实验dna粗提取与鉴定检测

因业务调整，部分个人测试暂不接受委托，望见谅。

检测项目

组织裂解效率：评估样本破碎程度，参数包括裂解时间（5-60min）与温度（25-65℃）梯度控制

蛋白质污染浓度：采用紫外分光法检测，要求A260/A280比值1.7-2.0，A260/A230>2.0

DNA得率测定：通过荧光定量仪检测，灵敏度0.1ng/μL，线性范围1-1000ng/μL

核酸片段完整性：凝胶电泳分析片段大小，标准主带＞20kb，降解率阈值≤15%

内毒素残留量：鲎试剂法检测，限值＜0.25EU/μg DNA

有机溶剂残留：GC-MS测定乙醇、苯酚残留，检出限1ppm

核酸酶活性检测：DNase I荧光底物法，活性单位≤0.001U/μg

金属离子含量：ICP-MS检测锌、镁等离子，标准值≤5μM

微生物污染：需氧菌总数培养计数，标准＜10CFU/mg

PCR抑制物筛查：扩增效率检测，要求Ct值偏差≤1.5循环

线粒体DNA占比：qPCR定量分析，阈值0.5-15%

单双链DNA比例：PicoGreen双染料法，双链纯度≥95%

检测范围

法医物证检材：血痕、毛发、骨骼等陈旧样本的DNA溯源分析

古生物化石：博物馆藏品及考古发掘物的种属鉴定

转基因作物：玉米、大豆等农产品的外源基因筛查

临床病理样本：福尔马林固定石蜡包埋组织的核酸回收

环境微生物组：土壤、水体中混合微生物群落DNA提取

畜牧育种材料：畜禽精液、胚胎的遗传标记分离

食品安全检测：肉类掺假鉴别中的物种特异性基因提取

濒危物种制品：象牙、犀角等违禁贸易物品的DNA溯源

细胞治疗产品：干细胞治疗剂的供体DNA残留监控

考古人类遗存：古代遗骸的线粒体DNA谱系重建

海洋生物监测：浮游生物环境DNA宏条形码分析

昆虫分类研究：节肢动物几丁质外壳的DNA破壁提取

检测标准

ISO 21571:2005 食品中核酸提取方法验证规范

GB/T 34796-2017 核酸提取纯化试剂盒质量要求

ASTM E2186-02a 法医DNA实验室流程标准

ISO 18385:2016 降低DNA污染风险的耗材生产规范

GB/T 37876-2019 生物样本库DNA质量检测指南

ISO 20395:2018 分子诊断样本制备技术要求

GB/T 40153-2021 超微量核酸浓度测定方法

ISO 22174:2005 微生物PCR检测通用要求

GB/T 35534-2017 基因组DNA完整性检测方法

ASTM E2264-05 法医DNA分型标准协议

检测仪器

冷冻研磨仪：采用液氮低温破碎样本，防止DNA热降解，破碎粒径≤5μm

磁珠法核酸提取仪：磁性分离柱实现自动化纯化，通量96样本/批次

微量紫外分光光度计：检测1μL微量样品，波长范围190-840nm

脉冲场凝胶电泳系统：分离大片段DNA，电压梯度6V/cm，切换角度120°

实时荧光定量PCR仪：定量检测DNA浓度，动态范围10⁷拷贝数

超速离心机：差速离心去除杂质，最大转速150,000×g

纳米孔测序仪：直接读取长片段DNA，读长＞100kb

恒温震荡培养箱：控制裂解温度精度±0.5℃，振荡频率0-500rpm

真空浓缩离心机：快速干燥DNA样本，温度控制范围-10°C至40°C

梯度PCR仪：优化退火温度，温控精度±0.1°C

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件