骨骼肌AMPK磷酸化检测

因业务调整，部分个人测试暂不接受委托，望见谅。

检测项目

Thr172位点磷酸化定量：采用磷酸化特异性抗体检测AMPKα亚基激活位点，检测限0.1 pg/μg总蛋白

总AMPK蛋白表达量测定：通过化学发光法定量AMPKα/β/γ亚基总量，线性范围1-100 μg/mL

磷酸化/总蛋白比值计算：基于双通道荧光检测系统，比值计算误差≤±5%

组织样本前处理标准化：液氮速冻保存（-196℃），RIPA裂解液配方（pH 7.4±0.2），离心参数（12000g, 4℃, 15min）

磷酸化蛋白稳定性测试：验证-80℃保存条件下样本稳定性（有效期≥6个月）

抗体交叉反应性分析：验证与pACC、pULK1等磷酸化蛋白的交叉反应率（特异性>98%）

细胞模型验证实验：在C2C12肌管细胞中建立葡萄糖剥夺模型（0-120min时间梯度）

激酶活性动力学参数：测定Vmax值（范围0.1-20 nmol/min/mg），Km值检测限0.05 mM

亚细胞定位分析：采用差速离心法分离胞质/线粒体组分（纯度验证≥95%）

信号通路关联指标：同步检测mTORC1（Ser2448）和PGC-1α表达量（相关系数r>0.95）

检测范围

运动人体科学研究：马拉松运动员股外侧肌活检样本的代谢适应机制

代谢疾病模型构建：II型糖尿病模型小鼠腓肠肌组织的病理机制研究

运动补剂功效评价：肌酸/β-丙氨酸等补剂对力量训练者AMPK通路的调控作用

抗疲劳药物开发：中药复方制剂对力竭游泳大鼠比目鱼肌的磷酸化调控

衰老相关肌少症：老年人群骨骼肌卫星细胞磷酸化信号衰退研究

基因编辑动物模型：AMPKγ3基因敲除猪的骨骼肌代谢表型分析

低温环境适应性：极地工作者肱三头肌能量代谢通路的动态监测

航天医学研究：模拟微重力条件下大鼠胫骨前肌萎缩的分子机制

康复医学应用：脑卒中患者康复训练期肌纤维类型转换的磷酸化标记

运动营养干预：低碳水饮食对自行车运动员股直肌AMPK活性的影响

检测标准

ISO 9001:2015质量管理体系在检测流程中的应用

GB/T 27404-2008实验室质量控制规范 理化检测

ISO 17025:2017检测和校准实验室能力通用要求

GB/T 22278-2008良好实验室规范原则

WS/T 420-2013临床实验室定量测定室内质量控制指南

CNAS-CL01:2018检测和校准实验室能力认可准则

GB/T 37864-2019生物样本库质量和能力通用要求

YY/T 1197-2013蛋白质印迹法试剂盒行业标准

ISO 15189:2012医学实验室质量和能力要求

GB/T 34796-2017蛋白质纯化试剂盒

检测仪器

化学发光成像系统：配置1600万像素CCD，动态范围4.8 OD，支持化学发光/荧光双模式检测

微量紫外分光光度计：检测体积0.5 μL，核酸浓度检测范围2-15000 ng/μL

低温超速离心机：最大离心力100000g，温控精度±0.5℃，保障亚细胞组分分离

全自动毛细管电泳仪：分辨率1 bp，可分析DNA/RNA完整性（RIN值>8.0）

实时细胞能量代谢分析仪：同步监测耗氧率（OCR）和细胞外酸化率（ECAR）

多功能酶标仪：配备紫外/可见/荧光/化学发光检测模块，孔间精度CV<1.5%

激光共聚焦显微镜：405/488/561/640 nm四激光配置，Z轴分辨率0.3 μm

生物分子相互作用分析系统：基于表面等离子共振技术，动力学常数测定范围10^3-10^12 M-1s-1

程序降温仪：降温速率0.1-50℃/min可控，保障生物样本低温保存活性

真空冷冻干燥机：冷阱温度-85℃，真空度≤5 Pa，冻干粉水分残留≤3%

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件