TNF-α通路阻断试验检测

因业务调整，部分个人测试暂不接受委托，望见谅。

检测项目

TNF-α受体结合亲和力测定：采用表面等离子共振技术测定解离常数（KD），检测范围10^-12~10^-6 M，结合速率常数(ka)分辨率达1×10^3 M^-1s^-1

NF-κB信号通路激活抑制率：基于荧光素酶报告基因系统，检测灵敏度5 pg/mL TNF-α刺激量，抑制率计算精度±2%

细胞毒性中和试验：使用L929小鼠成纤维细胞系，MTT法检测细胞存活率，EC50测定重复性CV≤15%

下游炎症因子表达量检测：定量IL-6、IL-8、MCP-1表达水平，Luminex多因子检测平台，动态范围3.2~10000 pg/mL

抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC）活性：铬51释放法测定，效应细胞：靶细胞比例梯度为5：1至50：1，特异性裂解率计算误差±3%

补体依赖性细胞毒性（CDC）活性：流式细胞术检测膜攻击复合物C5b-9沉积量，荧光强度分辨率0.5 log

FcγRIIIa结合能力：生物膜干涉技术测定结合动力学，温度控制37±0.1℃

药物靶点占有率分析：质谱流式细胞技术检测受体膜表达量，分辨率达1000个受体/细胞

跨膜TNF-α反向信号传导抑制：Jurkat T细胞活化检测，CD69表达量流式检测精度±1.5%

内毒素干扰排除试验：鲎试剂动态显色法测定，检测限0.005 EU/mL

细胞凋亡抑制率检测：Annexin V/PI双染法，流式细胞仪检测精度10000细胞/样本

信号传导复合物形成阻滞：共聚焦显微成像分析TRAF2募集抑制效率，图像分辨率2048×2048像素

检测范围

抗TNF-α单克隆抗体类药物：包括英夫利昔单抗、阿达木单抗等生物类似药的结构域结合活性验证

可溶性TNF受体融合蛋白：依那西普类分子与TNF-α三聚体结合效能评估

小分子通路抑制剂：JAK/STAT通路阻断剂的NF-κB活化抑制率测定

基因治疗载体：AAV载体介导的sTNFR表达产物功能验证

免疫细胞治疗产品：CAR-T细胞分泌的可溶性拮抗剂活性测定

诊断用抗体试剂：流式检测抗体的表位竞争阻断能力分析

生物材料表面改性涂层：植入器械表面肝素化处理的TNF-α吸附率检测

中药单体成分：雷公藤红素等天然产物的通路阻断活性筛选

医疗器械浸提液：人工关节金属离子对巨噬细胞TNF-α释放的影响评估

细胞培养添加剂：胎牛血清中内毒素诱导的假阳性干扰排除

新型纳米载药系统：脂质体包裹siRNA的TNFR1基因沉默效率验证

组织工程支架材料：胶原支架缓释IL-10对TNF-α产生的抑制作用测定

检测标准

遵循USP<1034>细胞与基因治疗产品分析方法验证

ISO 17025检测和校准实验室能力通用要求

中国药典2020年版通则<3421>生物活性测定法

GB/T 16886.12-2017医疗器械生物学评价第12部分样品制备与参照材料

ASTM E2946-18高通量筛选试验的标准实施规程

ICH Q2(R1)分析方法验证：文本和方法学

EP 5.2.2细胞基质检测法适用性验证

FDA Guidance for Industry Immunogenicity Assessment for Therapeutic Protein Products

GB/T 34826-2017流式细胞术检测凋亡方法通则

ISO 10993-22:2017医疗器械生物学评价第22部分：纳米材料指引

GB/T 39730-2020细胞计数法检测细胞毒性

CLSI EP17-A2临床实验室检测方法检出限和定量限评估指南

检测仪器

高通量细胞成像分析系统：配备环境控制模块（37℃，5% CO2），实现96孔板内实时监测NF-κB核转位动力学，图像采集频率30秒/帧

表面等离子共振仪：配备生物分子相互作用分析模块，传感器芯片金膜厚度50nm，可同时进行8通道实时动力学检测，最小分子量检测限200Da

质谱流式细胞仪：配置135通道检测器，金属标签分辨率达0.3 amu，单细胞检测通量1000细胞/秒，用于TRAF蛋白磷酸化信号网络分析

多功能酶标仪：集成荧光偏振、时间分辨荧光、化学发光检测模块，温控精度±0.1℃，支持1536孔板超高通量筛选

全自动细胞活力分析平台：整合非标记细胞阻抗检测与荧光染色模块，可连续监测72小时细胞增殖曲线，EC50自动计算误差≤5%

激光共聚焦显微系统：配备FRET模块，488nm/561nm双激光激发，60×油镜NA1.4，用于TNF受体二聚化过程原位观测

数字化PCR系统：液滴生成效率98%，通道间温差≤0.5℃，绝对定量TNFR mRNA拷贝数，检测限0.1拷贝/μL

微量热泳动仪：红外激光功率2.5W，温度梯度范围22-45℃，用于小分子化合物与TNFR结合自由能测定

多功能流式细胞分选仪：配置5激光18色检测，分选纯度≥99%，分选速度25000细胞/秒，用于原代巨噬细胞亚群分离

生物分子相互作用分析仪：干涉检测精度0.1 pg/mm²，支持384样品平行检测，用于药物-受体结合热力学参数测定

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件