香囊霉菌孢子PCR检测

因业务调整，部分个人测试暂不接受委托，望见谅。

检测项目

DNA提取纯度检测：检测波长260nm/280nm吸光度比值，要求1.8-2.0，蛋白残留量≤0.5μg/μl

引物特异性验证：包含曲霉属18S rRNA保守区检测，退火温度梯度测试范围52-62℃

PCR扩增效率分析：建立标准曲线，斜率需满足-3.1~-3.6，R²≥0.99

阳性对照设置：采用灰绿曲霉ATCC 16883标准菌株，浓度梯度10³~10⁶CFU/ml

阴性对照设置：包含无模板对照及基质空白对照，循环数设置40轮

电泳分析参数：2%琼脂糖凝胶，电压100V，电泳时间30min，EB染色浓度0.5μg/ml

产物测序验证：双向测序覆盖率≥98%，序列比对相似度阈值设定99%

检出限测定：采用十倍梯度稀释法，最低检测限≤50孢子/g

基质抑制试验：添加内标基因扩增，CT值偏移范围控制在±1.5以内

重复性验证：同批次检测RSD≤5%，批间RSD≤10%

检测范围

中药材香囊：艾叶/薄荷等植物基材，检测水分活度＞0.6的霉变风险

合成香料制品：苯二甲酸二乙酯载体香囊，检测黑曲霉特异性基因

纺织物香囊：棉麻材质内部夹层，重点检测枝孢属污染

驱虫类香囊：除虫菊酯载体，监测青霉属孢子存活率

车载芳香制品：耐高温硅胶载体，检测链格孢属热休克蛋白基因

文物防护香囊：博物馆用缓释型制品，要求黄曲霉毒素B1零检出

宠物除味香囊：蛋白基吸附材料，监测毛霉科微生物增殖

抗菌型香囊：含纳米银成分制品，检测耐药基因表达

食品级香囊：粮油存储用防霉制品，执行赭曲霉毒素A限量0.5ppb

医用芳香疗法制品：检测烟曲霉临床致病株特异性标志物

检测标准

ISO 21567:2004 食品链微生物学-分子检测方法验证规范

GB/T 23783-2009 日用香薰产品霉菌限量要求

ISO 16140-3:2021 微生物检测方法验证-第3部分：定性方法验证

GB/T 38161-2019 常见产毒霉菌检测方法

ASTM D8413-21 环境样品分子生物学检测质量控制指南

WS/T 649-2019 临床微生物检验质量保证要求

GB 38472-2019 消毒剂霉菌抗力鉴定技术规范

ISO 22174:2005 食物链微生物学-聚合酶链反应检测食源性病原体通用要求

检测仪器

生物安全柜：Class II A2型，维持样本制备区正压环境，气溶胶截留率＞99.99%

冷冻离心机：转速范围100-15000rpm，温控精度±1℃，用于孢子富集分离

实时荧光PCR仪：配备FAM/HEX双通道，温控均一性±0.2℃，支持熔解曲线分析

电泳系统：电压范围5-300V，配套凝胶成像仪分辨率≥5百万像素

超微量分光光度计：检测波长190-840nm，样本需求量0.5μl，检测限0.2ng/μl

恒温金属浴：控温范围25-99℃，温度稳定性±0.3℃，用于酶反应终止

高压灭菌锅：灭菌温度121℃，压力0.12MPa，处理器械灭活污染源

超纯水系统：产水电阻率18.2MΩ·cm，TOC≤3ppb，保证试剂配制质量

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件