表达蛋白检测

因业务调整，部分个人测试暂不接受委托，望见谅。

检测项目

纯度分析：通过SDS-PAGE电泳与高效液相色谱（HPLC）测定目标蛋白占比，非还原电泳分辨率达5 kDa，RP-HPLC检测限0.1μg/mL

浓度定量：BCA法检测范围0.5-2000μg/mL，紫外分光光度法精度±2%（A280/A260校正）

分子量测定：MALDI-TOF质谱精度±0.05%，ESI-MS可解析500-500kDa复合物

等电点检测：毛细管等电聚焦（cIEF）分辨率0.05 pI单位，pH梯度范围3-10

二硫键定位：胰蛋白酶酶解后LC-MS/MS分析，Cys残基覆盖度＞98%

糖基化分析：HILIC-UPLC解析N-糖谱，灵敏度10fmol；PNGaseF释放糖链后MALDI-TOF检测

宿主蛋白残留：ELISA检测限0.1ng/mg，Western Blot特异性结合能力1ppm

内毒素检测：鲎试剂法（LAL）动态范围0.001-50EU/mL，符合USP<85>规范

生物活性测定：基于细胞增殖的ED50检测变异系数≤15%，受体结合SPR分析KD值精度10pM

聚集体分析：SEC-MALS联合检测，可分辨0.1%寡聚体，分子量范围10kDa-10MDa

肽图鉴定：Trypsin/Lys-C双酶解，UPLC-QTOF序列覆盖度≥95%，错切率＜2%

残留DNA检测：qPCR定量灵敏度≤10pg/mg，探针法特异性识别CHO/HEK293宿主基因组

检测范围

重组治疗蛋白：含单克隆抗体、融合蛋白、细胞因子等，需完成CQA关键质量属性评估

疫苗抗原：病毒样颗粒（VLP）构象验证，佐剂结合效率检测

体外诊断试剂：标记抗体效价测定，校准品溯源分析

细胞培养上清：表达产物滴度监控，培养基成分干扰排除

蛋白纯化中间体：亲和层析洗脱液纯度监测，离子交换组分收集验证

冻干制剂：复溶稳定性测试，赋形剂相容性分析

工业酶制剂：比活性测定（IU/mg），热稳定性加速实验

蛋白偶联物：抗体-药物偶联物（ADC）药物抗体比（DAR）测定，连接位点确认

细胞治疗产物：CAR蛋白膜表达流式检测，转染效率验证

饲料添加剂：重组酶耐胃酸实验，肠溶包衣完整性测试

生物材料涂层：胶原蛋白交联度测定，表面吸附定量分析

食品强化剂：乳铁蛋白热变性温度（Tm）测定，过敏原交叉反应筛查

检测标准

ISO 13022:2012 医疗产品中重组蛋白活性测定规范

EP 2.6.1 欧洲药典蛋白氮含量凯氏定氮法

USP<129> 高效液相色谱法测定蛋白纯度

GB/T 34800-2017 蛋白质二硫键分析质谱法

ASTM E3029-15 圆二色谱法测定蛋白二级结构

ICH Q6B 生物技术产品特性鉴定标准

CP 2020 3431 中国药典宿主细胞蛋白残留ELISA法

ISO 10993-18 医疗器械材料蛋白吸附评价

GB 5009.8-2016 食品中蛋白质的测定

ISO 21572:2019 食品中转基因生物表达蛋白检测

PDA TR49 生物制品中可见异物检查指南

ASTM WK63561 纳米载体蛋白结合效率测试草案

检测仪器

Agilent 1260 Infinity II HPLC系统：配置DAD/FLD检测器，执行SEC纯度分析，流速精度±0.1%，温控范围4-80℃

Waters ACQUITY UPLC H-Class Bio：采用BEH300 C4色谱柱（1.7μm），完成肽图分离，耐压15000psi

Bruker timsTOF Pro质谱仪：结合PASEF技术实现高通量蛋白鉴定，扫描速度200Hz，分辨率＞60,000

Malvern Panalytical Viscotek SEC-MALS 20：多角度光散射检测器（λ=658nm），联机RI与UV检测，实时计算绝对分子量

Cytation 5细胞成像多功能检测系统：整合荧光显微镜与微孔板阅读器，执行基于报告基因的活性检测，Z轴分辨率0.1μm

BIACORE T200表面等离子共振仪：检测分子互作动力学，流速范围0.1-200μL/min，温控精度0.005℃

Beckman PA 800 Plus药物分析系统：毛细管电泳平台，cIEF分辨率0.02pI，UV检测波长190-600nm

PerkinElmer Lambda 950分光光度计：Far-UV CD光谱范围175-260nm，温控池支持变性温度扫描

Applied Biosystems QuantStudio 7 qPCR仪：执行残留DNA检测，支持TaqMan探针法，动态范围10个数量级

Wyatt DynaPro NanoStar动态光散射仪：检测蛋白流体力学半径，样品体积1μL，温度范围-10-120℃

GE ImageQuant 800凝胶成像系统：ChemiDoc模式检测Western Blot，CCD分辨率400万像素，线性范围4.8 OD

Roche Cedex Bio HT细胞分析仪：自动化监测表达蛋白发酵过程，通量96孔/5分钟，pH/DO测量误差±0.5%

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件