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酶底物法检测

发布时间:2025-08-13

关键词:酶底物法测试机构,酶底物法测试方法,酶底物法测试案例

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来源:北京中科光析科学技术研究所

文章简介:

酶底物法检测基于微生物特异性酶与底物的反应,通过荧光或颜色信号变化实现目标微生物的定量或定性分析,广泛应用于水质、食品、饲料等领域的微生物监测,是一种特异、高效的检测技术。
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因业务调整,部分个人测试暂不接受委托,望见谅。

检测项目

大肠菌群检测:用于指示水体、食品等样品中是否存在粪便污染,检测限1CFU/100mL,培养温度36℃±1℃,反应时间24小时±2小时。

粪大肠菌群检测:针对粪便来源的大肠菌群,反映近期污染情况,检测限0.1CFU/100mL,培养温度44.5℃±0.5℃,反应时间24小时±2小时。

大肠杆菌(E.coli)检测:检测样品中的致病性大肠杆菌,检测限1CFU/100mL,采用β-葡萄糖醛酸酶底物,荧光检测波长450nm±10nm。

总大肠菌群检测:综合反映样品中大肠菌群总数,检测限1CFU/100mL,培养温度36℃±1℃,反应时间24小时±2小时。

肠球菌检测:指示粪便污染和肠道致病菌存在,检测限1CFU/100mL,采用β-半乳糖苷酶底物,颜色变化为黄色。

产气荚膜梭菌检测:检测厌氧致病性微生物,检测限1CFU/g,培养温度37℃±1℃,厌氧条件(氧气浓度<1%)。

金黄色葡萄球菌检测:检测食品中的致病性葡萄球菌,检测限1CFU/g,采用凝固酶底物,反应时间48小时±2小时。

沙门氏菌检测:检测食品、饲料中的沙门氏菌,检测限1CFU/25g,采用特异性酶底物,荧光信号阈值≥1000RFU。

志贺氏菌检测:检测肠道致病菌志贺氏菌,检测限1CFU/100mL,培养温度37℃±1℃,反应时间24小时±2小时。

铜绿假单胞菌检测:检测水中的铜绿假单胞菌,检测限1CFU/100mL,采用绿脓菌素底物,颜色变化为蓝色。

副溶血性弧菌检测:检测海产品中的致病性弧菌,检测限1CFU/g,采用脂酶底物,反应时间18小时±2小时。

检测范围

生活饮用水:检测大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌等,评估饮用水微生物安全性。

地表水:监测江河、湖泊、水库等水体中的微生物污染,反映水环境质量。

二次供水:检测小区水箱、供水管道中的微生物,保障居民用水安全。

食品加工用水:检测食品生产过程中使用的水,防止微生物污染食品。

饮料(瓶装水、果汁):检测饮料中的微生物,符合食品安全标准。

乳制品(牛奶、酸奶):检测乳制品中的大肠菌群、沙门氏菌等,保障乳制品质量。

方便食品(速食面、速冻食品):检测方便食品中的微生物,防止食用后引发疾病。

蔬菜(生鲜蔬菜、腌制蔬菜):检测蔬菜中的粪大肠菌群、肠球菌等,反映蔬菜卫生状况。

水果(鲜水果、果脯):检测水果中的微生物,保障水果食用安全。

饲料:检测饲料中的大肠菌群、沙门氏菌等,防止动物摄入受污染饲料。

医疗污水:检测医疗污水中的微生物,防止污水排放污染环境。

游泳水:检测游泳池水中的微生物,保障游泳者健康。

检测标准

GB/T 5750.12-2023《生活饮用水标准检验方法 微生物指标》:规定了生活饮用水中大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的酶底物法检测方法。

ISO 9308-2:2012《水质 大肠菌群的检测 第2部分:多管发酵法和酶底物法》:国际标准,适用于水质中大肠菌群的酶底物法检测。

GB 8538-2022《食品安全国家标准 饮用天然矿泉水检验方法》:包含饮用天然矿泉水中微生物的酶底物法检测。

ISO 16649-3:2021《食品和动物饲料的微生物学 肠杆菌科计数方法 第3部分:酶底物法》:国际标准,适用于食品和饲料中肠杆菌科的酶底物法计数。

GB/T 23740-2009《饲料中大肠菌群的测定 酶底物法》:国家标准,规定了饲料中大肠菌群的酶底物法测定方法。

ASTM D6552-20《JianCe Test Method for Determination of Escherichia coli in Water by Enzyme Substrate Technology》:美国标准,用于水中大肠杆菌的酶底物法检测。

GB/T 18204.9-2013《公共场所卫生检验方法 第9部分:游泳水微生物指标》:规定了游泳水中微生物的酶底物法检测。

ISO 21187:2020《水质 肠球菌的检测 酶底物法》:国际标准,适用于水质中肠球菌的酶底物法检测。

GB/T 4789.38-2012《食品卫生微生物学检验 大肠菌群计数》:包含酶底物法在内的大肠菌群计数方法。

ISO 13136:2012《水质 沙门氏菌的检测 酶底物法》:国际标准,用于水质中沙门氏菌的酶底物法检测。

检测仪器

荧光酶标仪:用于检测酶底物反应产生的荧光信号,量程0-10000RFU,检测波长450nm±10nm,支持多通道同时检测。

恒温培养箱:为酶底物反应提供稳定培养环境,温度范围20-50℃,精度±0.5℃,可设置定时启动。

漩涡混合器:用于混匀样品与酶底物试剂,转速0-3000rpm,可调速,适合不同粘度样品。

移液器:准确移取样品、试剂和底物,量程10-1000μL,精度±1%,支持连续分液。

自动微生物检测系统:整合加样、培养、荧光检测流程,每小时处理96个样品,减少人工操作误差。

分光光度计:检测酶底物反应产生的颜色变化,波长范围340-750nm,精度±1nm,吸光度范围0-2.0AU。

厌氧培养箱:为厌氧微生物提供无氧环境,氧气浓度<1%,温度范围25-40℃,适合产气荚膜梭菌检测。

恒温水浴锅:用于酶底物反应的恒温处理,温度范围30-60℃,精度±0.5℃,可容纳多个样品瓶。

检测流程

1、咨询:提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品,安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据,编写报告草件,确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件

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