛋白酶酶解，制备肽段混合物。

质谱鉴定分析：将酶解肽段通过质谱仪进行分析，获取肽段质量指纹图谱或串联质谱数据，用于蛋白质鉴定。

Western Blot验证：利用特异性抗体对双向电泳分离后的蛋白质进行免疫印迹验证，确认目标蛋白的身份与表达水平。

差异表达蛋白分析：通过软件比对不同样品间的双向电泳图谱，识别表达量存在显著差异的蛋白质斑点。

检测范围

细胞全蛋白提取物: 适用于动植物细胞、微生物细胞裂解液中数千种蛋白质的同步分离与展示，用于蛋白质组学研究。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件