RNA共提取物干扰实验

检测项目

基因组DNA残留量测定：通过荧光定量PCR或琼脂糖凝胶电泳分析RNA提取物中残留的基因组DNA含量，评估其对逆转录及qPCR反应的抑制程度。

多糖类物质浓度检测：采用紫外分光光度法或酶标仪比色法测定RNA样品中多糖的污染水平，高浓度多糖会严重影响核酸溶解度和酶促反应效率。

蛋白质污染定量分析：使用BCA法或Bradford法检测共提取物中蛋白质残留量，过量蛋白质会干扰吸光度测量并抑制后续分子操作。

多酚类化合物干扰评估：利用福林酚试剂法或高效液相色谱测定植物样本来源RNA中多酚含量，多酚易氧化并导致核酸降解。

无机盐离子浓度检测：通过电导率仪或离子色谱仪分析RNA溶液中钾、钠、氯等离子浓度，高盐环境会破坏核酸二级结构并影响酶活性。

有机溶剂残留测定：采用气相色谱法检测苯酚、氯仿等提取试剂在RNA中的残留量，残余溶剂可能对细胞实验产生毒性效应。

核糖核酸酶活性检测：使用荧光底物降解实验或凝胶扩散法评估提取过程中RNase的污染情况，确保RNA完整性不受降解威胁。

A260/A280吸光度比值分析：通过紫外分光光度计测量RNA样品在260nm和280nm处的吸光度比值，判断蛋白质或酚类物质的污染程度。

A260/A230吸光度比值测定：分析230nm处吸光度值与260nm的比值，用于识别碳水化合物、盐类或有机溶剂的干扰状况。

RNA完整性数值计算：利用微流控芯片电泳系统获取RNA完整性数值，评估共提取物是否导致RNA降解或片段化。

内源性抑制剂筛查：通过添加外标RNA并进行逆转录效率测试，系统性筛查样本中未知内源性抑制剂的干扰强度。

检测范围

动物组织样本：包括肝脏、脑组织、肌肉等新鲜或冷冻标本，其高脂质和胶原蛋白含量易在RNA提取过程中形成共沉淀干扰。

植物叶片与根系: 富含多糖、多酚及次生代谢物的植物材料，需特殊缓冲液体系防止色素和鞣酸对RNA纯度的负面影响。

血液与血清样品: 血红蛋白、免疫球蛋白等血源性成分可能吸附核酸或抑制酶反应，需优化裂解条件降低干扰。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件