信使RNA降解产物分析

检测项目

RNA完整性指数测定：通过微流控芯片电泳技术分离RNA分子，计算28S/18S核糖体RNA峰面积比值，评估RNA样本的整体降解程度。

降解片段长度分布分析：利用高分辨率凝胶电泳或生物分析仪，分离不同大小的RNA片段，确定主要降解产物的分子量范围及其丰度比例。

5‘-羟基末端鉴定：采用酶学标记或化学修饰方法，特异性检测因核酸内切酶切割产生的带有5’-羟基末端的RNA片段。

3‘-磷酸末端鉴定：通过特异性连接酶或磷酸化酶处理，识别并定量因核酸内切酶或物理剪切产生的带有3’-磷酸末端的降解产物。

寡核苷酸含量测定：使用高效液相色谱或质谱技术，精确测量长度小于50个核苷酸的短链RNA片段的浓度和组成。

poly(A)尾长度分析：通过特异性引物延伸或测序方法，检测信使RNA分子3‘端poly(A)尾的完整性及是否存在非正常缩短现象。

氧化碱基产物检测：利用液相色谱-质谱联用技术，定量分析8-氧代鸟嘌呤等氧化损伤碱基在降解RNA中的含量。

脱酰胺化位点分析：通过高精度质谱或酶切指纹图谱，鉴定信使RNA序列中天冬酰胺和谷氨酰胺残基发生的脱酰胺化修饰。

双链断裂点定位：结合逆转录和PCR扩增技术，对信使RNA分子中的断裂位点进行精确定位，判断降解热点区域。

残留核酸酶活性检测: 使用荧光标记的RNA底物与待测样本共孵育，通过荧光强度变化评估样本中可能含有的残留RNase活性。

检测范围

体外转录信使RNA: 对通过体外转录系统合成的信使RNA原料进行稳定性评估，确保其符合后续应用的质量要求。

mRNA疫苗制剂: 分析疫苗成品中有效成分的完整性，监控储存和运输过程中可能发生的降解情况。

细胞总RNA提取物: 评估从各种哺乳动物细胞、植物细胞或微生物中提取的总RNA样本的质量状态。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件