药物-蛋白结合率测试

检测项目

平衡透析法：该方法利用半透膜分离游离药物与蛋白结合药物，在恒温条件下达到平衡后测定膜两侧药物浓度。其操作相对简单，是评估药物蛋白结合率的经典技术。

超滤离心法：通过离心力驱使游离药物通过超滤膜，从而快速分离结合型与游离型药物。该方法适用于高结合率药物的测定，样品处理通量较高。

超速离心法：利用高速离心产生的强大离心力使蛋白沉降，进而分离游离药物。此法无需使用膜材料，可避免膜吸附引起的误差。

光谱分析法：基于药物与蛋白结合前后光谱特性（如荧光、紫外吸收）的变化进行测定。该方法可用于研究结合动力学和结合位点。

色谱分析法：通常采用高效液相色谱或亲和色谱技术分离并定量游离药物。该方法分离效率高，专属性强。

毛细管电泳法：利用电场作用下游离药物与蛋白-药物复合物在毛细管中迁移速率的不同进行分离分析。该方法所需样品量少，分析速度快。

表面等离子体共振技术：通过检测生物分子相互作用引起的折射率变化实时监测结合过程。该技术可提供结合动力学常数信息。

等温滴定量热法：直接测量药物与蛋白结合过程中释放或吸收的热量。该方法可同时获得结合常数、焓变和熵变等热力学参数。

圆二色谱法：通过测定蛋白质构象在药物结合前后的变化来间接评估结合情况。该方法对蛋白质二级结构的变化敏感。

核磁共振波谱法：利用核磁共振技术研究药物小分子与蛋白质大分子之间的相互作用。该方法可提供原子水平的分辨率信息。

检测范围

小分子化学药物：涵盖各类合成或半合成的低分子量化合物，评估其与血浆白蛋白、α-酸性糖蛋白等蛋白的结合特性。

生物技术药物：包括多肽、抗体、重组蛋白等大分子药物，研究其与血液中各种蛋白成分可能存在的相互作用。

中药及天然产物：针对植物提取物、活性天然单体等成分，分析其有效成分与血浆蛋白的结合行为及对药效的影响。

候选化合物筛选：在药物发现早期阶段，对大量化合物库进行高通量蛋白结合率筛选，为构效关系研究提供数据。

血浆样品：主要使用人源血浆，也可根据研究需求采用大鼠、犬、猴等实验动物的血浆进行体外结合试验。

重组人血清白蛋白：作为常用的模型蛋白，用于初步评估药物的蛋白结合特性，简化复杂血浆体系的影响。

特定血浆蛋白：针对性地研究药物与人血清白蛋白、α1-酸性糖蛋白、脂蛋白等单一纯化蛋白的结合情况。

治疗性抗体：评估单克隆抗体、双特异性抗体等与靶点抗原以外的血浆蛋白的非特异性结合潜力。

核酸类药物：如反义寡核苷酸、小干扰RNA等，研究其在血液中与蛋白结合对其稳定性、递送和活性的影响。

药物代谢产物：检测原形药物在体内代谢后产生的活性或非活性代谢物与血浆蛋白的结合能力。

检测标准

GB/T 37867-2019 药品蛋白质含量测定法

GB/T 34798-2017 医药制剂中蛋白质类成分的测定

ISO 10993-22 医疗器械生物学评价 第22部分：纳米材料指南

ICH S9 抗肿瘤药物的非临床评价

ICH M3(R2) 药物进行人体临床试验和上市的非临床安全性研究

USP 〈1084〉 药品质量标准的制定

FDA 工业指南：药物相互作用研究

EMA 指南：药代动力学和药效学研究中生物分析方法验证

中国药典 2020年版 相关通则

OECD 化学品测试指南 No. 428 皮肤吸收体外测定法

检测仪器

高效液相色谱仪：该系统利用高压输送流动相，通过色谱柱分离样品中的不同组分。在药物蛋白结合率测试中，主要用于精确测定游离药物的浓度。

超滤离心装置：该装置由离心管和内置的超滤膜组成，通过离心力实现快速分离。其功能是将样品中未与蛋白结合的游离小分子药物过滤到滤液中。

平衡透析仪：仪器包含透析池和半透膜，可在恒温振荡条件下使膜两侧物质交换达到平衡。用于缓慢而温和地分离游离药物与蛋白结合物。

紫外-可见分光光度计：仪器通过测量样品对特定波长紫外或可见光的吸收度来定量分析物质含量。可用于直接测定某些具有特征吸收的药物浓度或监测蛋白浓度变化。

液相色谱-质谱联用仪: 该系统将液相色谱的分离能力与质谱的高灵敏度检测相结合。在复杂生物样品中能特异性强、准确度高地对痕量游离药物进行定性和定量分析。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件