成脂相关miRNA测序检测

因业务调整，部分个人测试暂不接受委托，望见谅。

检测项目

miRNA提取效率检测：评估生物样本中微小RNA的分离效果；具体检测参数包括浓度测定（ng/μl）、纯度（A260/A280比值）、完整性指数（RIN值）。

高通量测序文库构建：制备用于测序的cDNA文库；具体检测参数包括文库大小（150-300 bp范围）、浓度（nM单位）、接头连接效率（%覆盖率）。

测序深度与覆盖度分析：确保序列数据的全面性；具体检测参数包括reads数量（百万级）、平均覆盖倍数、目标区域覆盖百分比。

miRNA表达定量：计算个体miRNA的表达水平；具体检测参数如reads per million mapped reads (RPM)、标准化因子（TMM或DESeq2）。

差异表达分析：识别成脂相关miRNA的表达变化；具体检测参数包括fold change阈值（≥2倍）、统计显著性（p值<0.05）、错误发现率（FDR校正）。

靶基因预测：推断miRNA的潜在作用目标；具体检测参数使用算法评分阈值（如TargetScan context score >0.5）、结合位点保守性评估。

功能富集分析：揭示靶基因的生物学意义；具体检测参数包括Gene Ontology富集分析（q值<0.1）、KEGG通路富集度（富集因子>1.5）。

定量PCR验证：独立确认测序结果可靠性；具体检测参数如Ct值范围、相对表达量计算（2^-ΔΔCt方法）。

样本质量控制：评估输入材料适用性；具体检测参数包括RNA降解程度（28S/18S比值）、污染物检测（DNA残留率<5%）。

生物信息学流程评估：监控数据处理质量；具体检测参数包括比对率（>90%）、重复序列率（<20%）、错误率（<0.1%）。

序列变异检测：筛查miRNA突变或编辑；具体检测参数包括单核苷酸变异频率阈值（≥5%）、编辑位点鉴定。

表达相关性分析：研究miRNA与成脂标志物关联；具体检测参数如皮尔逊相关系数（绝对值>0.7）、聚类分析参数。

检测范围

脂肪组织活检样本：人类或动物模型的脂肪样本，用于体内脂肪形成机制研究。

脂肪细胞培养模型：体外诱导干细胞分化的脂肪细胞，模拟成脂过程。

血液循环样本：全血或血清样本，分析代谢疾病中的循环miRNA表达。

肥胖研究模型：遗传性或饮食诱导肥胖动物的脂肪组织样本。

糖尿病相关样本：糖尿病动物模型或患者的胰腺及脂肪样本。

营养干预实验样本：饮食调控后的细胞或组织样本，研究营养因子影响。

药物研发样本：测试化合物对miRNA表达作用的细胞培养物。

干细胞分化样本：多能干细胞定向分化为脂肪细胞的各阶段材料。

基因编辑模型：CRISPR技术修饰的细胞或组织，探索基因功能。

临床队列样本：大规模人群研究的脂肪或血液样本，用于流行病学分析。

代谢器官交叉样本：肝脏或肌肉组织，研究器官间调控网络。

动物模型脂肪库：小鼠、大鼠等常见模型的皮下或内脏脂肪样本。

检测标准

ISO 20395:2019 生物技术-高通量测序的质量控制要求。

GB/T 33682-2017 高通量测序数据质量控制通用要求。

ISO/IEC 17025:2017 测试和校准实验室能力的通用要求。

ASTM E2677-2014 基因表达谱分析的标准指南。

GB/T 30999-2014 人类生物样本库基本要求。

MIAME标准 基因表达数据报告最小信息规范。

MINSEQE标准 测序实验最小信息报告准则。

EN ISO 15189:2012 医学实验室质量和能力要求。

检测仪器

高通量测序平台：用于生成miRNA序列数据；在本检测中执行深度测序，产生原始reads文件。

核酸提取系统：高效分离微小RNA分子；具体功能为从组织或细胞中纯化高质量RNA。

文库制备自动化工作站：构建测序文库；功能包括RNA片段化、末端修复和接头连接。

实时荧光定量PCR系统：验证特定miRNA表达水平；功能为测定Ct值并计算差异表达。

生物信息学分析服务器：处理大规模测序数据；功能包括序列比对、表达定量和差异分析。

电泳装置：评估RNA完整性；功能为检测降解程度，确定样本适用性。

冷冻离心设备：处理低温敏感样本；功能为分离样本组分并维持稳定性。

微量分光光度计：测量核酸浓度；功能为量化提取的miRNA浓度和纯度。

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件