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发布时间:2025-09-15
关键词:细胞凋亡诱导测试案例,细胞凋亡诱导测试方法,细胞凋亡诱导测试仪器
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来源:北京中科光析科学技术研究所
因业务调整,部分个人测试暂不接受委托,望见谅。
凋亡细胞形态学检测:通过显微镜观察细胞核浓缩、细胞膜起泡和细胞体积缩小等典型形态变化,以直观判断凋亡进程,适用于初步筛选和定性分析。
DNA片段化检测:采用凝胶电泳或TUNELassay分析DNA断裂形成的ladderpattern,提供凋亡的特异性证据,用于确认凋亡发生。
线粒体膜电位检测:使用荧光染料评估线粒体膜电位变化,反映线粒体功能状态,早期凋亡指标之一。
Caspase活性检测:通过比色或荧光法测量caspase酶活性,关键于凋亡执行阶段,提供定量数据。
AnnexinV/PI染色:结合流式细胞术区分凋亡细胞(AnnexinV阳性)和坏死细胞(PI阳性),用于细胞状态分类。
细胞色素c释放检测:监测线粒体释放细胞色素c到胞质的过程,通过Westernblot或免疫荧光技术实现。
磷脂酰丝氨酸外翻检测:利用AnnexinV结合检测细胞膜外翻的PS,早期凋亡标志。
凋亡相关蛋白表达分析:采用免疫印迹或ELISA检测Bcl-2、Bax等蛋白表达水平,评估凋亡调控机制。
细胞周期分析:通过流式细胞术分析亚G1峰,定量凋亡细胞比例,基于DNA含量变化。
凋亡指数计算:统计凋亡细胞占总细胞数的百分比,提供定量评估结果。
癌细胞系:如HeLa或MCF-7细胞,用于抗癌药物诱导凋亡的研究和筛选。
正常体细胞:如成纤维细胞,评估生理性或应激诱导的凋亡过程。
动物组织切片:从小鼠或大鼠组织取样,用于在体凋亡检测和病理研究。
血液淋巴细胞:分离自外周血,用于免疫相关疾病或治疗中的凋亡分析。
干细胞群体:如胚胎干细胞,研究分化或凋亡在发育中的作用。
神经元细胞:在阿尔茨海默病等神经退行模型中检测凋亡事件。
心血管细胞:如心肌细胞,用于心脏病模型中的凋亡评估。
肝细胞培养物:在药物毒性测试中监测凋亡作为安全性指标。
肺上皮细胞:应用于呼吸疾病研究,如COPD或肺癌凋亡机制。
皮肤角质形成细胞:在dermatology中研究紫外线或化学诱导的凋亡。
ISO10993-5:2009:医疗器械生物学评价第5部分:体外细胞毒性试验,包括凋亡相关检测方法。
ASTME2526-08:细胞存活力和增殖的标准测试方法,涉及凋亡评估技术。
GB/T16886.5-2017:医疗器械生物学评价第5部分:体外细胞毒性试验,国家标准对应ISO。
ISO13022:2012:医疗产品中细胞凋亡检测的指南性标准,提供一般原则。
GB/T39730-2020:细胞凋亡检测技术通则,规定基本方法和要求。
流式细胞仪:具备激光激发和荧光检测功能,用于多参数分析细胞表面标志物和DNA含量,实现凋亡细胞的高通量定量。
荧光显微镜:提供高分辨率成像和荧光滤镜系统,观察荧光标记的凋亡形态变化,支持定性评估。
酶标仪:具有吸光度和荧光测量模式,用于微孔板-basedassays如caspase活性检测,提供快速定量读数。
离心机:配备转速控制和温度调节,用于细胞分离和样品制备,确保凋亡检测前处理的一致性。
细胞培养箱:维持恒温、湿度和CO2水平,提供细胞生长环境,支持凋亡诱导和培养过程。
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